棘胸蛙微衛(wèi)星分子標記篩選及其種群遺傳分析.pdf

1、全球范圍內兩棲動物種群已呈衰退趨勢，保護形勢嚴峻。兩棲動物非常適合于種群動態(tài)和保護生物學相關問題的研究，一直被作為生態(tài)環(huán)境監(jiān)測的重要指示類群。對于中國境內的大多數無尾兩棲動物而言，生物多樣性保護優(yōu)先區(qū)的確定和評估都缺乏基礎數據，同時由于兩棲動物相對較弱的遷徙能力，針對一些中國特有種的研究具有重要的研究價值。棘胸蛙(Paa spinosa)，廣泛分布于我國長江以南，少量分布于越南北部地區(qū)。棘胸蛙具有很高的營養(yǎng)價值，是國內重要的養(yǎng)殖蛙類之一

2、，但是野生種群破壞嚴重，是中國境內的珍稀瀕危保護動物，同時也是世界自然保護聯(lián)盟(IUCN)評估的全球性易危種。針對棘胸蛙的遺傳標記開發(fā)和種群遺傳研究既有助于該物種的保護，也是開展中國兩棲動物系統(tǒng)地理研究的基礎性研究。本文應用微衛(wèi)星分子標記研究13個棘胸蛙地理種群的遺傳多樣性和遺傳結構，主要研究內容如下： 利用磁珠富集法從棘胸蛙富集文庫中成功篩選出15個微衛(wèi)星高度多態(tài)性位點。位點平均等位基因數目為9-23，觀測雜合度和期望雜合度分

3、別為0.393-0.906和0.432-0.955。這些多態(tài)性標記將為棘胸蛙種群的遺傳多樣性，種群遺傳結構，基因流，親子鑒定等研究提供一個有力的工具。 利用已篩選的12個多態(tài)性微衛(wèi)星標記評價了分布區(qū)內13個自然種群共210個樣本的遺傳多樣性和遺傳分化。分析結果顯示，棘胸蛙群體的遺傳多樣性非常豐富，在所有的12個位點上共擴增得到206個等位基因，平均每個位點擴增得到17.15個。群體的平均期望雜合度分別為0.7212(0.676-

4、0.892)。不同的地理群體之間有較大的遺傳分化(FST=0.114)。采用基于貝葉斯法的聚類算法分析數據，顯示本實驗涉及的樣本由中國西部、中國中部、中國東部三個遺傳單元構成。采用鄰接法分析并構建系統(tǒng)發(fā)生樹也支持上述結果。各遺傳單元和其地理分布基本一致。分子變異分析(AMOVA)顯示各個遺傳單元具有高度的遺傳差異，并且各單元之間顯示較低的基因流。同時在在12個座位中，我們發(fā)現多個等位基因為某單元所特有，揭示了各遺傳單元之間可能存在生殖隔