家蠶抗胰蛋白酶(SW-AT)基因可選擇性剪輯的初步研究.pdf

1、真核基因表達調(diào)控是生命科學(xué)研究的前沿和熱點。RNA的選擇性剪輯在真核基因表達調(diào)控中起著十分重要的作用。選擇性剪輯可使同一基因編碼出功能不同的蛋白，對滿足生物體復(fù)雜性所需蛋白的多樣性具有重要意義。mRNA前體的選擇性剪輯能夠精細(xì)協(xié)調(diào)基因的功能，高效調(diào)節(jié)基因的定量表達以及蛋白功能的多樣化，影響主要發(fā)育方向的決定，對細(xì)胞的分化、發(fā)育、生理功能和病理狀態(tài)都有重要意義。 家蠶是重要的經(jīng)濟昆蟲，也是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的模式生物之一。家蠶屬于

2、鱗翅目昆蟲，其非特異性體液免疫的主要作用物質(zhì)是血液或黏液中的體液因子。而早在1990年，Hiroshi Takagi等人就已證實家蠶抗胰蛋白酶是一類重要的體液免疫因子，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑，能夠抑制酚氧化酶的活性，可能作用于酚氧化酶的活性前體。 本文利用生物信息學(xué)軟件對家蠶抗胰蛋白酶基因的100條EST進行分析與歸納，初步推測SW-AT基因存在四種不同剪輯方式。SW-AT基因四種不同剪輯方式均有10個外顯子和9個內(nèi)含子組成，只

3、有第9外顯子各不相同。根據(jù)SW-AT基因四種不同剪輯方式的核酸序列跨內(nèi)含子設(shè)計特異性引物，通過RT-PCR證實了四種不同剪輯方式的存在，并結(jié)合實時熒光定量PCR對這四種不同剪輯方式進行了組織表達分布、表達時相及其在家蠶不同組織中表達量的研究，結(jié)果表明，SW-AT基因的四種不同剪輯方式在家蠶幼蟲和蛹各個組織均存在明顯的組織特異性；第一種剪輯方式的相對表達量最高，在幼蟲和蛹的脂肪體中，相對于1000個內(nèi)參Bm-Actin A3基因的拷貝數(shù)均