液體發(fā)酵法生產(chǎn)香菇多糖關(guān)鍵技術(shù)的研究.pdf

1、食用菌不僅營養(yǎng)豐富、味道鮮美，而且通常具有提高人體免疫力、抗腫瘤、抗氧化活性、抗衰老、降血糖、降血脂、降血壓、抗病毒、抗輻射等醫(yī)藥保健功效。大量試驗(yàn)證明，食用菌中的主要功效成分是多糖。爪哇香菇作為眾多食用菌中的一種，其多糖成分可能存在巨大的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值，而國內(nèi)外對爪哇香菇的研究還處于明顯的空白。本課題對適宜爪哇香菇生長的母種培養(yǎng)基、液體種子培養(yǎng)基、液體發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件進(jìn)行了初步的研究。 爪哇香菇母種培養(yǎng)基篩選的研究通過單因素

2、隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)對10種馬鈴薯半合成培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選，以期從中篩選出菌絲生長旺盛，菌落邊緣整齊、氣生菌絲量正常、萌發(fā)快、日平均生長速度快，所需滿管時(shí)間短的適宜擴(kuò)種繁殖的母種培養(yǎng)基。結(jié)果表明，最適宜爪哇香菇菌絲生長的培養(yǎng)基分別為培養(yǎng)基A8：馬鈴薯20％，葡萄糖2％，麩皮2％，玉米粉2％，蛋白胨0.2％，MgS04“7H2O0.05％，KH2P040.1％，維生素B10.001％，瓊脂2％和培養(yǎng)基A10：馬鈴薯20％，葡萄糖2％，麩皮5％，酵母

3、膏0.25％，蛋白胨0.1％，MgS04”7H2O 0.05％，KH2P040.1％，瓊脂2％。 在爪哇香菇液體種子培養(yǎng)基的研究中，綜合考慮培養(yǎng)基澄清度、菌球形態(tài)、菌絲球個(gè)數(shù)和菌體干重各項(xiàng)指標(biāo)，首先從6種液體種子培養(yǎng)基中初篩出一種最適合爪畦香菇生長的培養(yǎng)基。然后在初篩的基礎(chǔ)上，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化了該最適培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)成分，即碳源和氮源。試驗(yàn)結(jié)果表明，最適合爪哇香菇生長的液體種子培養(yǎng)基為：玉米粉4％、蔗糖2.5％、酵母膏0.3％、

4、KH2P04 0.1％、MgS04'7H2O 0.059/0、維生素B0.005％、pH5.25。 爪哇香菇液體發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化研究，以胞內(nèi)多糖產(chǎn)量為指標(biāo)，通過一系列單因素試驗(yàn)考察了碳、氮源種類及濃度對爪哇香菇菌絲體液體發(fā)酵產(chǎn)胞內(nèi)多糖的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，選取2％葡萄糖和2.5％可溶性淀粉為最佳碳源，0.1％酵母膏為最適宜氮源。在此基礎(chǔ)之上，又通過b(34)正交試驗(yàn)確定了液體發(fā)酵培養(yǎng)基中.KH2P04、MgS04‘7H2O和維生

5、素B1的最佳配比，試驗(yàn)結(jié)果表明，KH2P04 0.1％、MgS04‘7H2O 0.05％和維生素B1 0.001％最有利于液體發(fā)酵爪哇香菇菌絲體產(chǎn)胞內(nèi)多糖。最終優(yōu)化出的適于爪哇香菇菌絲體液體發(fā)酵產(chǎn)胞內(nèi)多糖的培養(yǎng)基為：2％葡萄糖、2.5％可溶性淀粉、0.1％酵母膏、KH2P04 0.1％、MgS04'7H2O 0.05％和維生素B1 0.001％。在優(yōu)化了液體發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)之上，本課題又對適宜爪哇香菇菌絲體液體發(fā)酵的條件進(jìn)行了系統(tǒng)的研究

6、。通過一系列單因素試驗(yàn)考察了培養(yǎng)基起始pH、搖瓶裝液量、搖床振蕩頻率以及培養(yǎng)天數(shù)對爪哇香菇液體發(fā)酵產(chǎn)胞內(nèi)多糖的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，起始pH4～5、250ml三角瓶裝液量50ml～100ml、搖床振蕩頻率130r/min、培養(yǎng)9天為宜。之后進(jìn)一步通過b(34)正交試驗(yàn)確定了接種量、培養(yǎng)溫度、玻璃珠數(shù)量三個(gè)因素的最佳組合，試驗(yàn)結(jié)果表明接種量10％、培養(yǎng)溫度28℃、玻璃珠數(shù)量lO粒時(shí)是最佳的培養(yǎng)條件。在試驗(yàn)得出的最佳的發(fā)酵條件下培養(yǎng)爪哇香菇菌