溶藻弧菌篩選的三疣梭子蟹早期發(fā)育階段的溶氧需求【開(kāi)題報(bào)告+文獻(xiàn)綜述+畢業(yè)設(shè)計(jì)】

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文系列</b></p><p><b>　　開(kāi)題報(bào)告</b></p><p><b>　　水產(chǎn)養(yǎng)殖</b></p><p>　　溶藻弧菌篩選的三疣梭子蟹早期發(fā)育階段的溶氧需求</p><p>　　一、選題的背景與意義</p>

2、<p>　　動(dòng)物溶氧需求大小和變化在很大的程度上反映了其代謝水平的高低及其變化規(guī)律，所以常作為衡量動(dòng)物能量消耗的一個(gè)重要指標(biāo)。對(duì)三疣梭子蟹不同幼體發(fā)育階段的溶氧需求的研究可以了解梭子蟹的代謝特征、生理狀況和營(yíng)養(yǎng)狀況和對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)能力，從而能為親體養(yǎng)殖和人工育苗時(shí)確定最佳放養(yǎng)密度、水質(zhì)調(diào)控及環(huán)境條件，及其它的生產(chǎn)管理提供理論指導(dǎo)，還可應(yīng)用在親體、苗種及活體運(yùn)輸上，來(lái)提高運(yùn)輸過(guò)程中的存活率。</p><

3、;p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問(wèn)題：</p><p><b>　　研究的基本內(nèi)容：</b></p><p>　　用溶氧儀測(cè)定三疣梭子蟹不同幼體發(fā)育階段的耗氧量，用天平測(cè)得體重，從而得出不同幼體階段耗氧率的變化趨勢(shì)。</p><p><b>　　擬解決的主要問(wèn)題</b></p><p&g

4、t;　　通過(guò)測(cè)定梭子蟹個(gè)幼體階段的耗氧率，從而確定梭子蟹發(fā)育階段溶氧需求的變化趨勢(shì)。</p><p>　　三、研究的方法與技術(shù)路線：</p><p><b>　?。ㄒ唬┭芯康姆椒?lt;/b></p><p><b>　　1）儀器設(shè)備</b></p><p>　　12000L的燒瓶3個(gè)，溶氧測(cè)定儀<

5、/p><p><b>　　2）研究方法</b></p><p>　　1.從同一養(yǎng)殖池中取若干只處于相同發(fā)育階段的梭子蟹幼體，放置于盛滿水的透明的大燒瓶中，具體數(shù)量由幼體大小來(lái)確定。</p><p>　　2.用溶氧測(cè)定儀測(cè)定水體中的溶解氧，然后將溶氧儀探頭取出，用塑料紙密封，同時(shí)水面上不能出現(xiàn)氣泡。密封1h后再次測(cè)定水中溶氧，取得兩組數(shù)據(jù)。</

6、p><p>　　3.根據(jù)幼體大小選用適合孔徑的篩網(wǎng)將幼體過(guò)濾，將過(guò)濾的水重復(fù)上述操作，作為對(duì)照組。</p><p>　　4.實(shí)驗(yàn)按照上述步驟重復(fù)操作3次。</p><p>　　5.將實(shí)驗(yàn)取得的數(shù)據(jù)用生物統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行分析。</p><p><b>　　（二）技術(shù)路線：</b></p><p>　　四、研

7、究的總體安排與進(jìn)度：</p><p>　　2010年1月～2月 查閱資料，與指導(dǎo)老師討論實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題。</p><p>　　2010年3月～4月 完成開(kāi)題報(bào)告和一篇2000字以上的綜述。</p><p>　　2010年5月～12月 完成實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)處理。</p><p>　　2011年1月～2月 翻譯兩篇外文參考文獻(xiàn)。</p

8、><p>　　2011年3月～5月 完成一篇科技論文并準(zhǔn)備畢業(yè)答辯。</p><p><b>　　五、參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1] 常亞青,王子臣.魁蚶耗氧率的初步研究[J].水產(chǎn)科學(xué),1992,11(2):1～6.</p><p>　　[2] 陳佳榮,臧維玲,金送笛,等.水化學(xué)測(cè)試指導(dǎo)[M].北京:中

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10、rba(Forskal)幼魚(yú)耗氧率的初步研究[J].湛江海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2000,20(3):8～12.</p><p>　　[6] 樊甄姣,呂振明,吳常文,等.溫度、鹽度和pH值對(duì)疣荔枝螺耗氧率的影響[J].河北漁業(yè),2009,(2)5～23.</p><p>　　[7] 李加兒,劉士瑞,區(qū)又君,等.淺色黃姑魚(yú)幼魚(yú)耗氧率、排氨率及窒息點(diǎn)的初步研究[J].海洋學(xué)報(bào),2008,30(5):16

11、5～170.</p><p>　　[8] 李庭古.鹽度對(duì)克氏原螯蝦幼蝦耗氧率和排氨率的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2009,28(11):698～700.</p><p>　　[9] 栗志民,劉志剛,謝麗,等.體重和溫度對(duì)華貴櫛孔扇貝(Chlamys nobilis)耗氧率和排氨率的影響[J].海洋與湖沼,2010,41(1):99～105.</p><p>　　[10]

12、 劉中,石俊艷.河蟹幼體不同發(fā)育期耗氧率和窒息點(diǎn)的測(cè)定[J].水產(chǎn)科技情報(bào),1998,25(2):66～69.</p><p>　　[11] 羅杰,劉楚吾,唐洪超,等.溫度對(duì)管角螺Hemifusus tuba(Gelin)耗氧率和排氨率的影響[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2008,28(1):85～88.</p><p>　　[12] 彭文國(guó),鄭建民.墨吉對(duì)蝦幼體耗氧量的初步研究[J].水產(chǎn)科

13、技報(bào),1996,23(4):169～172.</p><p>　　[13] 王春琳,吳丹華,董天野,等.曼氏無(wú)針烏賊耗氧率及溶氧脅迫對(duì)其體內(nèi)酶活力的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2008,19(11):2420～2427.</p><p>　　[14] 王廣軍,謝駿,潘德博.日本鰻鱺初孵仔魚(yú)耗氧率的初步研究[J].海洋水產(chǎn)研究,2001,22(1):52～55.</p><

14、p>　　[15] 王俊,姜祖輝,唐啟升.櫛孔扇貝耗氧率和排氨率的研究[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2002,13(9):1157～1160.</p><p>　　[16] 王藝?yán)?張子平,張殷鵬,等.耗氧率的初步研究[J].集美大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2002,7(3):193～197.</p><p>　　[17] 吳常文,朱愛(ài)意,趙向炯.海水養(yǎng)殖雜交鱘耗氧量、耗氧率和窒息點(diǎn)的研究[J].

15、浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào),2005,14(2):100～104.</p><p>　　[18] 閆茂倉(cāng),單樂(lè)州,邵鑫斌,等.鹽度和pH對(duì)鮸魚(yú)幼魚(yú)耗氧率和氨氮排泄率的影響[J].臺(tái)灣海峽,2007,26(1):85～91.</p><p>　　[19] 閆茂倉(cāng),單樂(lè)州,謝起浪,等.溫度、鹽度及體重對(duì)條石鯛幼魚(yú)耗氧率和排氨率的影響[J].海洋科學(xué)進(jìn)展,2008,26(4):486～496.</p

16、><p>　　[20] 楊紅生,張濤,王萍,等.溫度對(duì)墨西哥灣扇貝耗氧率及排泄率的影響[J].海洋學(xué)報(bào),1998,20(4):91～95.</p><p>　　[21] 張媛,方建光,毛玉澤,等.溫度和鹽度對(duì)橄欖蚶耗氧率和排氨率的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2007,14(4):690～694.</p><p>　　[22] 張兆琪,張美昭.牙鲆魚(yú)耗氧率、氨排泄率與體重及

17、溫度的關(guān)系[J].青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào),1997,27(4):483～489.</p><p>　　[23] 朱愛(ài)意,謝佳彥,陳金海.溫度和個(gè)體大小對(duì)單齒螺耗氧率和排氨率的影響[J].生態(tài)科學(xué),2007,26(3):232～236.</p><p>　　[24] 朱小明,李少菁,宋星宇.溫度對(duì)鋸緣青蟹狀幼體呼吸和排泄的影響[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào),2003,42(1):92～96.</p&g

18、t;<p>　　[25] Buckingham M J, Freed D J.Effects of temperature and pH on the oxygen consumption in the prosobranch snail Viviparus contectoi des(Mollusca:Gastropoda)～Ⅱ[J]. Comp Biochem Physiol, 1976,53A:249～252.<

19、;/p><p>　　[26] Harris J O,Maguire G B,Edwards S J,et al.Effects of pH on growth rate, oxygen consumption rate, and histopathology of gill and kidney tissue for juvenile greenlip abalone,Haliotis laevigata Donov

20、an and blacklip abalone,Haliotis rubra leach[J].J thellfish Res,1999,18: 611～619.</p><p>　　[27] Herrmann J P, Enmel S E C. Effect of body size on the standard metabolism of horse mackerel [J]. J. Fish. Biol.

21、, 2000, 57(3): 746～760.</p><p>　　[28] John D, Sakamoto M T, Gordon G E, et al. Physiological and respiratory responses of the Mozambique Tilapia(Oreochromis mossambicus)to salinity acclimation[J]. Comparativ

22、e Biochemistry and Physiology Part A: Physiology, 1997,117(3): 391～398.</p><p>　　[29] Macdonatd B A.Physiological energetics of Japanese scallop Patinopecten yessoensis larvae.Exp Biol Ecol, 1988,120: 150～17

23、0.</p><p>　　[30] Morgan J, Iwama T. Salinity effects on oxygen consumption, gill Na+, K+～ATPase and ion regulation in juwenilecobo salmon [J]. J. Fish. Biol., 1998, 53(5): 1110～1119. </p><p><

24、;b>　　畢業(yè)論文文獻(xiàn)綜述</b></p><p><b>　　水產(chǎn)養(yǎng)殖</b></p><p>　　水產(chǎn)動(dòng)物溶氧需求的研究進(jìn)展</p><p>　　摘要：動(dòng)物溶氧需求大小和變化在很大的程度上反映了其代謝水平的高低及其變化規(guī)律，所以常作為衡量動(dòng)物能量消耗的一個(gè)重要指標(biāo)。對(duì)動(dòng)物呼吸代謝研究可以了解動(dòng)物自身的代謝特征、生理狀況和營(yíng)

25、養(yǎng)狀況和對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)能力。本文綜合了近年來(lái)多項(xiàng)關(guān)于水產(chǎn)動(dòng)物耗氧率的研究，并進(jìn)行綜合分析，為三疣梭子蟹不同幼體發(fā)育階段的溶氧需求研究提出新思路。</p><p>　　關(guān)鍵詞：水產(chǎn)動(dòng)物；耗氧率；影響因素</p><p><b>　　1 引言</b></p><p>　　溶氧需求主要包括耗氧量和耗氧率，耗氧量的定義是指1升水中的還原性物質(zhì)在一

26、定條件下被氧化時(shí)消耗的氧毫克數(shù)。耗氧率指動(dòng)物單位時(shí)間的耗氧量，可分為單位體重耗氧率和單位個(gè)體耗氧率。水生動(dòng)物的耗氧率是其體內(nèi)代謝的反映，而其代謝水平受多方面因素的影響（王藝?yán)诘龋?002）。了解耗氧率與各種生物及非生物因素的相互關(guān)系及變化規(guī)律可為親體養(yǎng)殖和人工育苗時(shí)確定最佳放養(yǎng)密度、水質(zhì)調(diào)控及環(huán)境條件，及其它的生產(chǎn)管理提供理論指導(dǎo)，還可應(yīng)用在親體、苗種及活體運(yùn)輸上，來(lái)提高運(yùn)輸過(guò)程中的存活率，因此耗氧率及其變化規(guī)律作為呼吸代謝研究最重要的

27、內(nèi)容，一直受到人們的重視。</p><p>　　水產(chǎn)動(dòng)物的耗氧率受生物因素和非生物因素影響，生物因素主要包括體重、活動(dòng)和應(yīng)激、生活周期等；非生物因素主要包括溫度、鹽度、pH等。</p><p>　　近年來(lái)，許多學(xué)者對(duì)很多水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物進(jìn)行過(guò)耗氧率的研究，如墨吉對(duì)蝦（Penaeus merguiensis）（彭文國(guó)等，1996）、合浦絨鰲蟹（Eriocheir hepuensis）（陳琴等，2

28、002）、河蟹（Eriocheir sinensis）（劉中等，1998）、疣荔枝螺（Thais clavigera）（樊甄姣等，2009）等。本文參考比較了近年來(lái)耗氧率研究的方法以及影響因素，并以此為三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）早期發(fā)育階段的溶氧需求研究提出參考。</p><p><b>　　1 耗氧率研究方法</b></p><p&g

29、t;<b>　　1.1 直接法</b></p><p>　　墨吉對(duì)蝦幼體耗氧率的研究中（彭文國(guó)等，1996），采用美國(guó)YSL58l型測(cè)氧儀測(cè)定水中的溶氧量。將對(duì)蝦幼體置于呼吸室中，用測(cè)氧儀探頭塞緊瓶口而密封，使幼體在呼吸室中適應(yīng)安定1h，然后每隔lh記錄測(cè)氧儀讀數(shù)。試驗(yàn)結(jié)束后取出幼體，計(jì)算耗氧量和耗氧率。</p><p><b>　　1.2 間接法</

30、b></p><p>　　在間接法中，目前主要有兩種方法，流水密閉式和靜水密閉式。流水密閉式主要以陳寧生等（1955）的方法為代表。在曼氏無(wú)針烏賊（Sepiella maindroni）耗氧率及溶氧脅迫對(duì)其體內(nèi)酶活力的影響實(shí)驗(yàn)中（王春琳等，2008），是采用比較流水式密封裝置中對(duì)照呼吸室與實(shí)驗(yàn)呼吸室水中溶氧量之差這種方法來(lái)測(cè)定耗氧率。實(shí)驗(yàn)依陳寧生等的方法稍加改進(jìn)：呼吸室為的透明的玻璃瓶，外遮黑色塑料薄膜；利

31、用水位差使海水引入呼吸室，水流大小可調(diào)節(jié)；讓水樣瓶裝滿水并溢出2～3倍后要立即固定并測(cè)試。水中溶氧量測(cè)定，采用Winkler碘量法測(cè)定（陳佳榮等，2000)。</p><p>　　此外，有很多的實(shí)驗(yàn)采用了陳寧生等的測(cè)定方法，即采用流水式的密封裝置，如溫度對(duì)鋸緣青蟹（Scylla serrata）狀幼體呼吸和排泄的影響（朱小明等，2003）、淺色黃姑魚(yú)幼魚(yú)（Nibea coibo）耗氧率、排氨率及窒息點(diǎn)的初步研究（

32、李加兒等，2008）等。</p><p>　　流水密閉式的實(shí)驗(yàn)要求相對(duì)較高，操作起來(lái)也較為復(fù)雜，因此很多研究者在耗氧率測(cè)定時(shí)采用了靜水密閉式。如在河蟹幼體不同發(fā)育期耗氧率和窒息點(diǎn)的測(cè)定的試驗(yàn)中（劉中等，1998），首先將河蟹幼體放置于密閉三角瓶，在水浴中控溫。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)立即用Winkler碘量法固定水樣，測(cè)其溶解氧含量。</p><p>　　相比較流水密閉式，靜水密閉式的應(yīng)用更為廣泛，如溫

33、度對(duì)管角螺（Hemifusus tuba）耗氧率和排氨率的影響（羅杰等，2008）、櫛孔扇貝（Chlamys farreri）耗氧率和排氨率的研究（王俊等，2002）、鹽度對(duì)克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）幼蝦耗氧率和排氨率的影響（李庭古，2009）、鹽度和pH值對(duì)鮛魚(yú)（Miichthys miiuy）幼魚(yú)耗氧率和氨氮排泄率的影響（閆茂倉(cāng)等，2007）、溫度和鹽度對(duì)橄欖蚶（Estellarca olivacea）耗氧

34、率和排氨率的影響（張媛等，2007）、溫度、鹽度及體重對(duì)條石鯛（Oplegnathus fasciatus）幼魚(yú)耗氧率和排氨率的影響（閆茂倉(cāng)等，2008）等。</p><p>　　2 影響耗氧率的因素</p><p><b>　　2.1 溫度</b></p><p>　　對(duì)水生生物來(lái)說(shuō)，溫度對(duì)其的生長(zhǎng)發(fā)育起著至關(guān)重要的作用，不同種類生物有各自的

35、適宜溫度，在適宜范圍內(nèi)水溫越高、生長(zhǎng)越快，這是因?yàn)樗疁馗邥r(shí)，生物體攝食活動(dòng)活躍，適宜的溫度可增加酶活力，加速對(duì)餌料的消化，從而促進(jìn)生長(zhǎng)；在低溫下某些酶將失活，很難消化食物，因而影響生物的生長(zhǎng)。耗氧率也會(huì)隨著溫度的變化產(chǎn)生變化，就目前的研究結(jié)果來(lái)看，國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)為在一定溫度范圍內(nèi)水溫高低與動(dòng)物耗氧率大小成正比。這是由于水溫升高，組織器官的活動(dòng)性能提高，體內(nèi)各種生化反應(yīng)速度加快，從而使耗氧率增高的緣故，這也是變溫動(dòng)物的普遍特征。但耗氧率

36、并不會(huì)一直處于升高狀態(tài)，而是有一個(gè)極值，一旦超過(guò)這一數(shù)值，耗氧率便會(huì)開(kāi)始下降，原因是當(dāng)超過(guò)其最高溫度耐受范圍后，會(huì)引起生物體生理功能的紊亂，耗氧率下降（楊紅生等，1998）。如單齒螺的最高耐受溫度為29℃，在29℃之前，耗氧率隨溫度升高而增加，一旦超過(guò)29℃，隨著溫度的進(jìn)一步升高，耗氧率反而下降（朱愛(ài)意等，2007）。在下表（表1）中例舉了幾種水生生物最大耗氧率時(shí)的溫度，在此溫度前生物體的耗氧率隨溫度的升高而增加，超過(guò)此溫度則呈現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng)

37、模式。</p><p>　　表1 不同生物體最大耗氧率時(shí)溫度</p><p>　　Tab.1 The temperature of maximum oxygen consumption rate in different organisms</p><p><b>　　2.2 鹽度</b></p><p>　　鹽度對(duì)生物

38、體的影響主要表現(xiàn)在滲透壓上，一旦生物體的生存環(huán)境中滲透壓的改變超出了自身調(diào)節(jié)能力，就會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)大量耗氧來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓的平衡。一旦生物生境中的鹽度變化過(guò)大，便會(huì)導(dǎo)致其心臟周圍腔液壓力猛增，表現(xiàn)出心跳減慢，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍等現(xiàn)象。和溫度不同，鹽度對(duì)生物體的耗氧率可產(chǎn)生兩種表現(xiàn)，一種是耗氧率隨鹽度的升高而降低，如John等（1997）研究發(fā)現(xiàn)莫桑比克羅非魚(yú)（Mozambique tilapia）耗氧率隨鹽度的升高而下降；丁彥文和李加兒（200

39、2）報(bào)道了1.0～2.5g平鯛（Rhabdosargus sarba）的耗氧率隨著海水鹽度的增加而降低；王廣軍等（2001）發(fā)現(xiàn)，日本鰻鱺（Anguilla japonica）仔魚(yú)在低鹽度環(huán)境下耗氧率較高，隨著鹽度的升高，其耗氧率逐漸降低。另一種是耗氧率隨鹽度的升高而增加，但當(dāng)達(dá)到某一極值后隨鹽度升高而降低，如閆茂倉(cāng)等（2007）報(bào)道鹽度為11～26時(shí)，鮸魚(yú)（Miichthys miiuy）幼魚(yú)耗氧率逐步上升，鹽度26時(shí)達(dá)到峰值后呈下降

40、趨勢(shì)；樊甄姣等（2009）發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鹽度在15.01～28.19時(shí)，疣荔枝螺的耗氧率逐漸增大，并在鹽度28.19</p><p>　　還有一些研究表明，鹽度對(duì)耗氧率的影響還取決于生物體的生活史，Morgan和Iwama（1998）對(duì)不同鹽度下銀大馬哈魚(yú)幼魚(yú)（Oncorhynchus kisutchto）代謝率的研究表明，21日齡和42日齡泳動(dòng)狀態(tài)下，淡水、海水（S=28）和等滲水（S=10）中的耗氧率差異不顯著，說(shuō)

41、明幼齡鮭科魚(yú)類對(duì)不同鹽度的代謝反應(yīng)還與生活史有關(guān)。</p><p><b>　　2.3 酸堿度</b></p><p>　　一般來(lái)說(shuō)，海水呈弱堿性，pH值為7.5～8.5。但是大氣中 CO2 的溶解，海洋生物的呼吸作用，海水中有機(jī)物含量的升高都會(huì)引起水體的pH值升高，影響水生動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，也表現(xiàn)在對(duì)耗氧率的影響。水生動(dòng)物在對(duì)水環(huán)境pH值均有一定的適應(yīng)范圍。Harri

42、s等（1999）研究表明，pH6.08～6.72時(shí)，鮑魚(yú)（Haliotis rubra）的耗氧率明顯低于pH8.45時(shí)的耗氧率；吳常文等（2005）在研究雜交鱘（Hybrid sturgeon）時(shí)也發(fā)現(xiàn)，一定pH值的范圍內(nèi)雜交鱘耗氧率是隨外界pH值的變化而變化的，pH值越高雜交鱘耗氧率就越大，反之耗氧率就降低。而在鮛魚(yú)幼魚(yú)研究中，當(dāng)pH6.5～9.0時(shí)，鮛魚(yú)幼魚(yú)的耗氧率變化并不明顯，這是否說(shuō)明鮛魚(yú)幼魚(yú)對(duì)pH值的適應(yīng)性較強(qiáng)。Bucking

43、ham等（1976）在研究Viviparus contectoides 時(shí)發(fā)現(xiàn)，在pH值7.1 和8.9時(shí)，該種貝類的耗氧率會(huì)出現(xiàn)2個(gè)峰值，在這2個(gè)峰值附近，不論pH升高或降低，其耗氧率均變小。樊甄姣等發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH 值在7.5時(shí)，疣荔枝螺的耗氧率最大，但pH值降到5.0或是升到9.5時(shí)，耗氧率都急劇下降。</p><p><b>　　2.4 體重</b></p><p>

44、;　　體重是影響水生動(dòng)物耗氧率的重要因素之一。國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)呼吸和排泄與體重的關(guān)系進(jìn)行了大量研究（Herrmann等，2000），并證實(shí)耗氧量與體重之間通常呈冪函數(shù)相關(guān)。閆茂倉(cāng)等研究體重與條石鯛幼魚(yú)耗氧率的關(guān)系時(shí)也發(fā)現(xiàn)，體重對(duì)條石鯛幼魚(yú)的呼吸和排泄有顯著的影響，個(gè)體較小的條石鯛幼魚(yú)耗氧量比個(gè)體大的要低，而個(gè)體較小的條石鯛幼魚(yú)耗氧率比個(gè)體大的要高，耗氧率與體重之間分別呈冪函數(shù)關(guān)系，這與對(duì)其它魚(yú)類的呼吸研究得到的結(jié)果一致，如牙鲆（張兆琪等

45、，1997）。</p><p><b>　　2.5活動(dòng)水平</b></p><p>　　除了溫度、鹽度、酸堿度以及體重這四個(gè)因子會(huì)對(duì)生物體的耗氧率產(chǎn)生影響外，生物體的活動(dòng)水平也會(huì)對(duì)耗氧率產(chǎn)生影響，其中就貝類的活動(dòng)對(duì)耗氧率的影響較大。與其它動(dòng)物類似，一些學(xué)者也將貝類的呼吸代謝分為標(biāo)準(zhǔn)代謝亦即饑餓、相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)的代謝和最大活動(dòng)條件下的活動(dòng)代謝以及處于前兩者之間的日常代謝（

46、Macdonatd，1988）?；顒?dòng)代謝由于實(shí)驗(yàn)室條件難以測(cè)到，故多為估測(cè)，而日常代謝則范圍較大，主要取決于貝類的活動(dòng)強(qiáng)度。栗志民等（2010）在研究華貴櫛孔扇貝時(shí)也發(fā)現(xiàn)，華貴櫛孔扇貝23℃下日常代謝中的平均耗氧率提高約29.9%，這一結(jié)果支持了常亞青等（1992）和王俊等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。</p><p><b>　　3 展望</b></p><p>　　為了提高水產(chǎn)動(dòng)物

47、的人工培育技術(shù)，學(xué)者們已經(jīng)對(duì)多種水產(chǎn)動(dòng)物進(jìn)行了溶氧需求的研究，今后，基礎(chǔ)呼吸研究仍是重要的研究?jī)?nèi)容之一。在有關(guān)養(yǎng)殖新品種、引進(jìn)種及其它具有發(fā)展?jié)摿Φ姆N類的呼吸代謝的應(yīng)用研究中，溶氧需求也將是重要的課題。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 常亞青,王子臣.魁蚶耗氧率的初步研究[J].水產(chǎn)科學(xué),1992,11(2):1–6.<

48、/p><p>　　[2] 陳佳榮,臧維玲,金送笛,等.水化學(xué)測(cè)試指導(dǎo)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2000.</p><p>　　[3] 陳寧生,施瑔芳.草魚(yú)、白鰱和花鰱的耗氧率[J].動(dòng)物學(xué)報(bào),1955,7(1):43–58.</p><p>　　[4] 陳琴,謝達(dá)祥,呂業(yè)堅(jiān).合浦絨螯蟹豆蟹耗氧率與窒息點(diǎn)的初步測(cè)定[J].水產(chǎn)科學(xué),2002,21(2):15–17.

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62、e.Exp Biol Ecol,1988,120: 150–170.</p><p>　　[30] Morgan J, Iwama T. Salinity effects on oxygen consumption, gill Na+, K+～ATPase and ion regulation in juwenilecobo salmon [J]. J. Fish. Biol., 1998, 53(5): 111

63、0–1119. </p><p><b>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)</b></p><p><b>　?。?0_ _屆）</b></p><p>　　溶藻弧菌篩選的三疣梭子蟹早期發(fā)育階段的溶氧需求</p><p><b>　　目錄</b></p><p><

64、;b>　　1引言3</b></p><p><b>　　2材料和方法4</b></p><p>　　2.1 實(shí)驗(yàn)材料4</p><p>　　2.2 實(shí)驗(yàn)條件4</p><p>　　2.3 實(shí)驗(yàn)方法4</p><p>　　2.4 數(shù)據(jù)處理5</p><

65、;p><b>　　3結(jié)果5</b></p><p>　　3.1 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段體重比較5</p><p>　　3.2 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段耗氧量、耗氧率比較5</p><p>　　3.3 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段耗氧量、耗氧率與體重的關(guān)系5</p><p><b>　　4討論

66、8</b></p><p>　　4.1 實(shí)驗(yàn)方法8</p><p>　　4.2 篩選蟹和普通蟹的體重比較8</p><p>　　4.3 篩選蟹和普通蟹溶氧需求的比較9</p><p>　　4.4 篩選蟹和普通蟹耗氧量、耗氧率和體重的關(guān)系9</p><p>　　致謝錯(cuò)誤!未定義書簽。</p&g

67、t;<p><b>　　參考文獻(xiàn)11</b></p><p>　　摘要: 溶氧需求常作為衡量動(dòng)物能量消耗的一個(gè)重要指標(biāo)，在很大的程度上反映了動(dòng)物代謝水平的高低。本研究測(cè)定了溶藻弧菌病原篩選三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）和普通三疣梭子蟹從第Ⅰ期溞狀幼體到第Ⅴ期稚蟹各發(fā)育階段的耗氧量，并進(jìn)行了耗氧率計(jì)算，對(duì)兩種梭子蟹的耗氧情況進(jìn)行了比較，并研究了體

68、重與溶氧需求的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)測(cè)得普通三疣梭子蟹的體重與耗氧率的關(guān)系為Y=4.006X-0.528，體重與耗氧量的關(guān)系為Y=3.978X0.474，溶藻弧菌病原篩選的三疣梭子蟹的體重與耗氧率的關(guān)系為Y=3.701X-0.506，體重與耗氧量的關(guān)系為Y=3.650X0.481，結(jié)果表明三疣梭子蟹體重與耗氧量、耗氧率呈冪函數(shù)，耗氧量隨體重的增加而增加，耗氧率隨體重的增加而降低。在溞狀幼體Ⅰ期到稚蟹Ⅴ期階段，溶藻弧菌病原篩選的三疣梭子蟹的平均體重要

69、小于普通梭子蟹，且溶藻弧菌病原篩選的三疣梭子蟹的耗氧量和耗氧率都明顯低于普通的三疣梭子蟹（P<0.01），表明溶藻弧菌病原篩選三疣梭子蟹的耐低氧能力高于普通三疣梭子蟹。</p><p>　　關(guān)鍵詞:三疣梭子蟹；幼體；溶氧需求；體重</p><p>　　Abstract: The dissolved oxygen demand including oxygen consumption

70、and oxygen consumption rate, reflecting the level of metabolism of animals. Therefore, it is always regarded as an important indicator of measuring energy consumption of animals. In the present study the oxygen consumpti

71、on and the oxygen consumption rate of sifted swimming crab and common swimming crab were determined. The crabs were from ZoeaⅠto juvenile CrabⅤ. The common crabs’ relationship between weight and oxygen consumption</p&

72、gt;<p>　　Keywords: Portunus trituberculatus; juvenile; dissolved oxygen demand; body weight</p><p><b>　　1引言</b></p><p>　　三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）屬于節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropods）、甲殼綱

73、（Crustacea）、十足目（Decapoda）、梭子蟹科（Portunidae），廣泛分布于我國(guó)遼東半島、山東半島到廣東、廣西的各海區(qū)以及日本、朝鮮、馬來(lái)西亞群島等海域，是一種大型海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)蟹類。作為重要的大型經(jīng)濟(jì)蟹類，三疣梭子蟹肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，食用價(jià)值高，不僅是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴海鮮，也是一種重要的出口海產(chǎn)品。20世紀(jì)90年代中期開(kāi)始，三疣梭子蟹的大規(guī)模育苗和養(yǎng)殖在我國(guó)逐漸推廣，現(xiàn)今三疣梭子蟹已是世界上養(yǎng)殖規(guī)模最大的海洋經(jīng)濟(jì)蟹類之一

74、。雖然養(yǎng)殖三疣梭子蟹的開(kāi)始時(shí)間較早，但在科研方面對(duì)三疣梭子蟹的研究還是側(cè)重于人工苗種培育和人工養(yǎng)殖方法[1～3]，其次是對(duì)其生理過(guò)程以及行為學(xué)的研究。但隨著養(yǎng)殖的深入會(huì)發(fā)現(xiàn)，在三疣梭子蟹繁育過(guò)程中往往會(huì)出現(xiàn)蟹苗大規(guī)模的死亡、成活率較低等問(wèn)題，因此有必要對(duì)其不同幼體階段的生命活動(dòng)進(jìn)行研究。對(duì)水生生物來(lái)說(shuō)，影響成活率的最主要因素是水體中的溶解氧，因此開(kāi)展對(duì)三疣梭子蟹幼體階段的溶氧需求是解決成活率的重要措施。</p><p

75、>　　溶氧需求主要包括生物的耗氧量和耗氧率，耗氧量是指1L水中的還原性物質(zhì)在一定條件下被氧化時(shí)消耗的氧毫克數(shù)。耗氧率指動(dòng)物單位時(shí)間的耗氧量，可分為單位體重耗氧率和單位個(gè)體耗氧率。近年來(lái)，很多學(xué)者都對(duì)水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)類甲殼動(dòng)物進(jìn)行過(guò)溶氧需求的研究，如陳琴等[4]研究合浦絨螯蟹（Eriocheir hepuensis）豆蟹的耗氧率時(shí)發(fā)現(xiàn)，平均體重1.25g的豆蟹耗氧率為0.128mg/(g·h)；平均體重0.70g的豆蟹耗氧率為0.

76、37mg/(g·h)；劉中等[5]在水溫21±2℃條件下，測(cè)得中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）溞狀幼體（Z1～Z5）、大眼幼體（M）及Ⅰ期仔蟹（P1）的耗氧量與體重呈正相關(guān)，而其耗氧率與體重呈負(fù)相關(guān)；李明云等[6]研究了脊尾白蝦[Palaemon (Exopalaemon) carinicauda Holthuis]的耗氧率；彭文國(guó)等[7]研究了墨吉對(duì)蝦（Penaeus merguiensis）幼體

77、的耗氧量，發(fā)現(xiàn)墨吉對(duì)蝦幼體各階段（N1～P1）耗氧量逐漸提高, 且在Z2期和M2期分別出現(xiàn)突躍點(diǎn)，相應(yīng)遞增率也加大；刑克智等[8]測(cè)定了青蝦（Macrobrach</p><p>　　溶氧需求的研究，在養(yǎng)殖生產(chǎn)上是決定放養(yǎng)密度、水質(zhì)管理等技術(shù)措施的基礎(chǔ)，蔡文琴、盧迎春、王藝?yán)诘萚9～11]都做過(guò)相關(guān)研究。國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)對(duì)很多水生生物，如太平洋牡蠣[Crassostrea gigas (Thunberg) ][12

78、]，鯰魚(yú)[Horabagrus brachysoma (Günther)][13]，章魚(yú)（Octopus vulgaris）[14]的溶氧需求的研究做過(guò)很多工作，這些實(shí)驗(yàn)為我們進(jìn)行三疣梭子蟹親體培育與幼體管理方面提供了重要的理論依據(jù)，但是對(duì)三疣梭子蟹不同幼體階段溶氧需求的研究卻進(jìn)行得較少。耗氧率和耗氧量是水生生物生理學(xué)研究的一個(gè)重要方面，三疣梭子蟹的溶氧需求直接或間接反映了其新陳代謝規(guī)律，反映了三疣梭子蟹的生理狀況，也反映了三

79、疣梭子蟹在不同環(huán)境條件影響下的生活狀況。</p><p>　　近幾年來(lái)，三疣梭子蟹已經(jīng)在我省多家水產(chǎn)苗種場(chǎng)育苗成功，如寧?？h得水苗種場(chǎng)，三疣梭子蟹的養(yǎng)殖從親蟹采捕到繁育已經(jīng)獲得了成功，其人工條件下的育苗和繁殖技術(shù)取得了突破性的進(jìn)展，作為高價(jià)值的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)品種三疣梭子蟹的養(yǎng)殖前景十分可觀。本研究對(duì)普通三疣梭子蟹和溶藻弧菌篩選的三疣梭子蟹兩類蟹不同幼體發(fā)育階段的溶氧需求進(jìn)行初研究，旨在給三疣梭子蟹的人工繁殖、育苗育種、

80、運(yùn)輸和成體養(yǎng)殖提供呼吸生理方面的理論依據(jù)，提高三疣梭子蟹的養(yǎng)殖產(chǎn)量，增加經(jīng)濟(jì)收入，穩(wěn)定和發(fā)展我省三疣梭子蟹養(yǎng)殖事業(yè)。</p><p><b>　　2材料和方法</b></p><p><b>　　2.1 實(shí)驗(yàn)材料</b></p><p>　　本實(shí)驗(yàn)從2010年5月下旬開(kāi)始至7月上旬于寧?？h得水水產(chǎn)苗種場(chǎng)進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)所用的蟹苗

81、有兩類，一組為普通的三疣梭子蟹子代（以下簡(jiǎn)稱普通蟹），另一組為溶藻弧菌篩選的三疣梭子蟹子代（以下簡(jiǎn)稱篩選蟹）。溶藻弧菌篩選候選群子代是東海自然海區(qū)采捕抱卵三疣梭子蟹，用濃度為1.12×107cfu·ml-1溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）人工浸泡感染7h，正常孵化得到的。兩組三疣梭子蟹放養(yǎng)在相同條件的育苗池內(nèi)，海水鹽度、水溫以及水體溶解氧濃度相同。兩組三疣梭子蟹的喂食時(shí)間和喂食量相同，并且保證池內(nèi)

82、的梭子蟹都能正常生長(zhǎng)發(fā)育，從而減小因?yàn)椴煌h(huán)境條件而造成的誤差。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)用水為寧海縣得水水產(chǎn)苗種場(chǎng)蟹苗池海水，該海水取自自然海區(qū)，經(jīng)過(guò)沉淀池暗沉淀和兩次砂濾池過(guò)濾。海水進(jìn)入育苗池后用增氧泵進(jìn)行水體增氧，保證水體的溶解氧充足。海水鹽度控制在20～23左右，從而保證梭子蟹幼苗的正常生活。在三疣梭子蟹溞狀幼體初期投喂適量湛江等邊金藻（Isochrysidaceae zhanjianggensis）、

83、亞心形扁藻（Platymonas subcordiformis）等單細(xì)胞藻類。隨著梭子蟹溞狀幼體逐漸長(zhǎng)大蛻殼變成大眼幼體后開(kāi)始投喂臂尾輪蟲(chóng)（Brachionus sp.）和豐年蟲(chóng)（Chirocephalidae sp.），并適量投喂配合飼料，其各成分的含量隨著蟹蛻殼長(zhǎng)大而逐漸增加。當(dāng)大眼幼體蛻殼變成稚蟹后開(kāi)始投喂冰凍的小魚(yú)蝦。</p><p><b>　　2.2 實(shí)驗(yàn)條件</b></p

84、><p>　　溞狀幼體階段水溫控制在（24±0.2）℃，大眼幼體階段控制在（25±0.2）℃，稚蟹階段控制在（27±1）℃。實(shí)驗(yàn)期間，隨著三疣梭子蟹的蛻殼逐漸改變育苗池的水溫，使溫度保持在梭子蟹的生長(zhǎng)適宜溫度。育苗池海水為自然海區(qū)海水，鹽度20～23左右。水體的pH維持在8.25左右。育苗池覆蓋黑色避光薄膜，避免陽(yáng)光直射苗池。當(dāng)三疣梭子蟹由大眼幼體蛻殼變成稚蟹后，在育苗池中投放一定數(shù)量的

85、固體遮蔽物，避免梭子蟹幼蟹因爭(zhēng)奪食物和領(lǐng)域而打斗造成的數(shù)量減少。育苗池中每天用增氧泵增氧以保證水體溶氧充足，不會(huì)對(duì)三疣梭子蟹發(fā)育造成影響。 </p><p><b>　　2.3 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　三疣梭子蟹的耗氧量采用靜水式密閉裝置測(cè)定。裝置包括一個(gè)呼吸室和塑料薄膜。呼吸室為12000ml的透明廣口瓶。將若干處于同一發(fā)育階段，同種梭子蟹蟹苗連同育苗

86、池海水放入廣口瓶中，水充滿呼吸室后用塑料薄膜蓋住瓶口，用YSI55手提式溶解氧測(cè)定儀測(cè)定呼吸室內(nèi)的溶解氧濃度，然后用塑料薄膜將瓶口密封，瓶中不能出現(xiàn)氣泡，在避光處放置1h后再次測(cè)定水體中的溶解氧濃度。經(jīng)過(guò)100目曬網(wǎng)過(guò)濾的海水（去除梭子蟹幼體）用作對(duì)照，測(cè)定1h內(nèi)的溶氧變化，用以消除測(cè)定過(guò)程養(yǎng)殖海水自身的呼吸耗氧。將過(guò)濾的蟹苗略微控干水分后用EL104電子天平測(cè)得總重。實(shí)驗(yàn)重復(fù)上述操作3次。隨后開(kāi)始進(jìn)行梭子蟹蟹苗的過(guò)濾和稱重。</

87、p><p>　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)呼吸室中蟹苗個(gè)數(shù)，溞狀幼體時(shí)期由于蟹苗個(gè)體小、數(shù)量大，求取平均數(shù)。大眼幼體和稚蟹時(shí)期為直接計(jì)數(shù)。</p><p>　　三疣梭子蟹的耗氧量和耗氧率按下列方程式[4]計(jì)算：</p><p>　　耗氧量=（DO1-DO2）×V /（t×n） </p><p>　　耗氧率=（DO1-DO2）&

88、#215;V /（t×M）</p><p>　　式中：DO1為實(shí)驗(yàn)組的溶解氧含量（mg·L-1）；</p><p>　　DO2為空白組溶解氧含量的平均值（mg·L-1）；</p><p>　　V為呼吸室容積（L）；</p><p>　　t為實(shí)驗(yàn)時(shí)間（h）；</p><p>　　n為實(shí)驗(yàn)中三

89、疣梭子蟹的個(gè)數(shù)（individual）；</p><p>　　M為實(shí)驗(yàn)中三疣梭子蟹的體重（g）；</p><p>　　耗氧量的單位為mg·ind.-1·h-1；</p><p>　　耗氧率的單位為mg·g-1·h-1。</p><p><b>　　2.4 數(shù)據(jù)處理</b></

90、p><p>　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。對(duì)相應(yīng)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析用來(lái)檢驗(yàn)各梯度是否存在差異。</p><p><b>　　3結(jié)果</b></p><p>　　3.1 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段體重比較</p><p>　　將篩選蟹和普通蟹不同發(fā)育階段（Z1～Y5）的平均體重制

91、成表格（表1）。通過(guò)對(duì)兩組三疣梭子蟹平均體重進(jìn)行單因素方差分析，發(fā)現(xiàn)兩組梭子蟹的平均體重異顯著（P＜0.01）。</p><p>　　3.2 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段耗氧量、耗氧率比較</p><p>　　將篩選蟹和普通蟹不同發(fā)育階段（Z1～Y5）的耗氧情況制成表格（表2）。通過(guò)對(duì)兩組三疣梭子蟹溶氧情況進(jìn)行單因素方差分析，發(fā)現(xiàn)兩組梭子蟹的溶氧情況差異顯著（P＜0.01）。</p&g

92、t;<p>　　3.3 篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段耗氧量、耗氧率與體重的關(guān)系</p><p>　　表1 三疣梭子蟹早期發(fā)育階段的平均體重（g）</p><p>　　Tab.1 The average body weight（g）of the Portunus trituberculatus at early developmental stages</p>&l

93、t;p>　　表2 三疣梭子蟹早期發(fā)育階段的耗氧量和耗氧率</p><p>　　Tab.2 The oxygen consumption and oxygen consumption rate of the crab at early developmental stages</p><p>　　通過(guò)對(duì)三疣梭子蟹體重和耗氧量的數(shù)據(jù)處理，得到相關(guān)的曲線（圖1）、回歸方程及回歸系數(shù)：<

94、;/p><p>　　篩選蟹的回歸方程為 Y = 3.650X0.481，回歸系數(shù)為 r2=0.8858</p><p>　　普通蟹的回歸方程為 Y = 3.978X0.474，回歸系數(shù)為 r2=0.9476</p><p>　　其中： Y-平均耗氧量（mg·ind.-1·h-1） </p><p><b>

95、;　　X-體重（g）</b></p><p>　　通過(guò)對(duì)三疣梭子蟹體重和耗氧率的數(shù)據(jù)處理，得到相關(guān)的曲線（圖2）、回歸方程及回歸系數(shù)：</p><p>　　篩選蟹的回歸方程為 Y = 3.701X-0.506，回歸系數(shù)為 r2=0.9182</p><p>　　普通蟹的回歸方程為 Y = 4.006X-0.528，回歸系數(shù)為 r2=0.9567<

96、;/p><p>　　其中： Y-平均耗氧率（mg·g-1·h-1）</p><p><b>　　X-體重（g）</b></p><p>　　篩選蟹和普通蟹早期發(fā)育階段的溶氧消耗差異也很大。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明三疣梭子蟹的耗氧量隨體重的增加而增加，呈正相關(guān)關(guān)系。但是三疣梭子蟹的耗氧率卻是隨體重的增加而降低，呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。圖中曲線現(xiàn)示，兩

97、組梭子蟹體重與耗氧量關(guān)系的差異較大，但體重與耗氧率關(guān)系的差異較小，說(shuō)明兩組梭子蟹其體重對(duì)耗氧率的影響較小。</p><p>　　圖1 三疣梭子蟹體重和耗氧量的相關(guān)曲線</p><p>　　Fig.1 The curve between body weight and oxygen consumption of the crab </p><p>　　圖2 三疣梭子蟹

98、體重和耗氧率的相關(guān)曲線</p><p>　　Fig.2 The curve between body weight and oxygen consumption rate of the crab</p><p><b>　　4討論</b></p><p><b>　　4.1 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><

99、p>　　耗氧量的測(cè)定方法，目前主要采用間接法和直接法。在間接法中，主要采用流水密閉式裝置和靜水密閉式裝置。流水密閉式以陳寧生等[15]的方法為代表。如在曼氏無(wú)針烏賊（Sepiella maindroni）耗氧率及溶氧脅迫對(duì)其體內(nèi)酶活力的影響實(shí)驗(yàn)中[16]，是采用比較流水式密封裝置中對(duì)照呼吸室與實(shí)驗(yàn)呼吸室水中溶氧量之差來(lái)測(cè)定耗氧率。該實(shí)驗(yàn)在陳寧生等的方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)：呼吸室為透明的玻璃瓶，玻璃瓶外壁覆蓋有黑色塑料薄膜；通過(guò)呼吸室內(nèi)

100、外的水位差將海水引入呼吸室，水流的大小可依據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行調(diào)節(jié)；讓呼吸室裝滿水并溢出2～3倍后立即固定水樣并進(jìn)行溶解氧含量測(cè)定。</p><p>　　流水密閉式的實(shí)驗(yàn)要求相對(duì)較高，操作起來(lái)也較為復(fù)雜，因此很多研究者在耗氧率測(cè)定時(shí)采用了靜水密閉式。如在中華絨螯蟹幼體不同發(fā)育期耗氧率和窒息點(diǎn)的測(cè)定的實(shí)驗(yàn)中[5]，首先將中華絨螯蟹幼體放置于密閉三角瓶?jī)?nèi)，在水浴中控溫。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)立即固定水樣，測(cè)其溶解氧含量。相比較流水密閉

101、式，靜水密閉式的應(yīng)用更為廣泛。靜水法的裝置較為簡(jiǎn)單，不需要外界不斷提供呼吸室水流，只需將呼吸室靜置一段時(shí)間后，固定水樣，測(cè)定溶解氧含量，從而簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟，提高了實(shí)驗(yàn)效率。</p><p>　　除了間接法測(cè)定耗氧量，目前應(yīng)用較多的就是直接法測(cè)定耗氧量。如墨吉對(duì)蝦幼體耗氧率的研究中[7]，采用美國(guó)YSL58l型溶解氧測(cè)定儀測(cè)定水中的溶氧量。將對(duì)蝦幼體置于呼吸室中，用測(cè)氧儀探頭塞緊瓶口而密封，使幼體在呼吸室中適應(yīng)安定

102、1h，然后每隔lh記錄測(cè)氧儀讀數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出幼體，計(jì)算耗氧量和耗氧率。</p><p>　　相較于間接法，直接法的最大優(yōu)勢(shì)在于實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，溶解氧的含量可以通過(guò)儀器直接讀出來(lái)，而不需要固定水樣，采用化學(xué)滴定的方法來(lái)測(cè)定溶氧。此方法適用于樣品數(shù)量較多的實(shí)驗(yàn)。但其缺點(diǎn)也顯而易見(jiàn)，那就是儀器測(cè)定的數(shù)值受環(huán)境影響偏差較大，而用傳統(tǒng)的滴定方法測(cè)得的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度較高。但對(duì)測(cè)定樣品較多的實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，直接法能縮短實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，從而

103、是縮短實(shí)驗(yàn)周期。</p><p>　　三疣梭子蟹不同發(fā)育階段的蛻殼時(shí)間不等，有的需要一周，而有的則只要一兩天，而且水溫也會(huì)對(duì)其蛻殼時(shí)間長(zhǎng)度產(chǎn)生一定影響，因此采用直接法測(cè)定溶解氧能保證在三疣梭子蟹處于同一發(fā)育階段時(shí)迅速完成實(shí)驗(yàn)，而且實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，減少對(duì)梭子蟹幼體造成損傷，不會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。因此，本研究采用直接法測(cè)定水體中的溶解氧，然后根據(jù)1h內(nèi)溶氧的變化計(jì)算耗氧量及耗氧率。</p><p&

104、gt;　　4.2 篩選蟹和普通蟹的體重比較</p><p>　　通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，兩組三疣梭子蟹在相同階段的平均體重有較大差異。在溞狀幼體階段，由于梭子蟹個(gè)體較小，其平均體重的差距較小。但隨著梭子蟹的蛻殼長(zhǎng)大，兩種品系梭子蟹的平均體重呈現(xiàn)出較大的差異，普通梭子蟹的平均體重要大于篩選梭子蟹的平均體重。雖然在第Ⅳ期溞狀幼體時(shí)，普通梭子蟹的平均體重為0.00079±0.00013g要小于溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹的

105、平均體重0.00081±0.00019g；第Ⅱ期稚蟹時(shí)，普通梭子蟹的平均體重為0.03114±0.01211g也要小于溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹的0.03534±0.0067g，但從總體比較上來(lái)看，在同一實(shí)驗(yàn)條件下普通梭子蟹的平均體重要大于溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹的平均體重，而且差異顯著（P<0.01）。</p><p>　　這一現(xiàn)象可能是由于用病原生物篩選出的梭子蟹具有溶藻弧菌

106、的抗性，使生命活動(dòng)中的某些功能得到了強(qiáng)化，如呼吸系統(tǒng)，這一變化能使梭子蟹較好的適應(yīng)多變的外界環(huán)境，因此生存下來(lái)的梭子蟹個(gè)體差異較大，有些個(gè)體較大，有些個(gè)體較小，從而造成平均體重偏小。而普通梭子蟹對(duì)外界環(huán)境變化的適應(yīng)性不強(qiáng)，面對(duì)多變的環(huán)境因素，產(chǎn)生了優(yōu)勝劣汰的淘汰機(jī)制，使個(gè)體較小，活力較差的梭子蟹逐漸因?yàn)榧ち业氖澄?、領(lǐng)地競(jìng)爭(zhēng)而死亡。雖然種群的優(yōu)勝劣汰機(jī)制有益于自身的生存與發(fā)展，但對(duì)生產(chǎn)養(yǎng)殖來(lái)說(shuō)會(huì)造成很大的資源浪費(fèi)，因此在三疣梭子蟹養(yǎng)殖過(guò)程

107、中我們要使養(yǎng)殖環(huán)境處于一個(gè)穩(wěn)定的狀態(tài)，減少病原生物的侵入，從而提高梭子蟹的存活率。溶藻弧菌篩選的梭子蟹與普通梭子蟹相比，機(jī)體發(fā)生的具體變化還需要后續(xù)實(shí)驗(yàn)的繼續(xù)研究。</p><p>　　4.3 篩選蟹和普通蟹溶氧需求的比較</p><p>　　對(duì)比普通三疣梭子蟹和溶藻弧菌感染篩選的三疣梭子蟹的耗氧量和耗氧率發(fā)現(xiàn)，溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹的耗氧量和耗氧率低于普通梭子蟹。這一差別在溞狀幼體階段

108、不太明顯，但隨著梭子蟹的長(zhǎng)大，兩者的差距逐漸增大。正如上文中提到的用病原生物篩選出的梭子蟹具有溶藻弧菌的抗性，這些梭子蟹可以對(duì)水體中病原生物如溶藻弧菌產(chǎn)生免疫。而且篩選的梭子蟹的體能活力較好，體內(nèi)的某些功能如代謝、排泄等都得到了強(qiáng)化，使機(jī)體不需要消耗過(guò)多的氧氣就能很好的生活。相比較于溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹，普通梭子蟹則沒(méi)有這些強(qiáng)化的機(jī)能。當(dāng)溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹與普通梭子蟹處于同一個(gè)環(huán)境下時(shí)，溶藻弧菌病原篩選的梭子蟹表現(xiàn)出來(lái)的運(yùn)動(dòng)活