賽葵曲葉病毒的鑒定.pdf

1、近年來(lái)福建省有不少關(guān)于雙生病毒的報(bào)道，被侵染的植物主要有：煙草、辣椒、番茄、棉花等作物，勝紅薊、醴腸、艾草、葉下珠、賽葵等雜草以及庭院觀賞植物三角梅等。我們從福建省仙游縣和永安市采集了呈雙生病毒典型病癥的賽葵和醴腸樣品，分別提取其總DNA，用雙生病毒的簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增到了病毒基因組的部分序列。序列測(cè)定和分析表明：從樣品中檢測(cè)到的病毒為賽葵曲葉病毒(Malvastrum leaf curl virus，MaLCV)和空心蓮子草黃脈病毒(Alt

2、ernantherayellow vein virus，A1YVV)。其中分離物F1屬于MaLCV，分離物F2屬于A1YVV。 由福建仙游縣呈現(xiàn)葉片卷曲和葉脈增厚病癥的賽葵(Malvastrum coromandelianuml)植株中分離得到F1。全序列測(cè)定表明F1 DNA-A全長(zhǎng)共2748個(gè)核苷酸，包含6個(gè)開(kāi)放閱讀框，為典型的舊世界雙生病毒。通過(guò)基因組比對(duì)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)1與賽葵曲葉病毒(Malvastrum leaf curl v

3、irus，MaLCV)福建分離物(MaLCV-[CN：Fj])的序列相似性最高，為96％；與廣東賽葵曲葉病毒(Malvastrum leaf curl Guangdong virus，MaLCGdV)福建分離物(MaLCuGdV-FJ3[CN：Fj])的序列相似性為92％；與MaLCGdV廣東分離物MaLCuGdV-GD6[CN：Gd]和MaLCuGdV-GD9[CN：Gd]的序列相似性皆為88％；與廣東番木瓜曲葉病毒(Papaya l

4、eaf curl Guangdong virus，PaLCGdV)廣東分離物PaLCuGuV-GD2[CN：Gd]的相似性為94％，福建分離物PaLCuGuV-[CN：Fj]的相似性為93％；與中國(guó)番木瓜曲葉病毒廣州分離物PaLCuGuV-GZ[CN：Gd]的相似性為94％；而與其他雙生病毒基因組序列的相似性不高，最高為85％，最低為78％。這表明F1是MaLCV的一個(gè)新分離物(MaLCV-[XY])。 由福建永安市呈現(xiàn)黃脈癥狀

5、的醴腸(Ecliptaprostrate)中分離得到了F2。病毒全序列測(cè)定表明F2 DNA-A全長(zhǎng)含2745個(gè)核苷酸，共編碼6個(gè)蛋白，為典型的舊世界雙生病毒。通過(guò)基因組比對(duì)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)2與A1YVV的中國(guó)福建分離物A1YVV-[F30]的序列相似性為97％；與福建分離物A1YVV-[F31]、A1YVV-[F22]、A1YVV-[LC1]的相似性為96％；與A1YVV的中國(guó)廣東分離物A1YVV-[Gd]的序列相似性為96％；與A1YVV的中

6、國(guó)廣西分離物A1YVV-[Gx]的相似性為95％，與A1YVV的越南分離物A1YVV-[Vn]的相似性為95％，而與其他種雙生病毒的各地分離物的序列相似性較低，最高僅為78％，最低為74％。因此，我們認(rèn)為F2是A1YVV在福建的一個(gè)新分離物(A1YVV-[YA])。 我們通過(guò)重組DNA的方法構(gòu)建了MaLCV的侵染性克隆，經(jīng)農(nóng)桿菌接種侵染本氏煙(Nicotiana benthamiana)、番茄(Lycopersicon escu