實驗三寄生蟲學(xué)糞便檢查法三

1、本次實驗的意義：,學(xué)習(xí)蟲卵計數(shù)法的操作技術(shù)，對于我們判定宿主感染寄生蟲病的強度，或者檢驗驅(qū)蟲藥使用后的效果如何，都有著重要的參考價值。,1、寄生蟲排卵有一定的規(guī)律性，因此，宿主所排出的糞便中蟲卵的含量就會有所很大差異，而且蟲卵在同一個糞樣中，分布也是不均勻的；2、糞便的濃稠程度的不同，蟲卵的含量也會不同。如果要想獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，不僅要克服主觀上的不足外，還要將被檢宿主在24小時內(nèi)所排出的糞便全部收集起來，經(jīng)充分混合均勻后，稱量好

2、總量，按一定的比例來稱取糞樣，通過換算后，得出的結(jié)果才是較為準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。,實驗內(nèi)容：,1、蟲卵計數(shù)法：（只適用于線蟲卵和球蟲卵囊）　（1）簡易計數(shù)法：?。?）斯陶爾法；（3）麥克馬斯特計數(shù)法。2、線蟲幼蟲檢查法：（1）線蟲幼蟲的培養(yǎng)方法；?。?）溫水引誘法；（3）毛蚴孵化法：,四、操作方法,1、蟲卵計數(shù)法：（1）、簡易計數(shù)法：取糞樣（1g）＿加清水（10－15倍）＿攪拌均勻＿過濾＿靜置（30－40分鐘）＿倒去上清液＿再

3、加飽和鹽水＿混勻＿倒入青霉素瓶＿用吸管加滿并使之凸出瓶口＿加上蓋玻片＿靜置（20－30分鐘）＿垂直取下蓋玻片＿鏡檢＿并蓋上另一塊蓋玻片（一般要檢三片以上）。,用吸管將糞液加滿并使之凸出瓶口,（2）、麥克馬斯特計數(shù)法；麥克馬斯特計數(shù)板的規(guī)格：它由兩塊玻片所組成，其間隔距離為1.5mm，上面的蓋玻片上一般有1－2個1 平方厘米的方格，每個計數(shù)室的體積為o.15立方厘米，容量為o.15ml。,1.5mm,1.5mm,,麥克馬斯特計數(shù)板,原理

4、:,由于計數(shù)室內(nèi)充滿了用漂浮液制成的糞液，因此，在計數(shù)室內(nèi)體積小、比重輕的蟲卵漂浮在上面，而糞渣則沉于下面，當(dāng)視野感覺模糊時往往所看到的是該室的底部沉渣，當(dāng)清晰見到上面的線條時，才能找到蟲卵，由于有線條的規(guī)范，有效地防止了漏檢或重檢。,麥克馬斯特操作方法：取樣（2g）＿加飽和鹽水（58ml）＿充分混勻＿過濾＿混勻后立即用吸管注入計數(shù)室內(nèi)＿靜置（1－2分鐘）＿鏡檢。計算公式：每克糞便中的蟲卵數(shù)＝全部計數(shù)室的蟲卵總數(shù)/計數(shù)室的個數(shù)&#

5、215;200,2、線蟲幼蟲的檢查法：,方法：在平皿中墊上一層吸水紙--將含有蟲卵的糞便（混勻）--放入平皿中（如糞便太干燥時灑適量的水，如太濕時應(yīng)灑適量的炭末）--塑成半球狀（壓平并略高出平皿口）--放入恒溫箱內(nèi)（25－30℃，夏天可放在室內(nèi)，根據(jù)情況可適當(dāng)灑點水，以保持吸水紙的潮濕度）--經(jīng)過7－10天的時間--就會發(fā)育成第三期幼蟲。,觀察:,線蟲的種類很多而它們排出的蟲卵，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和大小上極為相似，因此，以蟲卵來鑒別線蟲的種類

6、是較困難的，只有通過培養(yǎng)出第三期幼蟲（即具有感染力的幼蟲），才能根據(jù)幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)來進(jìn)行鑒定。,（2）、溫水引誘法：,A、貝爾曼法：該方法檢出率高，適用于檢查各種線蟲的幼蟲，包括土壤、飼料和器官內(nèi)的幼蟲檢查。貝爾曼分離器裝制：用一個直徑為10－15cm的漏斗，下接一條10－15cm長的膠管，再接一個沉淀管，并準(zhǔn)備一個止水夾和銅濾篩。,,試管,膠管,漏斗,濾篩,操作方法：,取培養(yǎng)好的糞樣（10－20g）＿用兩層紗布包扎好＿置于漏斗中的

7、銅篩中＿沿漏斗邊緣加入37－40℃的溫水（以淹蓋糞樣為佳）＿靜置（1－2小時）＿夾好止水夾＿取下沉淀管＿吸去上清液＿取沉渣鏡檢。如果沒有沉淀管時，在加溫水之前應(yīng)夾好止水夾，靜置（1－2小時）后，收集下面一部分水，進(jìn)行離心后取沉渣鏡檢。,B、平皿幼蟲分離法：取培養(yǎng)好的糞樣1－2g＿放入平皿中＿加40℃的溫水（以浸沒糞便為宜）＿靜置（5－10′）＿去糞便＿鏡檢平皿中的液體。 C、直接檢查法： 取少量培養(yǎng)好的糞樣＿置于載玻片上＿滴清水