胡付品不常見藥敏結(jié)果閱讀_第1頁
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1、不常見細(xì)菌耐藥表型結(jié)果探討,胡付品華山醫(yī)院抗生素研究所,藥物敏感性試驗(yàn)方法,稀釋法試管稀釋法(肉湯稀釋法)平板稀釋法(瓊脂稀釋法)微量肉湯稀釋法擴(kuò)散法(紙片法)Kirby-bauer(K-B)法E-test自動(dòng)化儀器,紙片擴(kuò)散法,原理:將浸有抗菌藥物的紙片貼在涂有細(xì)菌的瓊脂平板上,抗菌藥物在瓊脂內(nèi)向四周擴(kuò)散,因此敏感細(xì)菌在紙片周圍一定距離內(nèi)的生長(zhǎng)受到抑制。,如何制備菌懸液?,正確測(cè)量苯唑西林、萬古霉素和利奈唑胺對(duì)葡萄球菌

2、;以及萬古霉素對(duì)腸球菌的抑菌圈直徑,透射光,反射光,,,不要用反射光,要使用透射光,,大腸埃希菌污染腸球菌;菌落再次純分,銅綠假單胞菌有耐藥菌落,抑菌圈內(nèi)有菌落,怎么辦?,,第1問:如何解釋阿米卡星對(duì)大腸埃希菌的抑菌現(xiàn)象?,阿米卡星,厄他培南,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,,藥物:青霉素G細(xì)菌:β-溶血性鏈球菌,矛盾的現(xiàn)象 (Eagle現(xiàn)象),指抗菌藥物在高濃度的時(shí)候反而降低殺菌活性這種

3、現(xiàn)象第一次由Eagle和Musselman兩位科學(xué)家發(fā)現(xiàn)并報(bào)道。青霉素類抗菌藥物在作用于葡萄球菌、β溶血性鏈球菌以及腸球菌時(shí)出現(xiàn)藥物低濃度(仍超過MIC值)時(shí)抗菌活性好于高濃度。,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,第2問:金黃色葡萄球菌D試驗(yàn),erm基因編碼改變的核糖體結(jié)構(gòu)(23S rRNA甲基化),導(dǎo)致對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和林可霉素類耐藥。erm 基因需誘導(dǎo),紅霉素具誘導(dǎo)作用。若出現(xiàn)紅霉素R而克林

4、霉素S,但D試驗(yàn)陽性。若未進(jìn)行D試驗(yàn),克林霉素很可能會(huì)被報(bào)告敏感而誤導(dǎo)臨床用藥。,第3問:如何解釋萬古霉素E-試驗(yàn)結(jié)果?,萬古霉素依賴的糞腸球菌長(zhǎng)期使用包括糖肽類、氨基糖肽類等抗生素壓力下,必須依賴萬古霉素才能生長(zhǎng),The change at the ninth codon resulted in the inactivation of the ddl gene andvancomycin-dependent growth.,第4

5、問:銅綠假單胞菌對(duì)復(fù)方新諾明天然耐藥?,,,,,,第4問:銅綠假單胞菌對(duì)復(fù)方新諾明天然耐藥?,2011年CHINET監(jiān)測(cè)6981株克雷伯菌屬耐藥率(%),,第5問:肺炎克雷伯菌體外藥敏結(jié)果會(huì)顯示對(duì)氨芐西林敏感嗎?,,肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林天然耐藥是天然產(chǎn)SHV型酶,160株肺桿中20株對(duì)氨芐西林敏感19株細(xì)菌SHV基因出現(xiàn)“點(diǎn)突變”,mRNA 逆轉(zhuǎn)錄失敗,無法翻譯出由SHV基因正確編碼的β-內(nèi)酰胺酶。,第6問:大腸埃希菌對(duì)頭孢噻肟的耐

6、藥機(jī)制?,,第7問:如何解釋大腸埃希菌對(duì)頭孢唑啉S但頭孢呋辛R的現(xiàn)象?,頭孢呋辛,頭孢唑林,頭孢呋辛酶可水解頭孢呋辛但不能水解頭孢唑啉,第8問:大腸埃希菌紙片法藥敏結(jié)果,結(jié)果可能嗎?頭孢唑林 S 頭孢他啶R,第9問:這株大腸埃希菌可能的耐藥機(jī)制是什么?,第10問:這株銅綠假單胞菌可能的耐藥機(jī)制是什么?,可能的機(jī)制:1、膜孔蛋白缺失:導(dǎo)致亞胺培南耐藥2、AmpC酶:對(duì)頭孢西丁耐藥3、ESBL:對(duì)頭孢他啶和頭孢吡肟耐藥,產(chǎn)

7、ESBL菌株的檢測(cè),含酶抑制劑復(fù)合制劑與相應(yīng)單藥抑菌圈直徑相差≥5mm,即判斷該菌為產(chǎn)ESBLs菌株,,,,MIC比值,假陽性結(jié)果,,,,第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結(jié)果?,耐藥阿莫西林、哌拉西林、頭孢噻吩、頭孢呋辛、頭孢哌酮阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦敏感頭孢噻肟、頭孢他啶,第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結(jié)果?,ESBL確證試驗(yàn)陰性本株細(xì)菌產(chǎn)生TEM-1型β內(nèi)酰胺酶、膜孔蛋白缺

8、失。頭孢西丁的耐藥性可能是由膜孔蛋白缺失所致,而非β-內(nèi)酰胺酶Pa/Pb調(diào)控TEM-1b高表達(dá)所致,強(qiáng)啟動(dòng)子Pa/Pb是由弱啟動(dòng)子P3經(jīng)32CC→T突變而成,第13問:腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢西丁耐藥就表示細(xì)菌產(chǎn)AmpC 酶嗎?,腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢西丁耐藥只能表示該菌是產(chǎn)AmpC 的可疑菌株。某些類型的ESBL 也能水解頭孢西丁,2009年14家醫(yī)院大腸埃希菌的耐藥率(%)(CHINET監(jiān)測(cè)),,第14問:改良Hodge試驗(yàn)陽性就是產(chǎn)K

9、PC酶?,,改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)假陽性結(jié)果,,,,,Figure 1. Phenotypic carbapenemase detection by MHT 1、K. pneumoniae ATCC BAA-1705, positive result2、K. pneumoniae ATCC BAA-1706, negative result3、CTX-M-producing K. pneumoniae clinical isola

10、te4、KPC-producing K. pneumoniae clinical isolate,ETP,MEM,,,改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)假陰性結(jié)果,,,,,,第15問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么?,1. 厄他培南:13 mm2. 厄他培南+APB14 mm3. 厄他培南+EDTA14 mm4. 亞胺培南:30 mm5. 頭孢吡肟:12 mm,第16問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么

11、?,1. 厄他培南:13 mm2. 厄他培南+APB+EDTA14 mm3. 美羅培南:28 mm4. 法羅培南:23 mm 5. 法羅培南+APB23 mm,第16問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么?,1、頭孢美唑:26 mm2、頭孢噻肟:11 mm3、頭孢噻肟/克拉維酸:30 mm4、頭孢他啶:22 mm5、頭孢他啶/克拉維酸:30 mm6、頭孢噻肟/硼酸:13 mm,第16問:

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