豬流感病毒的分離鑒定、HA基因的克隆序列分析和血清學(xué)研究.pdf

1、豬流感(SI)是由豬流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的不同日齡、性別和品種豬的一種急性、熱性和高度接觸性的呼吸道傳染病.1918年美國(guó)首次報(bào)道了SI的暴發(fā),1930年Shope從豬體中分離到了H1N1亞型豬流感病毒.迄今為止,SI已遍布美、歐、亞、非等世界各地.豬流感的暴發(fā),對(duì)全球養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失.豬流感除具有獸醫(yī)學(xué)意義外,更為重要的是生態(tài)學(xué)和公共衛(wèi)生意義.目前,豬流感的研究,已成為研究的熱點(diǎn)

2、.2002年,中國(guó)一些地方暴發(fā)了豬流感.為查明此次流行的病原,該實(shí)驗(yàn)室對(duì)收集的病料進(jìn)行了分離鑒定.利用豬流感標(biāo)準(zhǔn)的診斷試劑,鑒定分離毒株為H3亞型豬流感病毒.對(duì)分離的毒株,我們進(jìn)行了大量的生物學(xué)特性的研究:分離毒株血凝性廣泛,血凝素對(duì)熱不穩(wěn)定;分離毒株對(duì)酸、熱和乙醚等理化因素敏感;致病性試驗(yàn)結(jié)果表明,分離毒株對(duì)雞胚表現(xiàn)為高致病力;在試驗(yàn)條件下,分離毒株能感染小鼠和實(shí)驗(yàn)豬,表現(xiàn)典型的呼吸道癥狀和肉眼病變.利用RT-PCR,擴(kuò)增了HA基因的

3、完整HA1部分.序列分析結(jié)果表明,分離毒株和禽流感H5亞型病毒的序列高度相關(guān).進(jìn)化分析結(jié)果表明,Fujian株豬流感分離株與禽流感病毒屬于同一分支.初步建立了豬流感間接ELISA,優(yōu)化了豬流感間接ELISA的工作條件,并進(jìn)行了特異性和重復(fù)性試驗(yàn).結(jié)果表明,該方法有很好的特異性和重復(fù)性,可適用于豬流感的血清學(xué)診斷.我們用建立的血清學(xué)方法,對(duì)中國(guó)豬群進(jìn)行了SI血清學(xué)調(diào)查.結(jié)果表明,豬流感已在中國(guó)各個(gè)豬群存在和流行,其危害也日益加劇.針對(duì)豬呼