腎素檢測的最新發(fā)展情況

1、腎素檢測的最新發(fā)展情況,,幾個問題,為什么傳統(tǒng)上腎素檢測活性？為什么現(xiàn)在腎素要變?yōu)闇y濃度？,腎素前體由406個氨基酸組成，其中包含兩個前片段，分別為20和46個氨基酸。成熟的腎素包含340個氨基酸，分子量為37KD。,腎素,腎素原，腎素與活性腎素的異同腎素活性與活性腎素的區(qū)別活性腎素在體內(nèi)的意義,腎素檢測的幾個基本概念,,,,,,無活性的腎素原,有活性的腎素原,腎素,,腎素原,,活性腎素,傳統(tǒng)腎素檢測試劑——腎素活性檢測,試

2、劑盒組分：抗Ang I多抗包被管125I標記的Ang I 校準品（6個）質(zhì)控品酶抑制劑洗液,檢測步驟,Ang I 轉(zhuǎn)化將預(yù)冷的200ul酶抑制劑加入200ul血漿樣本中，混合均勻后，分為兩份，分別置于冰水浴和37度中孵育1小時，孵育后將37度的樣本置于冰水浴中迅速冷卻備用。,,,腎素檢測-PRA vs PRC,腎素檢測-PRA vs PRC,血管緊張素原,腎素,血管緊張素I,,,,降解片段,,血管緊張素II,血管緊張素原酶

3、,,微生物污染,,血管緊張素轉(zhuǎn)化酶,,目前PRA檢測存在的問題各實驗室之間差異較大，無法標準化操作復(fù)雜，重復(fù)性差，結(jié)果無互通性除此之外無國際標準品可參照體外的孵育條件和體內(nèi)狀態(tài)差異較大加入酶抑制劑放置血管緊張素I降解,腎素檢測-PRA vs PRC,PRA帶給臨床最大的困擾,重復(fù)性差周期長依賴外送,如何做到活性腎素的檢測？關(guān)鍵在于那一個關(guān)鍵的抗體。,,,關(guān)鍵抗體,,一般的腎素抗體,,腎素檢測-PRA vs PRC,

4、腎素檢測-PRA vs PRC,Perschel et al. Clin Chem. 2004,美國內(nèi)分泌學會原醛癥指南,該指南同時推薦了腎素活性和濃度應(yīng)用于ARR實驗，同時給出了基于美國人群的不同方法學ARR的cut-off值,美國Quest實驗室集團腎素濃度檢測（Renin, Direct），使用化學發(fā)光法檢測濃度，當天反饋結(jié)果，85%。腎素活性檢測放棄了RIA法，改用LC-MS法，一周后出結(jié)果，15%。,美國目前腎素檢測的

5、應(yīng)用,安圖PRC和Aldosterone診斷效力研究,中山大學附屬第一醫(yī)院--曹教授,放免RIA 與化學發(fā)光CLIA測醛固酮濃度呈正相關(guān)（r=0.967）,放免RIA 腎素活性與化學發(fā)光CLIA腎素濃度呈正相關(guān)（r=0.905）,放免RIA法醛固酮腎素活性比值 ARR以30為切點，靈敏度為90.2% ，特異度為92.6% ；化學發(fā)光CLIA法 醛固酮腎素濃度比值A(chǔ)ARR以25為切點，靈敏度為95.1%，特異度為83.3%；兩種方法檢