山東省桑萎縮、棗瘋病、竹叢枝及三種新植原體病害分子檢測與鑒定.pdf

1、本論文主要對山東省桑萎縮、棗瘋病及竹叢枝植原體進(jìn)行了分子檢測與鑒定，并初步檢測與鑒定了莧菜、黃荊和馬褂木三種植物植原體新病害。 采集山東泰安表現(xiàn)黃化型萎縮病桑樹材料，通過PCR擴(kuò)增16SrRNA基因、延伸因子基因(tuf)及核糖體蛋白基因(rp)，分別得到大小約為1.4kb、0.8kb和1.2kb的目的片段并進(jìn)行了序列測定。對16SrRNA基因、延伸因子基因和核糖體蛋白基因的核苷酸序列利用pDRAW32軟件進(jìn)行RFLP分析并構(gòu)建

2、系統(tǒng)發(fā)育樹，確定了該植原體在三個(gè)基因水平的亞組分類地位，分別為屬于16SrI-B、tufI-B和rpI-B亞組。 采集山東省十一個(gè)不同地區(qū)疑似棗瘋病的病害樣品，PCR檢測結(jié)果表明所采集樣品內(nèi)有植原體存在，通過分析16SrRNA基因和rp基因的核苷酸序列，明確了山東省棗瘋病植原體屬于16SrV-B亞組。并對泰安的棗瘋病材料進(jìn)行電鏡觀察，檢測到了植原體菌體的存在。 從山東濟(jì)南、日照和泰安分別采集得到了表現(xiàn)叢枝癥狀的竹子材料，

3、克隆了其16SrRNA基因，進(jìn)行核苷酸序列比對和RFLP分析。引起山東省竹叢枝的植原體屬于翠菊黃化組的16SrI-B亞組，與國內(nèi)已經(jīng)報(bào)道的竹叢枝屬于同一個(gè)組，進(jìn)一步證明了與竹叢枝病相關(guān)的植原體株系分布的廣泛性。 分別提取表現(xiàn)褪綠的莧菜、葉片黃化的馬褂木和表現(xiàn)黃化的黃荊三種植物組織的總DNA，進(jìn)行直接PCR或nested-PCR檢測，從這三種植物材料均擴(kuò)增得到了植原體的16SrRNA基因，并進(jìn)一步從表現(xiàn)褪綠癥狀的莧菜組織中擴(kuò)增得到