鴨生長曲線擬合及MC4R、PPARγ基因與肌內(nèi)脂肪沉積的相關(guān)研究.pdf

1、黑素皮質(zhì)素受體-4（melanocortin-4 receptor,MC4R）和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators activated receptor-γ，PPARγ)作為兩個調(diào)節(jié)動物體內(nèi)脂肪代謝的重要基因，其mRNA表達量和基因多態(tài)性可能與肌內(nèi)脂肪含量密切相關(guān)。本研究以金陵白鴨、連城白鴨、櫻桃谷鴨和莆田黑鴨四個鴨種作為實驗材料，采用分子數(shù)量遺傳學候選基因法，把肌內(nèi)脂肪性狀的表型信息與分子信

2、息結(jié)合起來進行關(guān)聯(lián)分析。通過改進的索氏抽提法測定不同鴨種在4、6、8、10周齡時胸、腿肌中的肌內(nèi)脂肪含量。將MC4R和PPARγ基因作為影響鴨肌內(nèi)脂肪含量的候選基因，通過對其在鴨胸肌、腿肌中mRNA相對表達量的測定，分析其mRNA相對表達量與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性;并對MC4R和PPARγ基因部分序列進行PCR-RFLP分析，旨在探尋鴨MC4R和PPARγ基因的多態(tài)性，并對這些多態(tài)位點與肌內(nèi)脂肪含量之間進行關(guān)聯(lián)分析，確定所檢測的多態(tài)位點作

3、為分子輔助選擇標記的科學性。主要結(jié)果如下:
　　1)采用Gompertz、Logistic、von Bertalanffy三種非線性數(shù)學模型擬合金陵白鴨、連城白鴨、櫻桃谷鴨、莆田黑鴨0～10周齡的體重增長曲線，結(jié)果表明:上述三種曲線均能較好擬合4個鴨群的體重增長過程，擬合度(R2)均在0.98以上，并在不同鴨群中挑選出相應(yīng)的最佳曲線，建立合理的體重增長擬合方程，為提高選育和保種質(zhì)量提供了理論依據(jù)。
　　2)通過改進的索氏抽提

4、法測定了4種鴨胸肌、腿肌中的肌內(nèi)脂肪含量，并對比分析了不同生長點、不同品種的含量差異，實驗結(jié)果顯示在相同日糧水平下，不同品種的肌內(nèi)脂肪含量差異較顯著，整體上表現(xiàn)為地方品種高于雜交種，雜交種高于外來品種。另外腿肌中肌內(nèi)脂肪含量顯著高于胸肌中(P＜0.05)。
　　3)通過Real-time PCR分析MC4R和PPARγ基因在胸肌、腿肌中的表達量，結(jié)果顯示同一生長階段，不同品種之間相同基因的表達量存在著顯著差異(P＜0.05)。4種

5、鴨胸肌中MC4R基因的表達量在后三個生長階段均顯著高于腿肌中(P＜0.05)，在4廚齡時差異不顯著(P＞0.05);PPARγ基因的表達量表現(xiàn)為前兩個觀測點時胸肌中顯著高于腿肌中(P＜0.05)，后兩個觀測點時腿肌中顯著高于胸肌中(P＜0.05)。通過與相應(yīng)組織中肌內(nèi)脂肪含量的對比分析，發(fā)現(xiàn)MC4R和PPARγ基因的相對表達量與肌內(nèi)脂肪含量呈高度的負相關(guān)，可以為今后家禽育種工作提供分子標記輔助選擇參考。
　　4)以4種鴨肌肉組織為

6、實驗素材提取基因組DNA，針對MC4R和PPARγ基因CDS區(qū)設(shè)計7對特異性引物，并對其進行PCR擴增。測序結(jié)果顯示僅在引物MC4R-S1擴增片段中發(fā)現(xiàn)多態(tài)位點，即MC4R基因CDS區(qū)197bp處發(fā)生了T→A的單堿基突變，導致了第66位氨基酸由纈氨酸變成了谷氨酸，屬于錯義突變。通過PCR-RFLP法分析了S1擴增片段，檢測到TT、TA、AA3種基因型，該多態(tài)位點多態(tài)信息含量(PIC)介于0.25到0.5之間，屬于中度多態(tài)，具有較高的遺傳