維藥鷹嘴豆中總黃酮的超聲提取工藝研究

1、<p>　　維藥鷹嘴豆中總黃酮的超聲提取工藝研究</p><p>　　作者：海力茜·陶爾大洪， 巴吐爾·買買提明，帕麗達(dá) 瑪依拉 </p><p>　　【摘要】 　　目的確定鷹嘴豆中總黃酮的優(yōu)選超聲提取工藝。方法采用正交實(shí)驗(yàn)法，考察溶劑量，提取次數(shù)，超聲時(shí)間，溶劑濃度對(duì)提取率的影響，用分光光度標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定含量。結(jié)果所考察的因素中，鷹嘴豆總黃酮的提取影響程度

2、為：溶劑濃度＞提取次數(shù)＞溶劑量＞超聲時(shí)間。結(jié)論超聲提取的最佳條件為：A1B3C3D3 。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 鷹嘴豆 總黃酮 正交實(shí)驗(yàn)法</p><p>　　Abstract:ObjectiveTo optimize the ultrasonic extraction condition for the flavonoids from Cicer arietinum L.

3、MethodsThe extraction rate of flavonoids was used as index and the experimental conditions, such as ethanol concentration , ultrasonic time, solvent quanity and extraction times was optimized by orthogonal design. UV-Spe

4、ctrophotometry was used for the determination.ResultsThe order of factors to affect the flavonoid extraction was ethanol concentration ＞ extraction times ＞ solvent quani</p><p>　　Key words:Cicer arietinum

5、L.； Flavonoids； Orthogonal test</p><p>　　鷹嘴豆(Semen Ciceris Ariefini)為豆科Leguminosae植物 ,因其籽實(shí)尖如鷹嘴，故名鷹嘴豆。是維吾爾族習(xí)用藥材，維吾爾語(yǔ)里叫“Nukut”直譯 “奴乎提”或“諾胡提” ［1］。在醫(yī)藥方面的應(yīng)用已有悠久的歷史。維吾爾族用它治療支氣管炎、粘膜炎、霍亂、便秘、痢疾、消化不良、腸胃氣脹、毒蛇咬傷、糖尿病、

6、高脂血癥、性欲降低、皮膚瘙癢、中暑等疾病［2］。據(jù)報(bào)道，新疆鷹嘴豆中含鐵、銅、鋅、錳、鍶等5種微量元素［3］，含有11種氨基酸。鷹嘴豆發(fā)芽的種子胚芽部分和植物幼苗中含有黃酮類化合物。藥理研究證明，鷹嘴豆對(duì)人體具有增加膽固醇終端產(chǎn)物的排泄作用，可降低血糖、血脂、［4］血壓及肝組織脂質(zhì)含量，鷹嘴豆及其制品是糖尿病、高血脂、高血壓等特殊人群的首選健康食品。到目前為止，對(duì)鷹嘴豆中總黃酮的超聲提取工藝研究及含量測(cè)定尚未見報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)以總黃酮為考察

7、指標(biāo)，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)法考察超聲提取鷹嘴豆總黃酮的最佳工藝。旨在為鷹嘴豆進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)，也可用于鷹嘴豆的質(zhì)量控制。</p><p><b>　　1 儀器與材料</b></p><p>　　TU-1800型紫外可見分光光度計(jì)，SK8210HP型超聲清洗機(jī)，蘆丁對(duì)照品（中國(guó)藥品生物品檢定所），電子天平（梅特勒-托利多上海儀器有限公司生產(chǎn)），所用試劑均為分

8、析純。鷹嘴豆購(gòu)于佳家樂超市，產(chǎn)于新疆木壘縣，將鷹嘴豆磨碎成粉,60℃烘干粉粹后過60目篩備用。</p><p><b>　　2 方法 </b></p><p>　　2.1 樣品的提取 </p><p>　　精密稱取鷹嘴豆粉1.000 g，加70%乙醇20 ml，提取2次，超聲提取30 min，過濾，搖勻。再精密吸取2 ml置25 ml量瓶中

9、，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試備用。</p><p>　　2.2 總黃酮的測(cè)定</p><p>　　2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 </p><p>　　精密稱取120℃干燥至恒重的無水蘆丁20 mg，置100 ml的容量瓶中，加60%的乙醇至刻度。精密吸取2，3，4，5，6 ml，分別放置25 ml的容量瓶中，加5%亞硝酸鈉1.0 ml，搖勻，放置6 mi

10、n，加1.0%硝酸鋁1.0 ml放置6 min，加4%的氫氧化鈉10.0 ml，用60%乙醇稀釋至刻度，放置10 min后于510 nm處測(cè)吸收度，得回歸方程為A=7.235C+0.020 1，r=0.999 7。</p><p>　　2.2.2 樣品的測(cè)定 </p><p>　　量取供試品約10 ml于離心試管中，離心4 000 r/min，10 min，取上清液5.00 ml按“2

11、.2.1”項(xiàng)下方法處理，測(cè)定吸光度值，代入回歸方程，計(jì)算總黃酮含量。</p><p><b>　　3 結(jié)果［5］ </b></p><p>　　3.1 提取工藝的單因素實(shí)驗(yàn)考察</p><p>　　3.1.1 不同乙醇濃度對(duì)提取效果的影響分別用30%，50%，70%，95%乙醇溶液15 ml，對(duì)1 g鷹嘴豆提取兩次，20 min/次，所得

12、總黃酮的濃度為0.066 0%，0.068 0%，0.203 0%，1.768%，表明鷹嘴豆在95%乙醇溶液提取效果較好。</p><p>　　3.1.2 不同提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響溶劑量為15 ml，乙醇濃度為70%，對(duì)1g鷹嘴豆提取兩次，分別用10，20，30，40 min,結(jié)果所得總黃酮的濃度為0.255 0%，0.298 0%，0.147 0%，0.125 0%，表明鷹嘴豆在提取時(shí)間20 min效果較

13、好。</p><p>　　3.1.3 不同溶劑量對(duì)提取效果的影響乙醇濃度為70%，20 min/次，對(duì)1 g鷹嘴豆提取兩次，分別用10，15，20，25 ml溶劑來提取。結(jié)果所得總黃酮的濃度為0.142 0%、0.297 0%，0.264 0%，0. 247 5%, 表明鷹嘴豆在提取溶劑15 ml效果較好。</p><p>　　3.1.4 不同提取次數(shù)對(duì)提取的效果影響乙醇濃度為70%

14、，20 min/次，溶劑量為15 ml來提取1 g鷹嘴豆，提取次數(shù)分別為1次，2次，3次，4次。結(jié)果所得總黃酮的濃度為 0.040 0%，0.282 0%，0.288 0%，0.117 0%， 表明鷹嘴豆在提取次數(shù)3 次時(shí)效果較好。表1 因素水平 （略）</p><p>　　3.2 正交實(shí)驗(yàn)及其結(jié)果在實(shí)際操作中，由于各因素之間相互交叉影響，因此為全面考察乙醇提取法的工藝參數(shù)，確定乙醇濃度，提取時(shí)間，溶劑量，提

15、取次數(shù)等4種因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。見表1。</p><p>　　從表2中的K1，K2，K3，Sj分析得到：乙醇濃度、提取時(shí)間、溶劑量、提取次數(shù)等4因素對(duì)黃酮提取量影響的主次順序?yàn)椋阂掖紳舛?提取次數(shù)-溶劑量-超聲提取時(shí)間，并且最佳提取工藝條件為乙醇濃度95%，提取次數(shù)為3次，溶劑量為25 ml，超聲提取時(shí)間為40 min，即A1B3C3D3 。在最佳提取工藝條件下測(cè)得新疆維藥鷹嘴豆中總黃酮的含量為4.012%。本

16、研究為進(jìn)一步開發(fā)利用新疆維藥鷹嘴豆黃酮類化合物奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）</p><p><b>　　3 討論 </b></p><p>　　通過研究得到的最佳提取工藝為乙醇濃度95%，提取次數(shù)為3次，溶劑量為25 ml，超聲提取時(shí)間為40 min。在最佳提取工藝條件下測(cè)得新疆維藥鷹嘴豆中總黃酮的含量為4.012%。</p><p

17、><b>　　【參考文獻(xiàn)】</b></p><p>　?。?］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典（上冊(cè)）［M］.上海：上海人民出版社，1977：887.</p><p>　?。?］劉勇民.維吾爾藥志（上冊(cè)）［M］.烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版，1999：599.</p><p>　?。?］古麗克孜，阿日甫，阿依古麗，等.ICP-AES法測(cè)定新疆鷹嘴豆