某些因素對離體蛙心心臟活動的影響實驗報告

1、離體蛙心灌流及某些離子、藥物對離體蛙心活動的影響,(perfusion of frog’s heart),主要內(nèi)容,相關(guān)理論知識實驗部分實驗?zāi)康膶嶒瀸ο髮嶒瀮x器與藥品實驗步驟結(jié)果分析與討論,相關(guān)理論知識,正常的蛙心能按靜脈竇的節(jié)律性自動產(chǎn)生興奮，心臟的自動節(jié)律性活動，需要有一個合適的理化環(huán)境。 蟾蜍心臟離體后，用任氏液灌流，在一定時間內(nèi)仍能保持節(jié)律性興奮和收縮活動。由于心臟的正常活動還有賴于內(nèi)環(huán)境因素的相對穩(wěn)定，改

2、變灌流液的成分可引起心臟活動的改變。,相關(guān)理論知識,心肌細胞的生理特性表現(xiàn)為：自動節(jié)律性、興奮性、傳導性和收縮性。 心肌細胞外離子濃度的變化和因體內(nèi)生物活性物質(zhì)（如激素）引起的細胞膜離子通透性的改變，對心肌細胞的生物電活動和生理特性必然會產(chǎn)生明顯的影響。,影響心肌細胞電生理特性的原因,1.心肌的自動節(jié)律性（1）最大復極電位與閾電位的差距（2）4期自動除極速度,2.心肌的興奮性（1）靜息電位水平：依賴于細胞外K+濃

3、度（2）Na+通道的性狀,相關(guān)理論知識,3.心肌的傳導性主要取決于動作電位0期除極速度和幅度,4.心肌的收縮性依賴于細胞外鈣離子濃度,相關(guān)理論知識,影響心肌細胞電生理特性的原因,相關(guān)理論知識,離子對心臟活動的影響,鉀離子K+參與心肌細胞的復極化和自律細胞的4期自動去極化過程，其改變不僅取決于細胞內(nèi)外K+濃度梯度，還與細胞膜對K+通透性有關(guān)，因此其影響是多方面的,相關(guān)理論知識,離子對心臟活動的影響鈣離子 Ca2+對N

4、a+內(nèi)流存在競爭抑制作用，稱膜屏障作用，對靜息電位無影響。 [Ca2+]o ↑，可使心肌細胞的興奮性降低，傳導減慢，收縮力增強。,相關(guān)理論知識,迷走神經(jīng)和乙酰膽堿 迷走神經(jīng)興奮時，節(jié)后纖維釋放Ach,激動心肌細胞膜上M型膽堿受體，產(chǎn)生負性變力、負性傳導、負性變時等效應(yīng)。心交感神經(jīng)與去甲腎上腺素 心交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放的遞質(zhì)是去甲腎上腺素，激動心肌細胞膜上的ß受體，產(chǎn)生正性變力、正性傳導、正性變時

5、等效應(yīng)。,實驗?zāi)康?.本實驗的目的是學習離體蛙心的灌流方法。2.用離體蛙心灌流的方法觀察：,實驗對象 蟾蜍,實驗儀器設(shè)備RM6240生物采集系統(tǒng)張力換能器蛙類手術(shù)器械蛙心插管試管夾縫合線蛙心夾鐵支架滴管,實驗藥品任氏液l％KCl 3％CaC12l：10,000 El：10,000 ACh3％乳酸2.5％NaHCO3,實驗步驟,一、離體蟾蜍心臟標本制備 1.破壞腦和脊髓 2.暴露心臟,一、離體

6、蟾蜍心臟標本制備1.觀察心臟的解剖結(jié)構(gòu),實驗步驟,（腹面）,（背面）,實驗步驟一、離體蟾蜍心臟標本制備,1.蛙心插管1.1 在主A干下穿一線打一松結(jié)；在左主A下再穿一線結(jié)扎。,實驗步驟一、離體蟾蜍心臟標本制備,1.蛙心插管1.2 在主動脈根部剪一斜口，將插管插入動脈圓錐， 在心室收縮時將插管插入心室，結(jié)扎固定。,1.用試管夾將蛙心管固定在鐵支架上2.把張力換能器固定鐵支架支臺上，在心室舒張期將與換能器相連的蛙

7、心夾夾在心尖上。,實驗步驟二、連接儀器和裝置,注意事項,1.蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時，必須用任氏液沖洗3次。2.每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立即將插管內(nèi)液體吸出。3.隨時滴加任氏液于心臟表面使之保持濕潤。4.換能器頭端應(yīng)向下傾斜以免液體進人換能器。5.各種試劑的滴管不要混淆,以免影響實驗結(jié)果。,觀察項目,一、描記正常心搏曲線,曲線幅度 —— 收縮的程度曲線疏密 —— 心率曲線基線 —— 舒張的程度,二、觀察

8、離子、藥物和酸堿的影響1)更換任氏液為3%氯化鈣溶液1～2滴，記錄心率和收縮幅度，沖洗（下同）2)滴加1～2滴1%氯化鉀溶液3)滴加1～2滴1：10000去甲腎上腺素溶液4)滴加1～2滴1：10000腎上腺素溶液5)滴加1～2滴1：10000 乙酰膽堿溶液6)滴加1～2滴 2.5%碳酸氫鈉溶液7)滴加1～2滴3%乳酸溶液,觀察項目,實驗結(jié)果,結(jié)果分析與討論,1.任氏液：正常對照2. 3%CaCl2灌流：,結(jié)果分析與討論

9、,3. 1%KCl灌流：,結(jié)果分析與討論,4. 1:10000 E灌流,4期 If 、I CaT通道↑,4期自動去極速度↑,,,自律性↑,,心率↑,與心肌β1受體結(jié)合,Ca2+內(nèi)流↑肌漿網(wǎng)釋放Ca2+↑,興奮-收縮耦聯(lián)↑,收縮力↑,,,cAMP,,,,,結(jié)果分析與討論,5. 1:10000 Ach灌流,,與心肌M受體結(jié)合,,,K+外流↑, Ca2+內(nèi)流↓,E-C耦聯(lián)↓,,收縮力↓,,最大復極電位↑ 4期K+外流↑,自律性↓,心率↓,