主動(dòng)免疫腎上腺素能受體肽苗對大白鼠、小白鼠和綿羊生長及血清生化指標(biāo)的影響.pdf

1、本試驗(yàn),通過原核表達(dá)制備綿羊α2A-AR、β2-AR第二外環(huán)肽,主動(dòng)免疫大白鼠、小白鼠和綿羊后測定對生產(chǎn)性能、屠宰指標(biāo)、血清生化指標(biāo)的影響。主要研究工作如下:
　　腎上腺素能受體肽苗的制備以DNA重組技術(shù)構(gòu)建綿羊α2A-腎上腺素能受體(α2A-AR)和β2-腎上腺素能受體(β2-AR)第二外環(huán)肽表達(dá)載體,以IPTG誘導(dǎo)其在大腸桿菌E.coliBL21(DE3)中表達(dá),為制備廉價(jià)的腎上腺素能受體肽苗提供基礎(chǔ)。結(jié)果表明,重組綿羊α2A

2、-AR、β2-AR第二細(xì)胞外環(huán)分子量與預(yù)期的25.3、27.39KDa相符合。在誘導(dǎo)0、30、60、90和120min后重組綿羊α2A-AR第二細(xì)胞外環(huán)肽占細(xì)菌總蛋白的比例分別為0％、25.0%、46.7%、61.7%和60.5%;重組綿羊β2-AR第二細(xì)胞外環(huán)肽占細(xì)菌總蛋白的比例分別為0%、26.4%、40.3%、59.2%和60.0%。經(jīng)親和層析純化后重組綿羊α2A-AR、β2-AR第二細(xì)胞外環(huán)肽分別占總蛋白的97.4%、97.7%

3、。
　　主動(dòng)免疫腎上腺素能受體對大白鼠生長及血液理化指標(biāo)的影響選擇80只體重124g左右的雌性SD大白鼠,隨機(jī)分成5組(每組n=16),分別為對照組、口服β2-AR激動(dòng)劑鹽酸克倫特羅3mg/kg(CL組)、主動(dòng)免疫重組綿羊α2A-AR肽苗(α2A-AR組)、β2-AR肽苗(β2-AR組)和化學(xué)合成β2-AR肽苗(SP組)。免疫組在第一周初次免疫相應(yīng)的抗原(70μg/只),第三周加強(qiáng)免疫(35μg/只)。激動(dòng)劑組從試驗(yàn)開始第三周添加

4、激動(dòng)劑(3mg/kg飼料)。對照組和激動(dòng)劑組分別在第一周和第三周免疫等體積的生理鹽水。大白鼠自由采食和飲水,每周斷料12h并稱取體重,至第七周末結(jié)束。試驗(yàn)結(jié)果表明,重組肽苗均可刺激機(jī)體產(chǎn)生較高水平的抗體水平,但合成肽的抗體水平偏低。主動(dòng)免疫基因工程疫苗或化學(xué)合成肽苗對大白鼠體重、屠宰性能均無影響(P<0.05)。CL組與對照組相比腹脂/活重降低76.74%(P<0.05),TG降低28.13%(P<0.05);β2-AR組TG、TC分別

5、比對照組升高34.15%(P<0.05)、22.94%(P<0.05);SP組GLU比對照組升高35.45%(P<0.05),TC升高20.59%(P<0.05)。
　　主動(dòng)免疫腎上腺素能受體對小白鼠生長及血液理化指標(biāo)的影響選擇100只體重22g左右的雌性昆明小白鼠,隨機(jī)分成5組(每組n=20),分別為對照組、CL組、α2A-AR組、β2-AR組和SP組。免疫組在第一周初次免疫相應(yīng)的抗原(30μg/只),第三周加強(qiáng)免疫(15μg/

6、只)。激動(dòng)劑組從試驗(yàn)開始第三周添加激動(dòng)劑(3mg/kg飼料)。對照組和激動(dòng)劑組分別在第一周和第三周免疫等體積的生理鹽水。試驗(yàn)期間,大白鼠自由采食和飲水,每周斷料12h并稱取體重,至第七周末結(jié)束。試驗(yàn)結(jié)果表明,CL組屠宰率顯著高于其它各組(P<0.05),腸系膜脂肪占活重的百分比顯著低于其它各組(P<0.05),腿肌占活重的百分比顯著高于其它各組(P<0.05),TG比對照組降低17.69%(P>0.05),LDL-C比對照組降低12.3

7、5%(P>0.05);α2A-AR組、β2-AR組和SP組對大白鼠采食、體重和屠宰性能無影響;α2A-AR組和SP組的LDL-C分別比對照組降低19.74%(P<0.05)、12.35%(P>0.05)。
　　主動(dòng)免疫腎上腺素能受體對綿羊生長及血液理化指標(biāo)的影響選取12只體重31kg左右雄性阿勒泰羊,隨機(jī)分為對照組和β2-AR組2組。1d免疫,15d后加強(qiáng)免疫。自由采食和飲水,每15d稱重,空腹頸靜脈采血15min/次,4次。先精

8、后粗采食1h后靜脈采血15min/次,4次。90d所有動(dòng)物屠宰稱量胴體,血清用于測定抗體水平和生化指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明,β2-AR肽苗對采食、增重和飼喂后的血清生化指標(biāo)均無影響;15d飼喂前β2-AR組GLU比對照組升高21.74%(P<0.05),60d飼喂前β2-AR組LDL-C比對照組降低15.19(P<0.05);β2-AR組屠宰率比對照組高4.60%(P<0.05)。
　　以上結(jié)果顯示:大白鼠、小白鼠和綿羊主動(dòng)免疫腎上腺素