廣西南寧市部分市面流通的金銀花中綠原酸含量測(cè)定

1、<p>　　廣西南寧市部分市面流通的金銀花中綠原酸含量測(cè)定</p><p>　　摘要：目的 檢測(cè)廣西南寧市部分市面流通的金銀花的中綠原酸的含量。方法 采用高效液相色譜法，以綠原酸為檢測(cè)指標(biāo)對(duì)購(gòu)置于南寧市場(chǎng)上28批不同單位的金銀花進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果所測(cè)定的28個(gè)廣西南寧市流通的金銀花樣品中所含綠原酸的量均超過(guò)藥典規(guī)定的1.5%標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論 本次試驗(yàn)檢測(cè)廣西南寧市流通的金銀花樣品的綠原酸含量均符合國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)

2、。 </p><p>　　關(guān)鍵詞：金銀花；綠原酸；HPLC </p><p>　　金銀花為忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb）的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花。其性甘寒氣芳香，甘寒清熱而不傷胃，芳香透達(dá)又可祛邪，既能宣散風(fēng)熱，還善清解血毒，用于各種熱性病，如身熱、發(fā)疹、發(fā)斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等證，均效果顯著[1]。綠原酸作為金銀花中的一種次生代謝物，為中國(guó)藥典控制金銀花

3、的質(zhì)量指標(biāo)之一[2]；其具有清除自由基、抗菌消炎、降糖、降血脂、保肝利膽等多種功效[3-5]。金銀花在廣西南寧常用于治療急性呼吸道感染、肺部感染、感冒、急性扁桃體炎、肺炎、流行性腦脊髓膜炎等疾病[6]。因此本實(shí)驗(yàn)研究以綠原酸為檢測(cè)指標(biāo)對(duì)廣西南寧市流通金銀花進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控具有一定現(xiàn)實(shí)意義。 </p><p><b>　　1 儀器與材料 </b></p><p>　　Agi

4、lent 1100高效液相色譜儀；Waters Symmetry C-18液相色譜柱（150×4.6mm，5μm）；德國(guó)賽多利斯公司BP211D電子分析天平；Millipore simplicity-185超純水器；SB3200T超聲波清洗器；乙腈（色譜純）；甲醇（分析純）；超純水；其他試劑為分析純。綠原酸（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110753-200413）；28批金銀花樣品均于2015年3月購(gòu)置于南寧是不同區(qū)域的藥店

5、、藥房、醫(yī)院及批發(fā)部。經(jīng)過(guò)廣西中醫(yī)藥大學(xué)廖月葵高級(jí)實(shí)驗(yàn)室鑒定為忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb）的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花。 </p><p><b>　　2 方法與結(jié)果 </b></p><p>　　2.1色譜條件 采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定，以綠原酸為供試品定量指標(biāo)，色譜條件為：Waters Symmetry C18液相色譜柱（150

6、×4.6mm，5μm），乙腈-0.4%磷酸溶液（13：87）為流動(dòng)相，柱溫：35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm。 </p><p><b>　　2.2試液的制備 </b></p><p>　　2.2.1對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)變色硅膠減壓干燥至恒重的綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含121.6μg的溶液，即得（10℃下避光保存）。

7、</p><p>　　2.2.2供試品溶液的制備 精密稱取各金銀花樣品粉末（過(guò)四號(hào)篩）0.5g，精密稱定，分別置100 ml具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30min，取出，放冷，用補(bǔ)足減失的重量，搖勻，精密吸取續(xù)濾液5ml，置25ml棕色容量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得。 </p><p>　　2.2.3空白溶液 以上述實(shí)驗(yàn)同一50%甲醇溶液為空白溶液

8、，作為陰性對(duì)照。 </p><p>　　2.3系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白陰性對(duì)照溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，如圖1～圖3所示。結(jié)果表明：空白對(duì)照在綠原酸峰處無(wú)干擾。 </p><p>　　2.4線性關(guān)系考察 分別精密吸取綠原酸對(duì)照品溶液（0.1216μg/μL）1、2、4、8、10、12μl，注入液相色譜儀，按上述2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定峰

9、面積，以峰面積A對(duì)進(jìn)樣量C（μg）進(jìn)行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=1875 C，r=1。表明綠原酸在0.1216～1.4592μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。 </p><p>　　2.5精密度試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液（1號(hào)樣品）10μl，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定綠原酸峰面積RSD為0.08%（n=6）。表明儀器精密度良好。 </p><p>　　2.6穩(wěn)定性試驗(yàn) 取新鮮配制

10、的本品供試品溶液，室溫下放置，分別在0、2、6、12、20、25、48h精密進(jìn)樣10μl，結(jié)果峰面積RSD為0.41%（n=7）。表明供試品溶液在48h內(nèi)穩(wěn)定。 </p><p>　　2.7重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品，按2.2.2項(xiàng)下供試品溶液的制備方法進(jìn)行制備，制得6份供試品溶液，分別精密進(jìn)樣10μl，每個(gè)樣品進(jìn)兩針，將測(cè)定所得的峰面積。代入上述實(shí)驗(yàn)線性方程中計(jì)算得到該樣品中綠原酸的平均百分含量為2.23%，R

11、SD為2.87%（n= 6）。表明本方法重現(xiàn)性良好。 </p><p>　　2.8加樣回收試驗(yàn) 取已知含量（樣品中綠原酸的百分含量為2.23%）的金銀花樣品粉末（過(guò)四號(hào)篩）6份，每份0.25g，精密稱定，加入綠原酸對(duì)照品溶液50ml，按樣品提取測(cè)定方法測(cè)定，測(cè)得回收率為100.33%，RSD=0.88%（n=6）。 </p><p>　　2.9綠原酸含量測(cè)定 按2.2.2項(xiàng)下供試品溶液制備

12、方法進(jìn)行樣品制備后，按測(cè)定得到各樣品的峰面積如表1所示，代入回歸方程求得綠原酸的質(zhì)量，再計(jì)算出金銀花樣品中綠原酸的百分含量。 </p><p><b>　　3 討論與結(jié)論 </b></p><p>　　3.1本實(shí)驗(yàn)購(gòu)買(mǎi)樣品均為南寧正規(guī)的藥材或藥品銷售單位。在購(gòu)買(mǎi)實(shí)驗(yàn)樣品時(shí)盡量將采購(gòu)的區(qū)域及單位散布于南寧市范圍內(nèi)，因此購(gòu)買(mǎi)得到的樣品對(duì)當(dāng)時(shí)南寧市市場(chǎng)上流通的金銀花樣品具有

13、一定的代表性。 </p><p>　　3.2本實(shí)驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果表明：所購(gòu)置的各實(shí)驗(yàn)樣品中綠原酸的含量均超過(guò)了《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的1.5%標(biāo)準(zhǔn)，含量的最低為國(guó)大杭州店，其含量為2.06%；最高含量為同濟(jì)群益店，其含量為3.55%。由金銀花中的綠原酸易見(jiàn)光分解，因此其含量與樣品采集、加工及貯存有密切關(guān)系，本次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)不合格的樣品。本實(shí)驗(yàn)還對(duì)所購(gòu)置的樣品進(jìn)行水分、總灰分、酸不溶性灰分等項(xiàng)目檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

14、明：所有購(gòu)置的樣品的水分、總灰分、酸不溶性灰分等項(xiàng)目均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn)： </b></p><p>　　[1]趙樹(shù)欣.配制酒生產(chǎn)技術(shù)[M].北京市：化學(xué)工業(yè)出版社，2008：205. </p><p>　　[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：205-206.

15、 </p><p>　　[3]郭力.中藥化實(shí)驗(yàn)[M].北京市：科學(xué)出版社，2008：169. </p><p>　　[4]侯玉澤，李松彪.食品衛(wèi)生快速檢驗(yàn)技術(shù)[M].北京市：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2008：313. </p><p>　　[5]林強(qiáng)，葛喜珍.中藥材概論[M].北京市：化學(xué)工業(yè)出版社，2007：258. </p><p>　　[6]潘