血液成分分離基本知識

1、血液成分分離基本知識,血液成分分離機的應用,主要內(nèi)容,一、血液成分分離相關基礎知識簡介二、血液成分分離方法三、血液成分分離方法相關技術簡介,一、血液成分分離相關基礎知識簡介,血站的職能,血站是指不以營利為目的，采集、提供臨床用血的且經(jīng)國家授權、由國家撥款運行的公益性衛(wèi)生機構。,血站成分科的職責,負責制備各種成分的血液制品 。,血液制品的分類,,血液制品,,全血 成分血,,紅細胞類病院體滅火血漿濃縮血小板新鮮

2、冰凍血漿冷凝沉淀凝血因子輻照成分血單采成分,,,濃縮紅細胞懸浮紅細胞濃縮少白細胞紅細胞懸浮少白細胞紅細胞洗滌紅細胞冰凍解凍去甘油紅細胞,單采血小板單采少白細胞血小板單采粒細胞單采新鮮冰凍血漿單采紅細胞,成分科分離的血液制品,,血液制品,,全血 成分血,,紅細胞類病原體滅火血漿濃縮血小板新鮮冰凍血漿冷凝沉淀凝血因子輻照成分血單采成分,,,濃縮紅細胞懸浮紅細胞濃縮少白細胞紅細胞懸

3、浮少白細胞紅細胞洗滌紅細胞冰凍解凍去甘油紅細胞,單采血小板單采少白細胞血小板單采粒細胞單采新鮮冰凍血漿單采紅細胞,濃縮紅細胞,將采集到多聯(lián)袋內(nèi)的全血中大部分血漿在全封閉的條件下分離出后剩余的部分所制成的紅細胞成分血。 1.制備方法： 　 （1）原料全血的要求：有效保存期內(nèi)的全血均可，建議采血后6～8小時內(nèi)內(nèi)制備。 　 （2）塑料袋要求：雙聯(lián)袋、三聯(lián)袋均可。 　 （3）聯(lián)袋全血平衡后對稱裝入離心機中。 　 （4

4、）離心條件設置：5000g，7min,溫度2～6℃，剎車5～6 min。 　 （5）離心后的血液應輕輕拿出，放入分漿夾內(nèi)或用虹吸方式將血漿分出。 2.濃縮紅細胞的特點： ?。?）體積大約是全血的一半左右； ?。?）血細胞比容0.65～0.80； 　 （3）紅細胞含量幾乎和全血相同； 　 （4）白細胞的含量也和全血基本相同； 3.用途： 　 （1）一般用于各種血容量正常的貧血病人； 　 （2）急性出血或手

5、術病人失血低于1500ml者； 　 （3）心肝腎功能不全者； 　 （4）小兒或老人輸血； 　 （5）妊娠晚期伴有貧血者和一氧化碳中毒者等。 4.輸入劑量及方法： 　 對于一個60公斤體重的成年人，每輸入2個單位濃縮紅細胞（每單位由200ml全血制備）可以提高血紅蛋白10g/L。輸注前需交叉配血，必要時可用生理鹽水稀釋后輸注。,懸浮紅細胞,也稱為紅細胞懸液，是全血經(jīng)離心除去大部分血漿后，加入紅細胞保存液制備而成。是目前

6、臨床上用量最大的一種紅細胞制劑。 1.制備方法 基本與濃縮紅細胞相同，只是最后血漿分出后，將紅細胞添加劑加入到濃縮紅細胞袋中并混勻。  2.懸浮紅細胞的特點： （1）血細胞比容0.50～0.65； 　?。?）紅細胞含量和濃縮紅細胞相同； 　?。?）白細胞的含量也和濃縮紅細胞基本相同； 　?。?）它是在濃縮紅細胞的基礎上加入紅細胞添加液,降低了紅細胞的粘稠度使輸注時更加

7、順利,全部操作在密閉條件下完成。 3.用途： 與濃縮紅細胞相同。 4.輸入劑量及方法： 與濃縮紅細胞相同。,懸浮少白細胞紅細胞,1.制備方法： ?。?）離心去白膜法：先按制備濃縮紅細胞的程序離心，然后將紅細胞與血漿交界 處的白膜層與血漿一起擠出。 （2）過濾法：過濾的方式基本上分為以下三種：一個是血液采集后24小時內(nèi)過濾，我們稱為貯存前過濾；另一個是

8、血液輸注前先過濾；第三種是在輸血時過濾；后兩種都可以稱為保存后過濾。（研究數(shù)據(jù)表明最好的過濾時機應該是血液貯存前，它不但可以減除白細胞的數(shù)量，還可以防止由于細胞因子和炎性因子應起的發(fā)熱反應。） 2.少白細胞紅細胞的特點： 　 它是在濃縮紅細胞或懸浮紅細胞的基礎上去除絕大部分的白細胞從而降低了由白細胞引起的免疫性輸血反應和疾病的傳播。用過濾法制備的少白細胞紅細胞殘存白細胞數(shù)量≤2.5×106/200ml全血。 3.用途：

9、?。?）該成分適用于各類需要輸注紅細胞的病人； 　 （2）特別適合于已有白細胞抗體的病人、骨髓移植和器官移植的病人,洗滌紅細胞,1.洗滌紅細胞的特點： 　洗滌紅細胞是在少白細胞紅細胞的基礎上用無菌生理鹽水反復洗滌三遍以上制備而成。經(jīng)過洗滌的紅細胞去除了80％以上的白細胞和98％的血漿蛋白，也去除了大量的細胞碎屑、代謝產(chǎn)物、抗凝劑、乳酸鹽、鉀、氨和微聚物，同時也損失了大約20％以上的紅細胞。 2.適應證：

10、 （1）該成分適用于各類需要輸注紅細胞的病人； 　 （2）更適合于對血漿蛋白有嚴重過敏反應的病人； 　 （3）自身免疫性溶血性貧血； 　 （4）陣發(fā)性血紅蛋白尿； 　 （5）高血鉀癥及肝腎功能障礙者以及新生兒換血等。 3.注意事項： （1）開放制備的洗滌紅細胞應在制備后24小時內(nèi)輸注。 （2）由于該成分內(nèi)已基本不含抗A抗B抗體，輸注前可只做主側(cè)配血。 （

11、3）輸注劑量要比濃縮紅細胞增加30％左右。,冰凍解凍去甘油紅細胞,紅細胞加入甘油保護劑后，在－80或－196 ℃低溫條件下保存，最長保存期可達10年。使用前將貯存的紅細胞放在37℃水浴中解凍,然后洗凈甘油，再用生理鹽水懸浮，24小時內(nèi)輸注。 　　該成分主要用于稀有血型血液的貯存也可用于自體血液的長期貯存。 該成分內(nèi)也基本不含抗A抗B抗體，輸注前可只做主側(cè)配血。在輸注劑量上應考慮到紅細胞損失部分。,濃縮血小板,1

12、.制備方法： 先使用多聯(lián)采血袋采集全血,然后6～8小時內(nèi)在20～24 ℃的條件下，用大容量的離心機將血小板分離出，并懸浮在血漿內(nèi)制成濃縮血小板。 200ml全血制備的血小板含量是 ≥2.0×1010，容量為25～35ml。2.用途： 濃縮血小板在臨床上主要用于止血或預防出血。 ⑴血小板數(shù)量減少如：白血病、再生障礙性貧血、

13、惡性腫瘤、特發(fā)性血小板減少性紫癜、多發(fā)性骨髓瘤、感染、化療或放療后、大量輸注庫存血等； ⑵血小板功能障礙而如：血小板無力癥、藥物（阿斯匹林類）、白血病、DIC、尿毒癥、 發(fā)熱、感染以及創(chuàng)傷和手術病人等。3.注意事項： ⑴患有血栓性血小板減少性紫癜（TTP）患者不易輸血小板。 ⑵血小板在輸注時無需交叉配血 ,要求ABO血型相同輸注。,新鮮冰凍血漿 （FFP）,1.制備

14、方法： 血液采集后6 ~ 8小時內(nèi)將血漿分離出，并在-30 ℃以下，用具有風冷裝置的速凍冰箱或在酒精浴中速凍而制成，也可用-196 ℃液氮快速凍結。 2.特點： FFP中幾乎含有血漿中的全部蛋白成分和凝血因子,包括不穩(wěn)定的第V因子和第Ⅷ因子。 未經(jīng)特殊處理的血漿中還含有各種抗體和一些致病物質(zhì)，如肝炎病毒。1ml新鮮正常人血漿大約含有1單位的凝血因子活性

15、。 新鮮冰凍血漿在-18 ℃以下可以保存1年。 3.用途： 它主要用于各種凝血因子缺乏引起的出血，同時需要補充血容量或血漿蛋白的患者：肝衰竭伴獲得性凝血障礙者；肝移植；口服香豆素類藥物過量引起出血者；抗凝血酶III缺乏；血栓性血小板減少性紫癜（TTP）；免疫缺陷綜合征等。 4.血漿輸注劑量: 每公斤體重10~15ml,可使大多數(shù)凝血因子提高到

16、正常人的25％以上，并可達到止血效果，劑量過大可造成循環(huán)超負荷。輸注速度一般不超過10ml/min。 5.注意事項： 應按ABO血型相容原則輸注，不需做交叉配血。,普通冰凍血漿,新鮮冰凍血漿保存一年以上，或制備新鮮冰凍血漿冷沉淀后所剩余的血漿以及全血在有效期內(nèi)分離出的血漿統(tǒng)稱為普通血漿。 它主要特點是缺乏凝血因子V和凝血因子Ⅷ。可以在-18 ℃以下繼續(xù)保存5年。普通冰凍血漿主

17、要用于凝血因子V和凝血因子Ⅷ以外的凝血因子缺乏的患者。,輸成分血的好處,輸成分血有以下幾點好處： 1. 對病情需要選擇，缺什么輸什么，提高治療效果。如：貧血輸紅細胞，粒細胞缺乏輸粒細胞、血小板減少輸濃縮血小板，燒傷患者輸血漿等。  　　2. 減少輸血不良反應，提高輸血安全性。因為輸入不需要的血液成分不僅是浪費，而且可引發(fā)輸血不良反應。  　　3. 便于保存，使用方便。不同的血液成分可以有不

18、同的保存方式，長期的如新鮮冰凍血漿、冷沉淀物可以保存1年；短期的如血小板在22C震蕩箱內(nèi)保存3～5天隨時可用。  　　4. 一血多用，節(jié)省血源。血液來自健康人的無私貢獻，是寶貴的資源，將一袋血分成各種成分就可派多種用途，治療多個患者。如某市每年獻血35萬單位，而制成成分血即有70～100萬單位。  　　5. 減少輸血傳染病。由于血液中一些致病因子多藏在白細胞、冷沉淀和凝血因子等制品中，大多數(shù)輸血患者并不需要這些成

19、分。,二、血液成分分離的方法,血液成分分離的方法,,全血,,全血分層,,血漿紅細胞血小板白細胞,離心機,分漿夾/血液成分分離機,多聯(lián)袋,多聯(lián)袋,血液成分分離機,①,②,③,④,⑤,三聯(lián)袋血分離流程示意圖,,,,,,,,,,,X,X,,,,,,,,,,,X,X,,,,,,,,,,,,,X,,,,,,,,,,,,,X,X,,①,③,⑤,離心,分血漿,保養(yǎng)液到原袋,X,X,X,四聯(lián)袋血成分分離,,,,,,,,,,,X,X,X,,,,,,

20、,,,,,X,X,,,,,①,②,③,離心,分血漿,清洗白膜,,X,⑤,,,X,,X,,,,,,,,,,,X,,,X,,,,X,,,,,,,,,,,X,,,X,,,X,,,,,,,,,X,X,,X,,,,將保養(yǎng)液擠回母袋,X,,,,多聯(lián)袋血-紅細胞和冰凍血漿的制備,1）第1次重離心后將盡可能多的血漿轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細胞保存液袋內(nèi)的紅細胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細胞袋，充分混合即為懸浮紅細胞； 3）核對血袋上的獻血條形碼，如

21、一致則熱合斷離，生成1袋懸浮紅細胞和1袋血漿； 4）血漿紅細胞混入量少（目視觀察）即可將血漿袋熱合斷離； 5）如血漿紅細胞混入量較多，應當經(jīng)過第2次重離心后，把上清血漿轉(zhuǎn)移至已移空的紅細胞保存液袋，熱合斷離（如欲制備冷沉淀，則不熱合斷離）； 6）將血漿速凍，低溫保存。,紅細胞和冰凍血漿的制備,,全 血,,,,,紅細胞,,,懸浮紅細胞,,,冰凍血漿,,重離心,成分分離機或分漿夾成分分離,,保養(yǎng)液,,加保養(yǎng)液,,血漿

22、,目視紅細胞較少，速凍,目視紅細胞較多，重離心,,,,,,,紅細胞沉淀,,丟棄,,(保養(yǎng)液空袋),,成分分離,血漿,,,冰凍血漿,速凍,紅細胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備——富血小板血漿法,1）第1次輕離心(280g)后將富含血小板血漿轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細胞保存液袋內(nèi)的紅細胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細胞袋； 3）核對血袋上的獻血條形碼，如一致則熱合斷離，生成1袋懸浮紅細胞和1袋富血小板血漿； 4）將富含血小板血漿袋

23、重離心（2100g），上清為血漿，沉淀物為血小板； 5）留取適量血漿，將多余的血漿轉(zhuǎn)移至已經(jīng)移空的紅細胞保存液袋，熱合斷離，生成1袋濃縮血小板和1袋血漿；6）將血漿袋速凍，低溫保存； 7）將濃縮血小板袋在室溫靜置1～2小時，待自然解聚后，輕輕均勻血袋，制成濃縮血小板混懸液，在22±2℃的環(huán)境下振蕩保存。,紅細胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備——富血小板血漿法,,全 血,,,,,紅細胞,,,懸浮紅細胞,,輕離心,

24、成分分離機或分漿夾成分分離,,保養(yǎng)液,,加保養(yǎng)液,重離心,,富血小板血漿,,,,上層血漿，下層血小板沉淀,,血漿,,(保養(yǎng)液空袋),,,冰凍血漿,,低溫保存,速凍,,,濃縮血小板,大部分血漿,少量血漿+血小板,成分分離,,濃縮血小板懸浮液,,室溫靜置1～2小時，自然解聚,,,22±2℃的環(huán)境下振蕩保存,,,紅細胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備——白膜法,1）第1次重離心后，將血漿轉(zhuǎn)移至第1個轉(zhuǎn)移袋，將適量血漿及白膜層轉(zhuǎn)移至第2

25、個轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細胞保存液袋內(nèi)的紅細胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細胞袋，充分混合即為懸浮紅細胞； 3）核對血袋上的獻血條形碼，如一致則熱合斷離懸浮紅細胞袋和血漿袋； 4）將白膜成分袋和1個空袋一起進行輕離心，將富含血小板血漿（上層）轉(zhuǎn)移至空袋，制成濃縮血小板，熱合斷離，棄去白細胞袋。,紅細胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備——白膜法,,全 血,,,,,紅細胞,,,懸浮紅細胞,,重離心,成分分離機或分漿夾成分分離,,富血小板

26、血漿,,,上層血漿，下層血小板沉淀,,,白膜,,,,保養(yǎng)液,,加保養(yǎng)液,輕離心,,富血小板血漿,,,血漿,,(保養(yǎng)液空袋),,,冰凍血漿,,低溫保存,速凍,,,濃縮血小板,大部分血漿,少量血漿+血小板,成分分離,,濃縮血小板懸浮液,,室溫靜置1～2小時，自然解聚,,,22±2℃的環(huán)境下振蕩保存,,,,丟棄,三、相關技術簡介,冷沉淀凝血因子制備 ——離心法,⑴取出待制備冷沉淀的新鮮冰凍血漿，置4±2℃冰箱中過夜融化或

27、在4±2℃水浴裝置中融化。 ⑵當血漿基本融化時，取出血漿，在4±2℃的環(huán)境下重離心。 ⑶將大部分上層血漿移至空袋，制成冰凍血漿。將留下的20～30ml血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。,冷沉淀凝血因子制備 ——虹吸法,⑴將新鮮冰凍血漿袋置于4±2℃水浴裝置中，另一空袋懸于水浴箱外，位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的高度落差。 ⑵血漿融化后，隨時被虹吸至空袋中，當融化至剩下40～50

28、ml血漿與沉淀物時，閉合導管，阻斷虹吸。將血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。將冰凍血漿袋和冷沉淀凝血因子袋熱合斷離。,虹吸,洗滌紅細胞制備,⑴ 待用洗滌溶液聯(lián)袋提前放置冷藏保存，無破損滲漏，溶液外觀正常，在有效期內(nèi)。 ⑵ 將合格的紅細胞懸液用作制備洗滌紅細胞懸液的起始血液，無破損滲漏，血液外觀正常，在有效期內(nèi)。 ⑶ 使用無菌接合機將待洗滌的紅細胞懸液袋導管和洗滌溶液聯(lián)袋進行無菌接合連通。 ⑷ 將洗

29、滌溶液移至紅細胞袋內(nèi)，液體量約為100ml/單位，夾緊導管，混勻。 ⑸ 按照制備紅細胞的離心程序進行離心操作。 ⑹ 離心后將血袋取出，避免震蕩，垂直放入分漿夾中，把上清液轉(zhuǎn)移至空袋內(nèi)，夾緊導管。 ⑺ 重復⑷ ～ ⑹步驟，洗滌3次。 ⑻ 將適量（50 ml/單位）保存液（生理鹽水或紅細胞保存液）移入已完成洗滌的紅細胞，混勻。 ⑼ 熱合，貼簽，入庫。 ⑽ 如果是在開放環(huán)

30、境制備，應嚴格遵從無菌操作。 ⑾ 如果在開放環(huán)境制備或最后以生理鹽水混懸，洗滌紅細胞保存期為24小時。如果是在閉合無菌環(huán)境中制備且最后以紅細胞保存液混懸，洗滌紅細胞保存期與洗滌前的紅細胞懸液相同。,去除白細胞,⑴ 使用白細胞過濾技術去除全血或紅細胞懸液中的白細胞。 ⑵ 根據(jù)白細胞過濾器生產(chǎn)方說明書的要求進行過濾操作。 ⑶ 應當在密閉環(huán)境（使用白細胞過濾多聯(lián)血袋或無菌接合技術）制備。 ⑷ 應當在采

31、血后2天內(nèi)（采血次日為第1天）完成白細胞過濾。 ⑸ 檢查待濾過血液的外觀，并充分混勻后進行過濾。 ⑹ 如果在進行白細胞過濾操作前，血液已經(jīng)處于保存溫度（4 ±2℃），需要在室溫進行過濾時，室溫應≤26℃，而且應當盡快放回至既定保存溫度的環(huán)境中，從取出到放回的時間應＜3小時。 ⑺ 如果在白細胞過濾后，將血液轉(zhuǎn)移至不屬于原聯(lián)體血袋的其他血袋，應當建立與實施標識控制機制，保證過濾后血液的正確標識。,

32、去除白細胞,冰凍紅細胞,紅細胞甘油化 ⑴取擬冰凍保存的全血或懸浮紅細胞，離心去除上清液，用無菌接合技術將紅細胞轉(zhuǎn)移至容量適當?shù)摹⑦m宜于冰凍保存的轉(zhuǎn)移袋內(nèi)。 ⑵在無菌條件下，緩慢滴加復方甘油溶液至紅細胞袋內(nèi)，邊加邊振蕩，使其充分混勻。 ⑶在室溫中靜置平衡30 min，置-65℃以下保存。冰凍紅細胞的解凍 ⑴從低溫冷凍保存箱中取出冰凍紅細胞，立即放入37℃～40℃恒溫水浴箱中，輕輕振動使其快速融化，

33、直至冰凍紅細胞完全解凍。洗滌除去甘油 ⑴將專用洗滌鹽液袋與解凍紅細胞袋無菌接合，采取滲透壓梯度遞減方法洗滌。最后1次的洗滌上清液應無明顯溶血跡象。 ⑵使用自動化設備制備冰凍和解凍紅細胞時，按照設備使用說明書進行操作。,血漿病毒滅活 ——亞甲藍光化學法,⑴根據(jù)設備操作說明書設置醫(yī)用血漿病毒滅活光照柜的參數(shù)。⑵根據(jù)血漿的規(guī)格選擇相應病毒滅活血袋。⑶用無菌導管連接設備或百級凈化臺內(nèi)按無菌操作技術將血漿袋與病毒

34、滅活血袋連接。⑷將血袋懸掛于支架上，打開導管夾，使血漿經(jīng)“亞甲藍添加元件”，流入光照袋。⑸在醫(yī)用血漿病毒滅活光照柜中進行光照。⑹光照處理后的血漿經(jīng)病毒滅活裝置配套用輸血過濾器過濾，濾除亞甲藍和絕大部分白細胞，即得病毒滅活血漿。,血漿病毒滅活 ——亞甲藍光化學法,血液輻照,⑴ 輻照室應符合《電離輻射防護與輻射源安全基本標準》的要求。⑵ 按照輻照儀使用說明書設置輻照參數(shù)。⑶ 血液輻照最低劑量為25 Gy，血液任何位點的輻照劑量不