海蜇酶溶膠原蛋白的提取工藝研究【開題報(bào)告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報(bào)告</b></p><p><b>　　食品質(zhì)量與安全</b></p><p>　　海蜇酶溶膠原蛋白的提取工藝研究</p><p><b>　　選題的背景與意義</b></p><p>　　膠原蛋白（Collagen)存在所有多細(xì)胞動

2、物體內(nèi)，是一種細(xì)胞外蛋白質(zhì)，主要存在于動物的皮、骨、軟骨、牙齒、肌腱、韌帶和器官中，也是結(jié)締組織中主要的結(jié)構(gòu)蛋白，起著支撐器官、保護(hù)肌體的功能，膠原是哺乳動物體內(nèi)含量最多的蛋白質(zhì)，占體內(nèi)蛋白質(zhì)重要的25%~30%。在皮革、化妝品、食品、膜工業(yè)、制藥業(yè)、生物醫(yī)學(xué)材料等方面應(yīng)用廣泛。牛和豬的皮、骨頭通常是膠原蛋白的主要來源，然而，牛海綿狀腦?。˙SE）等傳染性疾病的爆發(fā)使得從陸生動物皮、骨中提取膠原蛋白的危險(xiǎn)性增大。膠原蛋白需求量日益增加，

3、因此尋找可替代的新的來源地膠原蛋白就顯得非常迫切。水產(chǎn)膠原蛋白與陸生動物的膠原蛋白相比，其特性、組成及溶液的性質(zhì)都存在顯著的差異，因此開發(fā)水產(chǎn)膠原蛋白不僅擴(kuò)大了膠原蛋白的原料來源，還拓寬了膠原蛋白的應(yīng)用范圍。</p><p>　　海蜇作為食品，營養(yǎng)價(jià)值很高。中醫(yī)認(rèn)為海蜇性味甘、咸、平，入肝、腎臟，具有化痰軟堅(jiān)、平肝解毒、降壓、祛風(fēng)、除濕、消積、潤腸等的功效，具有很好的藥用價(jià)值。我國食用海蜇資源豐富， 每年在海蜇的

4、加工過程中都將出現(xiàn)大量的資源浪費(fèi)， 更嚴(yán)重的是直接導(dǎo)致環(huán)境的污染。而且海蜇含水量高，收獲期短，易自溶。蛋白質(zhì)是海蜇的主要成分，且以膠原蛋白為主。已有研究表明，從海蜇中提取的膠原蛋白可用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。而且海蜇膠原蛋白在低抗原性、低過敏性、分子結(jié)構(gòu)脆弱導(dǎo)致酶解較容易等方面具有一定的優(yōu)勢。如今， 人們崇尚綠色、環(huán)保、回歸自然意識的加強(qiáng)，開發(fā)利用海蜇及其廢棄物提取膠原蛋白， 生產(chǎn)具有各種生理功能的活性肽將越來越受到市場和廣大對水產(chǎn)業(yè)的發(fā)展

5、提供廣闊的前景。</p><p>　　膠原蛋白的提取方法主要有：熱水浸提、酸法浸提、堿法浸提與酶法浸提，其基本的原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性，改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。雖然酸法和堿法水解都迅速徹底，但是這兩種方法都具有很大的局限性，酸水解法會使色氨酸全部被破壞，絲氨酸和酪氨酸部分被破壞，且產(chǎn)品得率低，設(shè)備腐蝕嚴(yán)重，并產(chǎn)生二次污染，而堿水解法則使含羥基和巰基的氨基酸，全部被破壞且產(chǎn)生

6、消旋。酶法水解反應(yīng)溫度低，反應(yīng)時(shí)間短，無環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)逐漸被人們所發(fā)現(xiàn)。酶可以選擇性的切除非螺旋的端肽而使膠原溶解出來，并對螺旋區(qū)無作用，這樣溶解出來的膠原蛋白仍具有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu)，降低了膠原的抗原性，適用于生物醫(yī)藥材料。而且其水解產(chǎn)物產(chǎn)品營養(yǎng)價(jià)值高，以多肽和L型游離氨基酸為主，速溶性好，易于人體消化吸收。</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p>&

7、lt;b>　?。ㄒ唬┗緝?nèi)容：</b></p><p>　　1、酶法提取單因素實(shí)驗(yàn)分析，包括酶解時(shí)間、酶用量、料液比；</p><p>　　2、根據(jù)單因素結(jié)果進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)分析，確定最適工藝條件；</p><p>　　3、對海蜇原蛋白的理化特性進(jìn)行了初步的研究，主要包括：海蜇膠原蛋白的紫外光譜分析、紅外光譜分析等。</p><p

8、>　?。ǘM解決的主要問題：</p><p>　　1、實(shí)驗(yàn)單因素的確定</p><p>　　膠原蛋白的純化條件的確定</p><p>　　研究的方法與技術(shù)路線：</p><p><b>　　（一）研究方法：</b></p><p>　　采樣→前處理→單因素及響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)→分析結(jié)果確定最適酶解

9、條件→理化分析</p><p>　　1、單因素實(shí)驗(yàn)：酶法提取膠原蛋白的單因素分析：酶濃度、提取時(shí)間、料液比。</p><p>　　響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)：在單因素的基礎(chǔ)上，做3因素3水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。</p><p>　　3、膠原蛋白的測定方法：羥脯氨酸是膠原蛋白的特征成分。</p><p>　　膠原蛋白得率（%）=11.1×A×稀釋

10、倍數(shù)/M×100</p><p>　　M：海蜇質(zhì)量（mg）</p><p>　　A：羥脯氨酸的量（mg）</p><p>　　4、氨基酸組成分析：稱取一定量海蜇于四氟乙烯消解罐中，加入6 mol/L HCL，進(jìn)</p><p>　　行消解，消解結(jié)束后濾膜過濾，然后再適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行液相分析。</p><p>

11、　　5、紫外光譜分析：將制備的海蜇膠原蛋白溶解，在190 nm-400 nm的紫外光區(qū)進(jìn)</p><p><b>　　行全波長掃描。</b></p><p>　　6、紅外光譜分析：取少量樣品加入適量的干燥的KBr，混合均勻并研成粉末狀。</p><p>　　取少許壓片，全反射光譜測定法（ATR）進(jìn)行測定。</p><p>

12、;<b>　?。ǘ┘夹g(shù)路線：</b></p><p>　　四、總體安排與進(jìn)度：</p><p>　　2010.10—2010.11：查閱資料，確定實(shí)驗(yàn)方案。</p><p>　　2010.11—2011.2：通過單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面試驗(yàn)，確定海蜇酶溶膠原蛋</p><p>　　白提取工藝的最適條件。</p>

13、<p>　　2011.2—2011.3：整理數(shù)據(jù)，撰寫論文。</p><p><b>　　五、主要參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1]王榮春，徐德昌，秦蘭霞.膠原蛋白與VI型膠原蛋白結(jié)構(gòu)概述[J].生物信息學(xué)，2004，04：30-33.</p><p>　　[2]張達(dá)江，王亮.I型膠原蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及其應(yīng)用研究的現(xiàn)狀與

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