耐酸性香菇菌絲液體發(fā)酵及多糖生物活性研究.pdf

1、木腐菌香菇（Lentinulaedodes）是一種著名的食藥用真菌，內(nèi)含的生物大分子——香菇多糖具有多種生理活性功能。目前，由于香菇子實體中的多糖含量有限，獲得高產(chǎn)香菇多糖的液體發(fā)酵和分離純化工藝條件備受人們關(guān)注。本文通過篩選耐酸香菇菌絲誘變體，進而對其培養(yǎng)條件進行優(yōu)化，以期為研究在酸性條件下香菇菌絲的開放式培養(yǎng)及工業(yè)化生產(chǎn)打下基礎(chǔ)。
　　本研究通過紫外輻照、酸性選擇培養(yǎng)基，篩選出一株在強酸性環(huán)境下(pH為2.0)能夠良好生長的香

2、菇耐酸誘變體Atm-02，為香菇菌絲的開放式培養(yǎng)奠定了一定的基礎(chǔ)。通過單因素實驗，確定了該香菇菌絲發(fā)酵培養(yǎng)的優(yōu)化培養(yǎng)基為:蔗糖30～40g/L，牛肉浸膏7.0g/L，KH2PO4和MgSO4分別為4.0g/L和2.0g/L，維生素B10.15g/L;確定了該香菇菌絲的優(yōu)化培養(yǎng)條件為:溫度26℃，培養(yǎng)基裝液量100mL/250mL三角瓶，搖瓶轉(zhuǎn)速180rpm，種子液接種量為10％。在上述條件下，Atm-02的開放式搖瓶培養(yǎng)(pH為2.0)

3、結(jié)果顯示胞外多糖最高產(chǎn)量可達到0.172±0.023g/100mL發(fā)酵液。
　　香菇胞外多糖在DEAE-52離子交換柱上進行分離純化，得到中性多糖、酸性多糖兩個主要組分，且得率分別為12.9％、40.9％。通過紙層析法、SephadexG-100凝膠柱層析法，結(jié)果表明兩種多糖均為單一組分。
　　紫外光譜檢測發(fā)現(xiàn)，中性多糖、酸性多糖均含多糖成分，不含蛋白質(zhì)和核酸;紅外光譜掃描結(jié)果顯示，兩種多糖均具有糖類的特征吸收峰，進一步推測

4、中性多糖可能為均一的β-葡聚糖，酸性多糖為α-葡聚糖。1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化HPLC法分析多糖中單糖的組成，結(jié)果表明:中性多糖主要由葡萄糖、甘露糖、鼠李糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖六種單糖組成，其中葡萄糖是主要組分;酸性多糖主要含有葡萄糖，還有微量的甘露糖。
　　不同純度的香菇胞外多糖均有一定的抗氧化活性，其中粗多糖、脫蛋白多糖總還原能力較強，分別為43.60±0.31mgVC/g、36.78±0.26mgVC/g,