藏藥“佐太”主要藥效學(xué)研究

1、<p>　　藏藥“佐太”主要藥效學(xué)研究</p><p>　　作者：蔣婀娜 張春光 王建華 李中港 程芳 薛霞 劉兆平</p><p>　　【摘要】 　　目的通過動物實(shí)驗(yàn)研究藏藥“佐太”的抗驚厥、解熱、抗炎及增強(qiáng)免疫的作用。方法尼可剎米注射液致小鼠驚厥法、傷寒Vi多糖疫苗致熱家兔法、二甲苯致小鼠耳腫脹法和不同劑量“佐太”對小鼠非特異性免疫功能的影響。結(jié)果“佐太”能明顯延長小鼠驚厥

2、潛伏期及死亡潛伏期；明顯降低因傷寒Vi多糖疫苗致熱的新西蘭兔體溫；顯著降低二甲苯致小鼠耳腫脹度；明顯提高小鼠廓清指數(shù)和吞噬指數(shù)。結(jié)論“佐太”具有良好的抗驚厥、解熱、抗炎及增強(qiáng)免疫的作用。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 佐太 驚厥 解熱 抗炎 免疫</p><p>　　“佐太”為藏語譯音，也有音譯為“佐塔”、“坐臺”、“佐臺”及“唑臺”的，是生產(chǎn)“七十味珍味丸”、“二十五味松石丸”、“

3、仁青常覺”、“坐珠達(dá)西”等名貴藏成藥的主要原料，也可配合普通藥物增加療效，是一種常用珍寶類藥物［1］。臨床上“佐太”并不單獨(dú)使用，而是主要用做復(fù)方佐劑，與諸藥相配，增強(qiáng)諸藥療效，緩解毒性。據(jù)報(bào)道，“佐太”與朱砂的主要化學(xué)成分類似（硫化汞）［2］，朱砂主要功效為鎮(zhèn)靜安神、清熱解毒。通過參考相關(guān)文獻(xiàn)，本課題從“佐太”抗驚厥、解熱、抗炎和增強(qiáng)免疫方面進(jìn)行研究，從而為相關(guān)研究提供參考。</p><p><b>

4、　　1 材料</b></p><p>　　1.1 藥物與試劑佐太，西藏自治區(qū)藏藥廠提供，批號：061124；安定（地西泮），購自山東大學(xué)齊魯醫(yī)院，批號：0610009；阿司匹林腸溶片，山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司，批號：0704172021；胸腺肽腸溶片，西安迪塞生物藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：0701048；尼可剎米注射液，上海禾豐制藥有限公司，批號：060904；傷寒Vi多糖疫苗，北京天壇生物制品股份

5、有限公司，批號：2006030105；二甲苯，天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號：060922。</p><p>　　1.2 儀器722N型可見分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；ALC-2100.2型電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；ALC-110.4型電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；ALS-15型電子計(jì)重稱，上海永杰衡器有限公司；打耳器，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站；microlife電子溫度計(jì)。&

6、lt;/p><p>　　1.3 動物昆明種小鼠，體重18～22 g，雌雄各半；新西蘭兔，體重2.5～3.0 kg，雌雄各半。山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(魯)20030004，動物質(zhì)量合格證號：004134。</p><p>　　1.4 給藥劑量設(shè)計(jì)據(jù)楊寶壽等［2］報(bào)道：60 kg人日用量為0.667 mg·kg-1，按倍數(shù)法折算小鼠和兔等效劑量分別為6.

7、67 mg·kg-1和2.00 mg·kg-1。久美彭措［3］報(bào)道：“佐太”在臨床應(yīng)用中成人每日量分別為15～20 mg，相當(dāng)于0.25～0.33 mg·kg-1，按倍數(shù)法折算小鼠和兔等效劑量分別為2.50～3.30 mg·kg-1和0.75～0.99 mg·kg-1。結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道及等比原則，設(shè)定小鼠低劑量組為3.3 mg·kg-1，中劑量組為6.6 mg·kg-1，

8、高劑量組為13.2 mg·kg-1；新西蘭兔低劑量組為1.0 mg·kg-1，中劑量組為2.0 mg·kg-1，高劑量組為4.0 mg·kg-1。</p><p>　　1.5 數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 ±s表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。</p><p><b>　　2 方法和結(jié)果</b></p&g

9、t;<p>　　2.1 佐太對尼可剎米注射液致小鼠驚厥作用的影響試驗(yàn)［4，5］取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g。按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，分別為陰性對照組（0.5%羧甲基纖維素鈉）、陽性對照組（安定片，1.0 mg·kg-1），佐太低劑量組（3.3 mg·kg-1），中劑量組（6.6 mg·kg-1），高劑量組（13.2 mg·kg-1）。各劑量組分

10、別灌胃（ig）給予相應(yīng)體積的藥物，給藥容積為0.2 ml·（10 g）-1。給藥1次/d，連續(xù)給藥4 d。末次給藥前禁食14 h，自由飲水，藥后30 min，各組小鼠皮下注射（sc）給予尼可剎米注射液770 mg·kg-1，立即觀察小鼠出現(xiàn)驚厥的時間（驚厥潛伏期）、發(fā)生驚厥的動物數(shù)、死亡動物數(shù)（未驚厥小鼠的潛伏期計(jì)作120 min）及死亡潛伏期（從出現(xiàn)驚厥至死亡時間），計(jì)算驚厥率和死亡率。通過比較上述指標(biāo)，評價藥物抗

11、驚厥作用。</p><p>　　結(jié)果如表1所示，佐太6.6，13.2 mg·kg-1劑量組驚厥潛伏期與陰性對照組比較差異有顯著性(P＜0.01)，能顯著延長小鼠驚厥潛伏期，小鼠死亡潛伏期亦明顯延長。提示其具有良好的抗驚厥作用。表1 佐太對尼可剎米注射液致小鼠驚厥作用的影響（略）與陰性對照組比較，**P＜0.01；與陽性對照組比較，△△P＜0.01；n=10</p><p>　　

12、2.2 佐太解熱作用試驗(yàn)（傷寒Vi多糖疫苗致熱家兔法）［6,7］取健康新西蘭兔，雌雄各半，體重2.5～3.0 kg，室溫20℃時，基礎(chǔ)肛溫在38.0～38.8℃的兔用于試驗(yàn)。試驗(yàn)前測正常肛溫兩次，溫差值不超過0.3℃。耳緣靜脈注射傷寒Vi多糖疫苗（0.5 ml·kg-1），1 h后測肛溫，取升溫0.8 ℃以上的新西蘭兔30只，按升溫高低隨機(jī)分組，共5組，每組6只，雌雄各半。分別為陰性對照組（0.5%羧甲基纖維素鈉）、陽性對照

13、組（阿斯匹林腸溶片 50 mg·kg-1），佐太低劑量組（1.0 mg·kg-1），中劑量組（2.0 mg·kg-1），高劑量組（4.0 mg·kg-1）。各組分別灌胃（ig）給予相應(yīng)體積的藥物，給藥容積為2.0 ml·kg-1。給藥后每隔1 h同法測量兔肛溫，共測5次，以不同時間所測肛溫與基礎(chǔ)肛溫之差，為體溫變化的指標(biāo)。統(tǒng)計(jì)肛溫差值進(jìn)行比較，評價不同劑量組佐太解熱作用。表2 佐太解熱

14、作用試驗(yàn)（傷寒Vi多糖疫苗致熱家兔法）（略）與陰性對照組比較，*P＜0.05；n=6</p><p>　　結(jié)果如表2所示，新西蘭兔耳緣靜脈注射傷寒Vi多糖疫苗1 h后，肛溫明顯升高。灌胃給予佐太后，新西蘭兔肛溫明顯降低，藥后1 h佐太2.0，4.0 mg·kg-1劑量組出現(xiàn)明顯的解熱作用，解熱作用可持續(xù)5 h。提示其具有良好的解熱作用。</p><p>　　2.3 佐太對二甲苯

15、致小鼠耳腫脹的抑制作用試驗(yàn)［6,8］取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g。按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，分別為陰性對照組（0.5%羧甲基纖維素鈉）、陽性對照組（阿斯匹林腸溶片,200 mg·kg-1），佐太低劑量組（3.3 mg·kg-1），中劑量組（6.6 mg·kg-1），高劑量組（13.2 mg·kg-1）。分別灌胃（ig）給予相應(yīng)體積的藥物，給藥容積為0.2 ml&

16、#183;（10 g）-1。給藥1次/d，連續(xù)給藥4 d。末次給藥后30 min，用二甲苯0.05 ml/只滴于小鼠右耳內(nèi)外兩面致炎，左耳為對照側(cè)。30 min后，頸椎脫臼處死動物，用直徑8 mm的打耳器左、右兩耳相應(yīng)部位各打一耳片，用電子天平稱重，以左右耳片重量之差作為腫脹度。計(jì)算各組腫脹度，求出腫脹抑制率（%）。</p><p>　　腫脹度（mg）＝右耳片重－左耳片重</p><p>

17、　　腫脹抑制率（%）=陰性對照組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度陰性對照組平均腫脹度×100%</p><p>　　結(jié)果如表3所示，與陰性對照組比較，佐太6.6，13.2 mg·kg-1劑量組小鼠耳腫脹度顯著下降 (P＜0.01)，提示其具有良好的抗炎作用。</p><p>　　2.4 佐太對小鼠非特異性免疫功能的影響試驗(yàn)［6,9］取昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重18～

18、22 g。按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半，分別為陰性對照組（0.5%羧甲基纖維素鈉）、陽性對照組（胸腺肽腸溶片，5.0 mg·kg-1）、佐太低劑量組（3.3 mg·kg-1）、中劑量組（6.6 mg·kg-1）、高劑量組（13.2 mg·kg-1）。分別灌胃（ig）給予相應(yīng)體積的藥物，給藥容積為0.2 ml·（10 g）-1。給藥1次/d，連續(xù)給藥4 d。末次給藥前禁食14

19、h，自由飲水，藥前稱體重，藥后30 min，尾靜脈注射50%印度墨汁，給藥容積為0.05 ml·(10 g)-1。于2 min和10 min眼眶靜脈叢取血20 μl加到0.1%碳酸鈉溶液2 ml中，搖勻。在680 nm波長處測吸光度值(A)。小鼠處死后取肝臟和脾臟稱重。計(jì)算廓清指數(shù)（k）及吞噬指數(shù)（α）值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。廓清指數(shù)（k）=lg（A2/A10）/△t，吞噬指數(shù)（α）=體重/（肝重+脾重）。表3 佐太對二甲苯致小鼠耳

20、腫脹的抑制作用（略）與陰性對照組比較，**P＜0.01；與陽性對照組比較，△△P＜0</p><p>　　結(jié)果如表4所示，佐太6.6，13.2 mg·kg-1劑量組與陰性對照組比較，可明顯提高小鼠廓清指數(shù)和吞噬指數(shù)。提示佐太在此劑量下能提高小鼠的非特異性免疫功能。表4 佐太對小鼠非特異性免疫功能的影響（略）</p><p><b>　　3 討論</b>&

21、lt;/p><p>　　佐太作為藏藥之精華，其獨(dú)特的療效有目共睹，但因其炮制的主要原料為汞化合物，因此先前有關(guān)報(bào)道以安全性研究居多。本課題秉承了藏藥傳統(tǒng)醫(yī)藥理論思想的指導(dǎo)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)藥理論與方法，通過實(shí)驗(yàn)研究證明，佐太能明顯延長小鼠驚厥潛伏期及死亡潛伏期；能明顯降低因傷寒Vi多糖疫苗致熱的新西蘭兔體溫；能顯著降低二甲苯致小鼠耳腫脹程度；可明顯提高小鼠廓清指數(shù)和吞噬指數(shù)。以上結(jié)果說明，佐太具有良好的抗驚厥、解熱、抗炎及

22、增強(qiáng)免疫力的作用。相信隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步及藥品市場的進(jìn)一步規(guī)范管理，這種具有民族特色、療效獨(dú)到的藥物會逐步被人們認(rèn)識并深入研究，從而更好地造福于全人類。</p><p><b>　　【參考文獻(xiàn)】</b></p><p>　　［1］何毓敏，曾 勇，張 藝. 藏藥“佐塔”及其安全性研究現(xiàn)狀［J］.中國民族醫(yī)藥雜志，2006，2（1）：39.</p>&l

23、t;p>　　［2］楊寶壽，江吉村，降 擁，等. 藏藥“佐塔”中汞的作用特點(diǎn)和安全性研究［J］.西藏研究,2004，（1）:74.</p><p>　?。?］久美彭措. 藏藥中重金屬毒性的實(shí)驗(yàn)研究［C］.99全國藏醫(yī)藥學(xué)術(shù)研討會交流論文，1999：199.</p><p>　　［4］徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：813.</p>

24、;<p>　　［5］嚴(yán)鑄云，李曉華，陳 新，等.僵蠶抗驚厥活性部位的初步研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2006，17（5）：696</p><p>　?。?］中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.中藥新藥研究指南（藥學(xué)　藥理學(xué)　毒理學(xué)）［M］.北京：中國衛(wèi)生部藥政管理局，1994：120，167，173，187，121，136，151.</p><p>　　［7］李洪梅，李小芹，鄔洪波