應(yīng)用AFLP技術(shù)對(duì)大連沿海裙帶菜養(yǎng)殖和野生群體的遺傳多樣性分析.pdf

1、裙帶菜是一種廣溫性海產(chǎn)大型經(jīng)濟(jì)藻類，含有大量的維生素A及其它營(yíng)養(yǎng)成分，具有高蛋白、低脂肪、高纖維等特點(diǎn)，不僅味道鮮美，還具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，而且可作綜合利用提取褐藻膠的原料。我國(guó)自然生長(zhǎng)的裙帶菜主要分布在浙江省的舟山群島和嵊泗島，大連和青島地區(qū)作為我國(guó)主要的裙帶菜養(yǎng)殖基地，所用種菜絕大多數(shù)是通過(guò)早年的引種及野生種苗，這就勢(shì)必導(dǎo)致遺傳多樣性水平不斷下降。近年來(lái)，裙帶菜國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)需求不斷擴(kuò)大，應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)展，顯示出巨大的市場(chǎng)潛力

2、，但裙帶菜選育工作基礎(chǔ)還十分薄弱。因此，對(duì)裙帶菜遺傳背景的深入研究勢(shì)在必行。本文利用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)大連沿海的付家莊野生、星海公園野生、獐子島野生和凌水養(yǎng)殖裙帶菜群體進(jìn)行遺傳多樣性的研究，以期對(duì)裙帶菜的遺傳育種和種質(zhì)資源保護(hù)工作提供一定的理論依據(jù)。
　　 本實(shí)驗(yàn)共篩選了5對(duì)AFLP引物，對(duì)四個(gè)群體共計(jì)120個(gè)裙帶菜個(gè)體(每個(gè)群體30個(gè)個(gè)體)進(jìn)行了研究。利用Popgen32軟件分析了群體內(nèi)的遺傳變異和群體間的遺傳分化，計(jì)算不

3、同群體的遺傳距離，并利用UPGMA法構(gòu)建了四個(gè)群體的系統(tǒng)發(fā)生樹。所得結(jié)果如下：
　　 利用5對(duì)AFLP引物共擴(kuò)增出277個(gè)位點(diǎn)，其中有232個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，平均每對(duì)引物組合能檢測(cè)到46.4個(gè)多態(tài)位點(diǎn)。四個(gè)群體中獐子島野生群體(ZZD)多態(tài)位點(diǎn)比例最高，為73.28％，最低的是凌水養(yǎng)殖群體(YZ)，多態(tài)位點(diǎn)比例為64.25％。Shannon指數(shù)(I)的變化在0.3594～3971之間，雜合度(H)的變化范圍在0.2408～2711之

4、間，兩個(gè)指數(shù)變化規(guī)律基本一致，并且與多態(tài)位點(diǎn)比例分析結(jié)果相吻合。由此可以推斷：獐子島野生群體(ZZD)的遺傳變異水平最高，凌水養(yǎng)殖群體(YZ)的遺傳變異水平最低。
　　 AFLP擴(kuò)增獲得的四個(gè)裙帶菜群體總的遺傳分化系數(shù)Gst為0.1651，即表明在裙帶菜總的遺傳變異中有16.51％的變異存在于群體間，83.49％的變異存在于群體內(nèi)。利用成對(duì)比較的方法分析各群體間的Gst的值分布在0.0917～0.1416之間，證明群體間沒(méi)有明顯

5、的遺傳分化，大部分的變異來(lái)自群體內(nèi)部。所有群體間的基因流Nm的值分布在4.9520～3.0303之間，表現(xiàn)了一定的基因流動(dòng)性。
　　 四個(gè)裙帶菜群體遺傳距離在0.0532-0.0996之間，可見各群體間遺傳變異比較小。基于遺傳距離用UPGMA法構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)生樹表明，四個(gè)群體共分成了三個(gè)組，星海公園野生群體(XH)和凌水養(yǎng)殖群體(YZ)首先聚為一支，然后和獐子島野生群體(ZZD)聚為一支，付家莊野生群體(FJZ)和這些群體最后聚在

6、一起。
　　 通過(guò)對(duì)裙帶菜遺傳變異的分析，發(fā)現(xiàn)四個(gè)裙帶菜群體都具有較高的遺傳多樣性水平，但是與野生群體相比，養(yǎng)殖群體的多樣性參數(shù)有所降低。為了保護(hù)養(yǎng)殖裙帶菜種質(zhì)資源保持在比較高的水平，應(yīng)該采取有效保護(hù)措施防止同地區(qū)間的種苗交流。本文的研究結(jié)果為進(jìn)一步深入研究裙帶菜遺傳背景，實(shí)現(xiàn)裙帶菜良種化奠定基礎(chǔ)。另外實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，AFLP分子標(biāo)記技術(shù)相較于RAPD、ISSR等其他常用的分子標(biāo)記技術(shù)來(lái)說(shuō)，具有很高的多態(tài)性檢出效率，是研究裙帶菜