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文檔簡介
1、本文以0~6月齡的雄性湖羊羔羊為試驗對象,探討了湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪沉積的發(fā)育性變化以及脂肪沉積和代謝相關(guān)基因表達(dá)的發(fā)育性變化特點(diǎn)。本研究用索氏抽提法測定肌內(nèi)脂肪含量;以GAPDH基因為內(nèi)標(biāo),用real time PCR法對影響肌內(nèi)脂肪含量的部分相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行了相對定量分析;并對基因表達(dá)與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性進(jìn)行了分析。 1.湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪沉積的發(fā)育性變化 (1)湖羊羔羊不同部位肌肉肌內(nèi)脂肪含量
2、在0~6月齡間均呈上升趨勢,5月齡時極顯著高于前面各月齡(P<0.01);在背最長肌中,2月齡時IMF顯著高于初生時(P<0.05);腰大肌IMF在3月齡時顯著高于初生時(P<0.05);后腿股二頭肌IMF在前4個月齡時差異均不顯著;在0~6月齡間,背最長肌IMF含量均高于腰大肌和股二頭?。槐砻骷?nèi)脂肪沉積在綿羊不同部位肌肉沉積的速度有較明顯差異,湖羊肌內(nèi)脂肪的沉積有較明顯的組織特異性。 (2)4~5月齡是湖羊羔羊肌肉脂肪沉積最
3、快的時期,5月齡時的肌內(nèi)脂肪含量在不同肌肉部位都極顯著高于前面各月齡(P<0.01),表明4~5月齡時是湖羊羔羊肌內(nèi)脂肪迅速沉積的一個重要時期。 2.湖羊羔羊肌肉OB基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)在湖羊羔羊背最長肌中,OB基因mRNA表達(dá)水平3月齡時極顯著高于其余各月齡(P<0.01);在腰大肌中,初生時表達(dá)水平最高,顯著高于2~3月齡(P<0.05),3月齡時下降到最低,到4月齡后回升;在前腿肌肉中,初
4、生羔羊的OB基因表達(dá)量最高,顯著高于3、5和6月齡(P<0.05),然后隨月齡增加而波動下降,6月齡時降到最低;后腿肌肉中,初生時OB基因表達(dá)量較低,隨月齡的增加而上升,3月齡時升到最高,極顯著高于初生時(P<0.01),顯著高于其余各月齡(P<0.05),然后4月齡時回落,并保持這種低水平表達(dá); (2)初生時腰大肌和前腿肌肉OB基因表達(dá)水平極顯著高于背最長肌和后腿肌肉(P<0.01),3月齡時背最長肌極顯著高于腰大肌和前腿肌肉
5、(P<0.01),后腿肌肉顯著高于腰大肌和前腿肌肉(P<0.05);表明OB基因mRNA表達(dá)水平發(fā)育性變化在湖羊羔羊肌肉中表現(xiàn)出較明顯的組織特異性; (3)背最長肌中OB基因的表達(dá)與IMF在3~6月齡間成負(fù)相關(guān)(r=-0.405,P=0.119),股二頭肌OB基因的表達(dá)量與IMF在3~6月齡間成負(fù)相關(guān)(r=-0.303,P=0.194),表明OB基因在肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪的沉積起著一定的負(fù)作用。 3.湖羊羔羊肌肉OB
6、R基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)OBR基因mRNA在湖羊羔羊不同部位肌肉中的發(fā)育變化模式基本相同,即在剛出生時表達(dá)量均較低,然后隨月齡增加而上升,到3月齡時各部位均升到最高,然后又下降,保持一個相對較低的水平;腰大肌中,2月齡時OBR mRNA的表達(dá)水平極顯著高于0~1月齡和4~6月齡(P<0.01);背最長肌中OBR表達(dá)水平在3月顯著高于2和6月齡(P<0.05);OBR基因在肱二頭肌中的表達(dá)水平在3月齡時極
7、顯著大于其余各月齡(P<0.01);在股二頭肌中,3月齡時OBR基因表達(dá)水平極顯著大于0~1和5~6月齡(P<0.01),顯著高于4月齡(P<0.05),6月齡水平顯著低于2月齡(P<0.05); (2)2月齡時股二頭肌OBR基因mRNA表達(dá)量極顯著高于背最長肌(P<0.01),3月齡時肱二頭肌和股二頭肌均高于腰大肌和背最長肌(P<0.05),4月齡時股二頭肌極顯著高于腰大肌(P<0.01),表明OBR基因在湖羊羔羊肌肉中的表
8、達(dá)呈現(xiàn)出組織特異性和時序性發(fā)育變化模式; (3)股二頭肌中OBR基因的表達(dá)量與IMF在本研究中的各月齡均呈明顯的負(fù)相關(guān)(r=-0.433,P=0.012);在背最長肌(r=-0.128,P=0.209)和腰大肌中(r=-0.254,P=0.168)也發(fā)現(xiàn)成負(fù)相關(guān),表明OBR基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪的沉積也起一定的負(fù)作用。 4.湖羊羔羊下丘腦OBR基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)湖羊羔羊下丘
9、腦OBR基因在0~6月齡間保持穩(wěn)定表達(dá)水平; (2)湖羊下丘腦OBR基因表達(dá)水平與各部位肌肉肌內(nèi)脂肪含量無明顯相關(guān)性。 5.湖羊羔羊肌肉FAS基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)湖羊羔羊背最長肌中FAS基因mRNA表達(dá)在初生時較低,然后波動上升,到5月齡時升到最高(P<0.01); (2)除4月齡時,腰大肌FAS基因mRNA水平均極顯著高于其余各部位肌肉(P<0.01);2月齡和5~6月齡時背最
10、長肌FAS表達(dá)也極顯著高于其余各部位(P<0.01);3月齡時前腿肌肉FAS mRNA水平極顯著高于其它部位肌肉(P<0.01)。表明FAS基因表達(dá)在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化有明顯的組織特異性; (3)背最長肌FAS基因表達(dá)量與IMF在0~6月齡呈極顯著正相關(guān)(r=0.606,P=0.005),腰大肌中FAS基因表達(dá)量與IMF在4~6月齡呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.360 P=0.187),股二頭肌中FAS基因表達(dá)量與IMF在4~6
11、月齡呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.471,P=0.076),表明FAS基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪的沉積可能起著正向調(diào)控的作用。 6.湖羊羔羊肌肉HSL基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)HSL基因在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化表現(xiàn)為:背最長肌中初生時最低,隨月齡的增加上升,3月齡時出現(xiàn)峰值,顯著高于0~1月齡(P<0.05),然后又下降,6月齡時升到最高,極顯著高于以前各月齡(P<0.01);腰大肌中表現(xiàn)為“下降-
12、上升-下降-上升”的模式,3月齡時最高,極顯著高于1和4月齡(P<0.01); (2)在0~6月齡,腰大肌中HSL,基因mRNA表達(dá)量均極顯著高于其它部位(P<0.01),0月齡時背最長肌極顯著低于其它部位(P<0.01),4月齡時股二頭肌極顯著低于其余部位(P<0.01),6月齡時背最長肌極顯著高于前腿和后腿肌肉(P<0.01);表明HSL基因表達(dá)在湖羊羔羊肌肉中的發(fā)育性變化有明顯的組織特異性,其中在腰大肌中的表達(dá)量顯著高于其
13、余各肌肉部位; (3)對湖羊羔羊不同部位肌肉中HSL基因的表達(dá)量和IMF的相關(guān)性分析表明:各部位肌肉中兩者均呈正相關(guān)關(guān)系,其中背最長肌在0~6月齡呈極顯著相關(guān)(r=0.630,P=0.0003),腰大肌和股二頭肌中4~6月齡兩者的相關(guān)系數(shù)分別為0.589(P=0.020)和0.280(P=0.121),表明HSL基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪沉積的調(diào)控可能不是在mRNA水平,可能在蛋白水平上。 7.湖羊羔羊肌LPL基因
14、表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)LPL基因在湖羊羔羊不同肌肉部位表現(xiàn)出較明顯的差異:在背最長肌中LPL基因的表達(dá)隨月齡的增加而上升,到5月齡時升到最高,顯著高于1~4月齡(P<0.05),極顯著高于0月齡(P<0.01);在腰大肌中LPL水平初生時較高,到1月齡時上升,到3月齡間穩(wěn)定,4月齡時下降到最低,5~6月齡回升到1~3月齡時的水平,各月齡間差異不顯著;前腿肌肉中,0~2月齡保持穩(wěn)定,3月齡時升到最高,4月時下降
15、,5月齡時上升,到6月又下降,其中3和5月齡時的表達(dá)量極顯著高于其余各月齡(P<0.01); (2)在剛出生時,股二頭肌中LPL mRNA水平極顯著高于其余部位肌肉(P<0.01),1~2月齡時腰大肌和股二頭基因表達(dá)量均高于另外兩個研究部位(P<0.05),3月齡時股二頭肌極顯著高于背最長肌(P<0.01),4月齡時背最長肌和股二頭肌均顯著高于另外兩個部位(P<0.05),6月齡時肱二頭肌極顯著低于其余三個部位(P<0.01);
16、 (3)湖羊羔羊背最長肌中LPL基因的表達(dá)量與IMF在0~6月齡呈極顯著正相關(guān)(r=0.503,P=0.005),在股二頭肌肌肉中,LPL基因mRNA水平與IMF呈正相關(guān)(r=0.294,P=0.102),表明LPL基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪的沉積有一定的積極作用。 8.湖羊肌肉UCP3基因表達(dá)的發(fā)育性變化及其對IMF的影響 (1)湖羊羔羊不同部位肌肉中UCP3基因表達(dá)的發(fā)育性變化表現(xiàn)為:在背最長肌中,初生
17、時較高,到1月齡時升到最高,然后隨月齡增加下降,6月齡時降到最低,各月齡間差異不顯著;腰大肌中表現(xiàn)為先上升后下降的模式,3月齡時出現(xiàn)峰值,各月齡間差異不顯著;前腿肌肉中初生時較高,1月齡有所下降,2月齡升到最高值,3月齡下降到最低,4月齡回升后又逐漸下降,各月齡間差異不顯著;后腿肌肉在各月齡間保持較穩(wěn)定的水平,沒有較大差異; (2)在3月齡時腰大肌中刪基因表達(dá)水平顯著高于其余三個肌肉部位;表明UCP3基因在湖羊不同部位肌肉中的發(fā)
18、育性變化有差異,但差異不明顯。 (3)湖羊羔羊背最長肌中UCP3基因的表達(dá)量與背最長肌IMF在0~6月齡呈負(fù)相關(guān)(r=-0.211,P=0.262);在股二頭肌肌肉中,UCP3基因mRNA水平與股二頭肌中IMF在2~6月齡間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.209,P=0.328);在腰大肌中,UCP3基因的表達(dá)量與IMF在3~6月齡成負(fù)相關(guān)(r=-0.286,P=0.266),表明UCP3基因在湖羊肌肉中的表達(dá)對肌內(nèi)脂肪的沉積可能起著負(fù)向調(diào)
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