實(shí)驗(yàn)三寄生蟲(chóng)學(xué)糞便檢查法三

1、本次實(shí)驗(yàn)的意義：,學(xué)習(xí)蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法的操作技術(shù)，對(duì)于我們判定宿主感染寄生蟲(chóng)病的強(qiáng)度，或者檢驗(yàn)驅(qū)蟲(chóng)藥使用后的效果如何，都有著重要的參考價(jià)值。,1、寄生蟲(chóng)排卵有一定的規(guī)律性，因此，宿主所排出的糞便中蟲(chóng)卵的含量就會(huì)有所很大差異，而且蟲(chóng)卵在同一個(gè)糞樣中，分布也是不均勻的；2、糞便的濃稠程度的不同，蟲(chóng)卵的含量也會(huì)不同。如果要想獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，不僅要克服主觀上的不足外，還要將被檢宿主在24小時(shí)內(nèi)所排出的糞便全部收集起來(lái)，經(jīng)充分混合均勻后，稱量好

2、總量，按一定的比例來(lái)稱取糞樣，通過(guò)換算后，得出的結(jié)果才是較為準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：,1、蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法：（只適用于線蟲(chóng)卵和球蟲(chóng)卵囊）?。?）簡(jiǎn)易計(jì)數(shù)法：?。?）斯陶爾法；（3）麥克馬斯特計(jì)數(shù)法。2、線蟲(chóng)幼蟲(chóng)檢查法：（1）線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的培養(yǎng)方法；　（2）溫水引誘法；（3）毛蚴孵化法：,四、操作方法,1、蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法：（1）、簡(jiǎn)易計(jì)數(shù)法：取糞樣（1g）＿加清水（10－15倍）＿攪拌均勻＿過(guò)濾＿靜置（30－40分鐘）＿倒去上清液＿再

3、加飽和鹽水＿混勻＿倒入青霉素瓶＿用吸管加滿并使之凸出瓶口＿加上蓋玻片＿靜置（20－30分鐘）＿垂直取下蓋玻片＿鏡檢＿并蓋上另一塊蓋玻片（一般要檢三片以上）。,用吸管將糞液加滿并使之凸出瓶口,（2）、麥克馬斯特計(jì)數(shù)法；麥克馬斯特計(jì)數(shù)板的規(guī)格：它由兩塊玻片所組成，其間隔距離為1.5mm，上面的蓋玻片上一般有1－2個(gè)1 平方厘米的方格，每個(gè)計(jì)數(shù)室的體積為o.15立方厘米，容量為o.15ml。,1.5mm,1.5mm,,麥克馬斯特計(jì)數(shù)板,原理

4、:,由于計(jì)數(shù)室內(nèi)充滿了用漂浮液制成的糞液，因此，在計(jì)數(shù)室內(nèi)體積小、比重輕的蟲(chóng)卵漂浮在上面，而糞渣則沉于下面，當(dāng)視野感覺(jué)模糊時(shí)往往所看到的是該室的底部沉渣，當(dāng)清晰見(jiàn)到上面的線條時(shí)，才能找到蟲(chóng)卵，由于有線條的規(guī)范，有效地防止了漏檢或重檢。,麥克馬斯特操作方法：取樣（2g）＿加飽和鹽水（58ml）＿充分混勻＿過(guò)濾＿混勻后立即用吸管注入計(jì)數(shù)室內(nèi)＿靜置（1－2分鐘）＿鏡檢。計(jì)算公式：每克糞便中的蟲(chóng)卵數(shù)＝全部計(jì)數(shù)室的蟲(chóng)卵總數(shù)/計(jì)數(shù)室的個(gè)數(shù)&#

5、215;200,2、線蟲(chóng)幼蟲(chóng)的檢查法：,方法：在平皿中墊上一層吸水紙--將含有蟲(chóng)卵的糞便（混勻）--放入平皿中（如糞便太干燥時(shí)灑適量的水，如太濕時(shí)應(yīng)灑適量的炭末）--塑成半球狀（壓平并略高出平皿口）--放入恒溫箱內(nèi)（25－30℃，夏天可放在室內(nèi)，根據(jù)情況可適當(dāng)灑點(diǎn)水，以保持吸水紙的潮濕度）--經(jīng)過(guò)7－10天的時(shí)間--就會(huì)發(fā)育成第三期幼蟲(chóng)。,觀察:,線蟲(chóng)的種類很多而它們排出的蟲(chóng)卵，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和大小上極為相似，因此，以蟲(chóng)卵來(lái)鑒別線蟲(chóng)的種類

6、是較困難的，只有通過(guò)培養(yǎng)出第三期幼蟲(chóng)（即具有感染力的幼蟲(chóng)），才能根據(jù)幼蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)來(lái)進(jìn)行鑒定。,（2）、溫水引誘法：,A、貝爾曼法：該方法檢出率高，適用于檢查各種線蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，包括土壤、飼料和器官內(nèi)的幼蟲(chóng)檢查。貝爾曼分離器裝制：用一個(gè)直徑為10－15cm的漏斗，下接一條10－15cm長(zhǎng)的膠管，再接一個(gè)沉淀管，并準(zhǔn)備一個(gè)止水夾和銅濾篩。,,試管,膠管,漏斗,濾篩,操作方法：,取培養(yǎng)好的糞樣（10－20g）＿用兩層紗布包扎好＿置于漏斗中的

7、銅篩中＿沿漏斗邊緣加入37－40℃的溫水（以淹蓋糞樣為佳）＿靜置（1－2小時(shí)）＿夾好止水夾＿取下沉淀管＿吸去上清液＿取沉渣鏡檢。如果沒(méi)有沉淀管時(shí)，在加溫水之前應(yīng)夾好止水夾，靜置（1－2小時(shí)）后，收集下面一部分水，進(jìn)行離心后取沉渣鏡檢。,B、平皿幼蟲(chóng)分離法：取培養(yǎng)好的糞樣1－2g＿放入平皿中＿加40℃的溫水（以浸沒(méi)糞便為宜）＿靜置（5－10′）＿去糞便＿鏡檢平皿中的液體。 C、直接檢查法： 取少量培養(yǎng)好的糞樣＿置于載玻片上＿滴清水