前列腺素合成酶在腎及胃分布的探討

1、<p>　　前列腺素合成酶在腎及胃分布的探討</p><p>　　作者：沈瑞蓮 張國(guó)鏡 金潔 王偉 邢安鳳 周秀艷</p><p>　　【摘要】 前列腺素合成酶是人體內(nèi)重要的酶系，對(duì)其的研究目的旨在為臨床醫(yī)學(xué)、病理學(xué)提供形態(tài)學(xué)參考依據(jù)。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 前列腺素合成酶; 分布; 平均灰度值</p><p>　　

2、前列腺素合成酶是與膜結(jié)合的多酶體系，催化、氧化、環(huán)化、還原作用一系列反應(yīng)，前列腺素是由花生四烯酸衍生而成的。在組織切片上顯示前列腺素合成酶的原理是該酶可催化底物花生四烯酸氧化成前列腺素，反應(yīng)中所形成的活潑氧原子又使3.3-二氨基聯(lián)苯膠形成棕色沉淀，以間接證實(shí)前列腺素合成酶的存在。</p><p><b>　　1 材料與方法</b></p><p>　　正常Wistar

3、大鼠和昆明小鼠，體重分別為200g和20g左右，取其胃和腎，冰凍切片。用Janszen顯示法?；ㄉ南┧?.4mg，DAB 2mg， KCN 0.65mg，0.2MTrisHCI緩沖液(pH8.0 ) 10ml，35℃孵育3小時(shí)，孵育后標(biāo)本用蒸餾水洗，分別用甘油明膠和中性樹膠封片。經(jīng)LeicaQ50 OMC圖像分析儀進(jìn)行平均灰度值( Mean.Crey.MG)的測(cè)定，用于進(jìn)行酶組織化學(xué)反應(yīng)強(qiáng)度分析。</p><p&

4、gt;<b>　　2 結(jié)果</b></p><p>　　前列腺素合成酶反應(yīng)產(chǎn)物為棕色顆粒，在大、小鼠的反應(yīng)部位基本相同。在小鼠腎臟，腎皮質(zhì)深層靠近髓質(zhì)陽性反應(yīng)產(chǎn)物，主要以近端小管曲部為主。在小鼠胃黏膜的近黏膜下層有陽性反應(yīng)產(chǎn)物。在大鼠腎和胃也獲相同結(jié)果。經(jīng)圖像分析儀測(cè)量每種組織切片5張，共測(cè)50視野。每種組織在不同封固條件下各測(cè)定一張蓋玻片下無切片，但有封固劑的區(qū)域?yàn)榭瞻讓?duì)照。按腎、胃的順序

5、，而以明膠在前，樹膠在后的排序測(cè)量，所獲平均灰度值如下:小鼠222.91±9236.33±18.14209.42±7.50227.96±13.36大鼠217.42±6.0622701±11231.11±12.87225.83±10.15</p><p><b>　　3 討論</b></p><

6、p>　　通過對(duì)大、小鼠腎臟前列腺素合成酶組織化學(xué)反應(yīng)的觀察發(fā)現(xiàn)，陽性反應(yīng)的部位基本相同，均位于皮質(zhì)深層三分之二區(qū)域，而皮質(zhì)淺層三分之一處基本無反應(yīng)。說明在大、小鼠，前列腺合成酶在作用于花生四烯酸，合成前列腺素并無明顯差別。腎正常血流量的維持及調(diào)節(jié)有賴于前列腺素的產(chǎn)生。由于前列腺素有明顯的舒張血管的作用，在腎內(nèi)使腎血管擴(kuò)張?jiān)黾幽I血流量及腎血流的重新分布起到降壓和調(diào)節(jié)動(dòng)脈壓的作用。在某些病理情況下，缺乏前列腺素一方面可導(dǎo)致血管收縮和高

7、血壓，另一方面腎內(nèi)前列腺素缺乏可引起腎皮質(zhì)血流減少，于是引起腎素釋放使腎素血管緊張素系流被激活，促使血壓升高而腎皮質(zhì)本身具有較強(qiáng)的合成前列腺素的功能[1]，也從側(cè)面加以印證。</p><p>　　在胃黏膜近黏膜下層的較大區(qū)域中，前列腺素合成酶的組織化學(xué)反應(yīng)較強(qiáng)，說明前列腺素的功能較強(qiáng)，這與抑制胃蒙古膜壁細(xì)胞分泌胃酸過多維持胃液整體平衡有密切關(guān)系，在胃液分泌的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制中起重要作用。至于抑制機(jī)理可能是作用于腺甘

8、酸環(huán)化酶系統(tǒng)，阻止:cAMP的生成，而cAMP被認(rèn)為是促進(jìn)胃酸分泌的媒介。</p><p>　　從分布部位看，前列腺素合成酶的酶組織化學(xué)反應(yīng)強(qiáng)度的差異并不十分明顯。平均灰度值差異很小。另外，從前列腺素的分布來看，酶組織化學(xué)反應(yīng)的結(jié)果與生物化學(xué)理論并不完全相符。由本實(shí)驗(yàn)觀察可知，前列腺素合成酶的陽性反應(yīng)部位是在腎皮質(zhì)深層的區(qū)域，主要在近曲小管;而生物化學(xué)理論所描述的是在腎髓質(zhì)，主要在腎集合小管細(xì)胞、腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞、

9、及腎間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)合成。由于腎血流量大、血流速度快且腎皮質(zhì)的血流量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于腎髓質(zhì)的特點(diǎn)，前列腺素合成酶活性較強(qiáng)的部位是在腎皮質(zhì)，但其并不一定是前列腺素發(fā)揮作用較強(qiáng)的區(qū)域。很有可能此酶在腎皮質(zhì)合成以后隨血液循環(huán)被運(yùn)輸?shù)侥I髓質(zhì)而發(fā)揮其生物學(xué)活性。前列腺素除對(duì)腎臟和胃的作用外，對(duì)水電解平衡、血小板、生殖系統(tǒng)[2]、心血管系統(tǒng)以及神經(jīng)系統(tǒng)均有調(diào)節(jié)作用。本研究的目的僅在于為上述功能的調(diào)節(jié)及該沒在臨床的應(yīng)用提供形態(tài)學(xué)參考依據(jù)。</p>