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1、生化反應(yīng)與血清學實驗,《醫(yī)學微生物學》實驗七,一、生化反應(yīng),掌握細菌生化反應(yīng)的原理和臨床意義。熟悉鑒別細菌常用的生化試驗原理、方法和結(jié)果判斷。,[實驗?zāi)康腯,生化反應(yīng)基本原理,不同的細菌 含有不同的分解代謝的酶 具有不同的分解代謝途徑 對同一營養(yǎng)物質(zhì)的分解代謝及其產(chǎn)物有所不同,利用生化方法檢測代謝產(chǎn)物以判斷細菌的分解代謝特征,從而達到鑒定細菌的目的。稱:細菌的生化反應(yīng)檢測法,知識點,常見的生化反應(yīng),,,,實驗材料,1.菌種
2、 大腸埃希菌、沙門氏菌2.微量生化反應(yīng)管 葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘露醇、蛋白胨水(靛基質(zhì))、硫化氫。3.試劑 吲哚試劑,葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖,大腸埃希菌:分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣致病性腸道細菌:大多數(shù)不分解乳糖,1.糖發(fā)酵試驗,1.糖發(fā)酵試驗,(1)原理,1.糖發(fā)酵試驗,(2)方法,中性或堿性 → 紫色 酸性 → 黃色,1.糖發(fā)酵試驗,(3)結(jié)果判斷
3、,溴甲酚紫,,有細菌生長培養(yǎng)基呈混濁,可能出現(xiàn)3種結(jié)果。,(3)結(jié)果判斷,2.靛基質(zhì)(吲哚)試驗,(1)原理,(2)結(jié)果判斷,陽性,,2.靛基質(zhì)(吲哚)試驗,3.硫化氫試驗,(1)原理,(2)結(jié)果判斷,3.硫化氫試驗,生化反應(yīng)材料分配,二、血清學鑒定,掌握細菌的血清學鑒定法 。,[實驗?zāi)康腯,實驗原理,根據(jù)抗原抗體反應(yīng)具有高度特異性的特點,用已知抗體來檢測未知抗原(細菌)。,二、血清學鑒定,實驗材料,1.菌種 待檢細菌2.試劑
4、 多價沙門菌O(A-F)診斷血清3.其他 載玻片,沙門氏菌的主要抗原組成,O抗原:至少58種, 含相同抗原組分歸為一組,引起人類疾病的沙門菌大多數(shù)在A~F組。H抗原:分為Ⅰ、Ⅱ相,Ⅰ相以a、b、c等表示,Ⅱ相以1、2、3等表示。Vi抗原:抗原性弱,不穩(wěn)定,可阻止O抗原與其相應(yīng)抗體的凝集反應(yīng)。,沙門氏菌診斷血清(11種),先用A-F和 Vi血清檢測,根據(jù)結(jié)果再進行其他鑒定。,注意:,實驗方法,,結(jié)果判斷,沙門氏菌屬國內(nèi)常見
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