豬瘟與肺炎枝原體的免疫

1、關(guān)于豬瘟免疫的幾個(gè)問(wèn)題,閆之春安平2007-10,提要,我的豬群是否流行豬瘟野毒？用什么方法確定？多大比例？我的豬群應(yīng)如何做免疫控制？要不要免疫？哪些群組？何時(shí)免疫？免疫效果如何？用什么指標(biāo)衡量？,如何面對(duì)一家豬場(chǎng)的疫情？管理學(xué)的視角,做出診斷：依據(jù)什么說(shuō)是這種病？選擇監(jiān)測(cè)指標(biāo)：先定義采取措施：測(cè)量/監(jiān)控指標(biāo)改善提高！,定義測(cè)量控制改善！,,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),“我場(chǎng)剛出生的仔豬，腎臟回盲口有出血點(diǎn)，看

2、來(lái)有溫和豬瘟”“我場(chǎng)保育期仔豬發(fā)燒，送檢發(fā)現(xiàn)藍(lán)耳病抗體很高，死亡增加，腎臟、回盲口有出血點(diǎn)，看來(lái)是藍(lán)耳病散發(fā)豬瘟”“我場(chǎng)仔豬、母豬，豬瘟抗體大部分‘不合格’，中豬死亡增多，可能是散發(fā)豬瘟”“……”,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),豬瘟這次全國(guó)疫情有豬瘟嗎？某一頭豬是否感染豬瘟野毒？豬群這次疫情是否豬瘟？,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),豬群、活體、時(shí)效！臨床癥狀：？病理變化：？病毒學(xué)：分離？？PCR熒光抗體反向間接血凝血清學(xué)

3、:熒光抗體血清中和試驗(yàn)(普通、競(jìng)爭(zhēng)、間接)ELISA……..,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),580母豬，2006年12月, 母豬群流產(chǎn)之后，，5-8周齡保育豬約一半發(fā)燒，前后送檢15頭，2中心：,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),1,200母豬，2007年6月初3周齡哺乳豬4/12欄發(fā)燒，前后送檢7頭，2研究所：,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),以什么標(biāo)準(zhǔn)‘覺(jué)得’有豬瘟呢？大體病變出血點(diǎn)！臨床、大體病變?nèi)绾闻c霍亂沙門氏菌病鑒別？甚至中大豬潰瘍！依據(jù)很不充分！

4、豬瘟抗體尚沒(méi)有區(qū)分野毒vs疫苗毒的抗體檢測(cè)方法：種豬場(chǎng)銷售案例使用了什么方法測(cè)抗體？有的豬場(chǎng)經(jīng)常在測(cè)不到豬瘟抗體+見(jiàn)到一些出血點(diǎn)時(shí)懷疑發(fā)生了豬瘟---如果真是豬瘟野毒感染，抗體在5d以內(nèi)便會(huì)大很高！,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),以什么標(biāo)準(zhǔn)‘覺(jué)得’有豬瘟呢？抗原檢測(cè)小心！ELISA特異性受到廣泛質(zhì)疑PCR如何區(qū)分是疫苗毒的RNA? 不能！盲樣的重復(fù)性經(jīng)常受質(zhì)疑分離病毒不實(shí)際,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),PCR、ELISA送檢，至

5、少15個(gè)樣本，一定要設(shè)最少15%的(相同豬、同天采樣)重復(fù)樣本，重復(fù)性好，才能使用這次檢測(cè)的結(jié)果。別人無(wú)法重復(fù)的檢測(cè)方法不是科學(xué),豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),豬群的流行率是多少？抽檢多少頭？抽檢什么豬？,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),許多獸醫(yī)已經(jīng)習(xí)慣于熟悉的30個(gè)樣本數(shù)（假如流行率≥10%，置信區(qū)間在95%，30個(gè)樣本數(shù)足以檢測(cè)出至少1頭陽(yáng)性）。當(dāng)流行率是5%，從一個(gè)大的群體中挑選30個(gè)樣本，其中不包含1頭單一發(fā)病動(dòng)物的可能性超過(guò)20%。 但是

6、，重要的是我們要記?。寒?dāng)流行率比較低時(shí)，用30個(gè)樣本來(lái)診斷疾病的可靠性會(huì)不夠。要明確目的：檢測(cè)疾??？估計(jì)流行率或發(fā)病率？ 群體大小、預(yù)期流行率、置信區(qū)間、檢測(cè)方法的敏感性/特異性當(dāng)流行率非常高（> 90%）或者非常低時(shí)，估計(jì)流行率所需的樣本數(shù)量相對(duì)較少 缺少預(yù)期流行率的資料，一個(gè)保守的方法是使用表示50%流行率的樣本數(shù)目。再者，這些指導(dǎo)方針是假定理想的檢測(cè)性能，依據(jù)檢測(cè)性能的參數(shù)可能需要加以修改。,從5%或10%流行率群體

7、中挑選30個(gè)樣本中的預(yù)期感染數(shù),估計(jì)疾病流行率在10%以內(nèi),置信區(qū)間為90%或95%（假定理想的方法），預(yù)期流行率對(duì)樣本數(shù)量的影響,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),以什么標(biāo)準(zhǔn)‘覺(jué)得’有豬瘟呢？USDA 資助 AASV 的報(bào)告標(biāo)準(zhǔn),豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),以什么標(biāo)準(zhǔn)‘覺(jué)得’有豬瘟呢？USDA 資助 AASV 的報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)臨床病例的定義,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),臨床個(gè)案定義 由于豬瘟的臨床癥狀類似于許多其它流行病，本個(gè)案定義旨在幫助確定是否報(bào)

8、告該病例。當(dāng)一個(gè)豬群在很大程度值得懷疑且符合一項(xiàng)或者一項(xiàng)以上的下述臨床特征，這個(gè)豬群則應(yīng)報(bào)告。1）豬群中具有臨床癥狀的病例2）豬群中具有臨床上一致的病例，包括：尸體剖檢證實(shí)腎臟、膀胱、淋巴結(jié)、 喉頭等器官的出血，或者其它敗血病 的癥狀3）豬群中具有臨床上一致的病例：3個(gè)月前要么從國(guó)外進(jìn)口過(guò)有關(guān)豬的遺傳物質(zhì)（材料）、飼料污染，或者與最近參觀過(guò)國(guó)外農(nóng)場(chǎng)的人有過(guò)接觸。,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn)

9、,臨床癥狀描述 感染豬可以表現(xiàn)持續(xù)發(fā)燒，皮膚變色，結(jié)膜炎、神經(jīng)癥狀，呼吸窘迫、流產(chǎn)和下痢，并且對(duì)抗生素治療無(wú)效。白細(xì)胞減少是一致的發(fā)現(xiàn)。,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),圖1 腎皮質(zhì)的點(diǎn)狀出血,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),圖2 扁桃體的多處壞死灶,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),圖3 脾臟的梗死灶,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),圖4淋巴結(jié)的周邊出血,豬瘟-診斷要有標(biāo)準(zhǔn),不要看見(jiàn)出血點(diǎn)輕易下結(jié)論 某次發(fā)病有豬瘟鑒別診斷沙門氏菌病急性巴氏桿菌病非洲豬

10、瘟香豆素中毒丹毒副嗜血桿菌其它病毒性腦脊髓炎鉤端螺旋體病圓環(huán)病毒相關(guān)病（PCVAD）藍(lán)耳病豬鏈球菌病其它敗血性疾病,豬瘟-如何免疫？,C-株疫苗特點(diǎn)：一般情況下 抗體產(chǎn)生之前，有沒(méi)有保護(hù)性的體液免疫？接種約6d后，即應(yīng)該有。-Aynaud, Corthier 1976; Terpstra 1988接種3天后即應(yīng)產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力，中和抗體通?？稍?周后產(chǎn)生，并可持續(xù)4-12周。斷奶仔豬接種后的免疫期可長(zhǎng)達(dá)1年半。-B

11、iront, Leuner 1987, Terpstra 1990, Dahle 1995, Bounma 2001對(duì)中等毒力（2.2基因亞群）及僅引起繁殖障礙的低毒力株保護(hù)性也很好。Yu, Tu, 2001,豬瘟-如何免疫？,C-株疫苗：注意接種7d后脾臟、血液中上可檢出病毒,偶爾可通過(guò)接種豬傳染給接觸豬。用MPK細(xì)胞培養(yǎng)的C-株疫苗接種豬的血樣中經(jīng)?？捎肞CR檢出病毒。用強(qiáng)毒攻擊后1-4d (!) 再用C-株疫苗免疫，試驗(yàn)仔豬

12、全部死亡。所謂應(yīng)急免疫接種實(shí)際是不可行的。 Urbaneck, Tesmer, 1973仔豬的母源抗體越高，對(duì)疫苗免疫的抑制作用就越強(qiáng)！不同類型、病毒量、制作方法的C-株疫苗， 抗體的應(yīng)答完全不同?。?仇華吉 2004,豬瘟-如何免疫？,仔豬母源抗體越高，對(duì)面疫苗免疫的抑制作用就越強(qiáng)！不同類型、病毒量、制作方法的C-株疫苗， 抗體的應(yīng)答完全不同那么，我的豬場(chǎng)應(yīng)該怎么做？用哪種疫苗？抗體產(chǎn)生、持續(xù)、消失的規(guī)律怎樣？在何時(shí)進(jìn)行第

13、一接種？,豬瘟-如何免疫？,所用的疫苗有資料嗎？妊娠早期接種是否會(huì)增加死產(chǎn)仔數(shù)？接種后多長(zhǎng)時(shí)間能產(chǎn)生保護(hù)？母豬？保育仔豬？中大豬？保護(hù)抗體可以持續(xù)多長(zhǎng)時(shí)間？母豬？保育仔豬？中大豬？,豬瘟-如何免疫？,所用的疫苗沒(méi)有資料唯一的辦法就是自己做實(shí)驗(yàn)！哪些試驗(yàn)？測(cè)什么？用什么方法測(cè)？ELISA抗體檢測(cè)仍然是重復(fù)性最好的方法！3項(xiàng)試驗(yàn)抗體產(chǎn)生規(guī)律試驗(yàn)：免疫前的抗體水平、免后是否產(chǎn)生抗體？產(chǎn)生時(shí)間？母豬、仔豬、大豬

14、母源抗體的水平及消失規(guī)律：連續(xù)測(cè)定不同年齡段豬的抗體檢測(cè)：群體抗體檢測(cè),豬瘟-如何免疫？ 3項(xiàng)試驗(yàn),1 抗體產(chǎn)生規(guī)律試驗(yàn)：免疫前、后是否產(chǎn)生抗體？時(shí)間？母豬、仔豬、大豬1）各選30頭豬2）接種前測(cè)ELISA抗體-是否已經(jīng)有抗體？3）接種15天、30天、45天測(cè)考察疫苗的效果,豬瘟-如何免疫？ 3項(xiàng)試驗(yàn),2 母源抗體的水平及消失規(guī)律：對(duì)確定仔豬的最佳首免時(shí)間極為重要 1）紀(jì)錄母豬的免疫時(shí)間2）選40頭未吃初乳的

15、仔豬（野毒感染的風(fēng)險(xiǎn)？），不接種豬瘟疫苗，連續(xù)采血測(cè)ELISA抗體3）出生后7天、14天、21天（斷奶時(shí)）、28天、42天、63天（出保育）測(cè)建議ELISA阻斷率30%以下的仔豬占20%時(shí)（認(rèn)為豬群已受到明顯威脅）做首免。,仔豬日齡,豬瘟-如何免疫？ 3項(xiàng)試驗(yàn),2 母源抗體的水平及消失規(guī)律：仍有80%的仔豬有母源抗體20%低過(guò)0.3的阻斷率，是為了覆蓋這部分的‘受威脅’的豬，應(yīng)該評(píng)估你的豬場(chǎng)所受的威脅，可能有80%時(shí)作首免也不遲

16、。,豬瘟-如何免疫？ 3項(xiàng)試驗(yàn),3 不同年齡段豬的抗體檢測(cè)：群體抗體監(jiān)測(cè)首免日齡前，抽檢25頭首免后（最好在某飼養(yǎng)階段末，如出保育，生長(zhǎng)I期結(jié)束）20天抽25頭根據(jù)妊娠母豬的免疫方案（普防？跟胎？）抽2組各25頭即可。如果是同一分場(chǎng)內(nèi)，總計(jì)約75-100頭,豬瘟：結(jié)語(yǔ)與建議,不要輕易懷疑是豬瘟發(fā)病-正常免疫豬場(chǎng)的野毒陽(yáng)性率可能非常低；多數(shù)豬場(chǎng)尚未科學(xué)檢測(cè)、科學(xué)抽樣；臨床癥狀+PCR確診。送檢PCR/ELISA有重復(fù)樣；

17、相同豬連續(xù)監(jiān)測(cè)抗體是好辦法。更換疫苗必須評(píng)估磨刀不誤砍柴工建議母豬產(chǎn)前/配種前接種，沒(méi)必要一年3次以上普防；根據(jù)母源抗體消失情況，仔豬免疫1-2次已非常充分。,枝原體肺炎,攻擊、破壞氣管上皮的纖毛，破壞了呼吸系統(tǒng)抵御有害微生物入侵的機(jī)制主要影響 ：生長(zhǎng)豬的飼養(yǎng)成本平均日增重、飼料轉(zhuǎn)換率、肺成品率、藥物成本死亡率PRRS活躍場(chǎng)、SIV時(shí)更易繼發(fā)感染其他呼吸系統(tǒng)病,,地方性肺炎的成本,1982,使用疫苗的盈虧平衡點(diǎn),疾

18、病成本,疫苗成本,總成本,平均肺部病變?cè)u(píng)分,枝原體肺炎-何時(shí)免疫？,大部（？）豬感染之前，應(yīng)有疫苗保護(hù)又能避開(kāi)母源抗體的干擾母源抗體有干擾嗎？,枝原體肺炎-何時(shí)免疫？,大部（？）豬感染之前，應(yīng)有疫苗保護(hù)但是文獻(xiàn)及試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，血清抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)的時(shí)間可能是11-24周齡，很大的范圍，究竟我的豬場(chǎng)肺炎枝原體感染的時(shí)機(jī)主要是哪個(gè)年齡段呢？不測(cè)不知道！,枝原體肺炎-何時(shí)免疫？,又能避開(kāi)母源抗體的干擾母源抗體有干擾嗎？,枝原體肺炎-何時(shí)免

19、疫？,16周攻毒，21周評(píng)肺.Jayappa, H., Davis, R., (2001) 母源抗體降低時(shí)再接種更好!,不同周齡、不同母源抗體水平下疫苗接種的效果,肺變?cè)u(píng)分,接種前母源抗體水平,實(shí)驗(yàn)組,枝原體肺炎-何時(shí)免疫？,Thacker et al (2002) 母源抗體降低時(shí)在接種要好（6-9周齡）!,枝原體免疫周齡、母源抗體水平對(duì)單針免疫的影響,,母豬免疫,母豬未免疫,14周攻毒，18周屠宰評(píng)分肺臟,枝原體肺炎-何時(shí)免疫？,

20、母源抗體降低時(shí)接種好!產(chǎn)前免疫過(guò)母豬的豬場(chǎng)，根據(jù)不同的斷奶日齡，仔豬枝原體免疫可能應(yīng)該推遲可能推遲到出保育時(shí)根據(jù)新的免疫學(xué)研究，美國(guó)的不少專家認(rèn)為即便母豬不接種，仔豬的首免也應(yīng)是10-12周齡。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,每個(gè)豬場(chǎng)都是不同的！斷奶日齡及豬舍通風(fēng)質(zhì)量可能是影響枝原體流行程度的最重要因素。飼料越貴，越應(yīng)考慮免疫接種。只有用自己的豬群做過(guò)試驗(yàn)才知道，而且要定期做。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過(guò)試驗(yàn)

21、才知道，而且要定期做。Excel 案例12個(gè)保育生長(zhǎng)肥育場(chǎng)，藍(lán)耳病陽(yáng)性但穩(wěn)定場(chǎng)的后代各2次重復(fù)共約900豬，用3種疫苗免疫方案，統(tǒng)計(jì)自斷奶到肥育一期,稱重5次分析死亡率、平均日增重的差異,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,正確的結(jié)果解釋：2005年，該豬場(chǎng)一胎母豬的后代仔豬，7、21日齡免疫2針某品牌的枝原體苗可以提高平均日增重59克（p<0.01),枝原體肺炎-免疫有效嗎？,,,,枝原體肺炎-

22、免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過(guò)試驗(yàn)才知道，而且要定期做。Excel 案例2， 同一公司3個(gè)保育-肥育場(chǎng)，1個(gè)來(lái)自藍(lán)耳病隱性群，2個(gè)來(lái)自藍(lán)耳病陽(yáng)性、但穩(wěn)定場(chǎng)的后代共約1,200豬，用4種疫苗免疫方案，統(tǒng)計(jì)自斷奶到肥育一期,稱重5次分析死亡率、平均日增重的不同豬場(chǎng)、性別、胎次差異使用了復(fù)雜的單變量一般線性模型分析處理間的差異，皮爾孫檢驗(yàn)分析死亡率,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,枝

23、原體肺炎-免疫有效嗎？,結(jié)論：各個(gè)免疫方案之間及其與對(duì)照組之間均無(wú)差異。這家公司、目前的豬群，是否免疫枝原體疫苗沒(méi)有區(qū)別。,枝原體肺炎-免疫有效嗎？,只有用自己的豬群做過(guò)試驗(yàn)才知道，而且要定期做。Excel 案例3， 廣西-更大規(guī)模、更系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)已進(jìn)入數(shù)據(jù)處理階段2個(gè)生長(zhǎng)肥育群；用5種疫苗免疫方案，統(tǒng)計(jì)自斷奶到肥育2期；分析死亡率、平均日增重、飼料效率、咳嗽指數(shù)、屠宰肺部評(píng)分、不同時(shí)間的抗體水平變化。敬請(qǐng)期待！,枝原體肺