球菌、腸桿菌和弧菌

1、球菌、腸桿菌和弧菌,浙江大學醫(yī)學院病原生物學系 林旭璦E-mail: lxai122@163.comTEL: 88208294,球菌 (coccus),G＋球菌 葡萄球菌 鏈球菌 肺炎鏈球菌,G－球菌 腦膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌,第一節(jié)、葡萄球菌屬（staphylococcus）,G+，葡萄串狀排列，不形成莢膜 金黃色葡萄球菌是重要致病菌兼性厭氧菌，普通培養(yǎng)基上生長良好

2、 葡萄球菌A蛋白無芽孢菌中抵抗力最強,三種葡萄球菌鑒別的主要性狀,一、金黃色葡萄球菌（S. aureus）,1.形態(tài)與染色 球形，葡萄串狀，無鞭毛，無芽胞，G+,（一）生物學性狀,2.培養(yǎng)特性,易培養(yǎng)：普通平板 血平板產色素：金黃色有些菌溶血，產生溶血環(huán),致病性葡萄球菌菌落呈金黃色，于血瓊脂平板上生長后，在菌落周圍還可見完全透明溶血環(huán)（β溶血）。,3.生化反應,多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖。產

3、酸不產氣。致病性球菌分解甘露醇。觸酶陽性（與鏈球菌區(qū)分標準）,4.抗原構造,SPA inhibits phagocytosis,Free protein A binds to Fc of IgG, blocking Fc receptors and is thus anti-phagocytic.,SPA協(xié)同凝集試驗（coagglutination）,5.抵抗力,?對外界因素的抵抗力強于其他無芽胞菌?對堿性染料（龍膽紫）敏感?

4、易產生耐藥性，特別對青霉素（MRSA）?耐甲氧西林金黃色葡萄球菌,葡萄球菌中金黃色葡萄球菌毒力最強，通過在宿主體內增殖、擴散和產生有害的胞外物質（酶和毒素）引起宿主疾病。 葡萄球菌的毒力因子（致病物質）包括： ①酶；②毒素；③細菌的一些表面結構蛋白。,（二）致病性與免疫性,1.致病物質,①酶 凝固酶：血漿纖維蛋白原轉為纖維蛋白， 使血漿凝固 耐熱核酸酶：水解DNA 纖維蛋白溶酶：水解

5、纖維素（纖維蛋白溶酶、 葡激酶） 透明質酸酶：降解結締組織（擴散因子） 脂酶：分解脂肪 觸酶：分解H2O2,,②毒素 葡萄球菌溶素 毒性休克綜合征毒素-1 殺白細胞素 腸毒素 表皮剝脫毒素③表面結構或蛋白 如粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖和SPA等,凝固酶（coagulase）,概念：使含抗凝劑的

6、人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類 游離凝固酶（free coagulas） 結合凝固酶（bound coagulase）意義：鑒別有無致病性的重要指標致病機理：抵抗吞噬細胞的吞噬；保護病菌不受 血清中殺菌物質的破壞；使感染局限 化和形成血栓。,—引起金黃色燙傷樣皮膚綜合征 （staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS）,中毒性休克綜合征毒素

7、-1（TSST-1）,—引起機體發(fā)熱，增加對內毒素的敏感性；—引起多器官系統(tǒng)功能紊亂或毒性休克綜合征 （TSS）,表皮剝脫毒素（exfoliative toxin）,腸毒素（enterotoxin）,—約1/3臨床分離金黃色葡萄球菌可產生—引起急性胃腸炎（即食物中毒）—耐熱，抗胃腸液中蛋白酶—作用機制：刺激嘔吐中樞導致以嘔吐為主要 癥狀的食物中毒—還具有超抗原（supera

8、ntigen）作用,葡萄球菌溶素（staphylolysin）,—α溶素—損傷細胞膜的毒素（細胞毒素）,殺白細胞素（leukocidin）,—細胞毒素—攻擊中性粒細胞和巨噬細胞—抵抗宿主吞噬細胞，增強細菌侵襲力,,,2.所致疾病,,,,感染類型 所致疾病,侵襲性 局部感染 全身感染,毒素性 食物中毒

9、 TSS SSSS,3.免疫性,人類有一定的天然免疫力，只有當皮膚黏膜受傷后，宿主免疫力降低時，才易引起葡萄球菌感染。 感染后能獲得一定的免疫力，但不強，難以防止再次感染。,小貓試驗,標本,膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等,分離培養(yǎng),血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,,革蘭陽性葡萄球菌,生長現(xiàn)象,,色素，溶血……,,生化

10、反應,,毒素檢查,,藥敏實驗,動物實驗：對食物中毒患者,（三）微生物學檢查法,,,,,,防,,注意消毒隔離,注意個人衛(wèi)生,,,防止醫(yī)源性感染,防止耐藥性產生,,,治,,,抗菌素藥敏試驗,自身菌苗療法,四、防治原則,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA),簡 介,抗多種抗生素，世界三大最難解決感染性疾患的首位金黃色葡萄球菌——青霉素—

11、—青霉素酶半合成青霉素——甲氧西林——MRSA,Health care associated MRSA, HA-MRSACommunity associated MRSA, CA-MRSA,Differences between HA and CA MRSA,MRSA的特點,不均一耐藥性廣譜耐藥性生長特殊性,毒力因子,Panton-Valentine leukocidin (PVL）編碼2個獨立的白細胞毒素蛋白(LukS-PV

12、L、LukF-PVL)形成孔結構，導致局部炎癥，趨化、嗜中性粒細胞滲透以及降解酶和超氧離子的產生,耐藥機理,固有耐藥 染色體介導，青霉素結合蛋白PBP-2a獲得性耐藥 質粒介導,預防和治療,合理使用抗生素早期檢出帶菌者加強消毒制度萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧,Signs/symptoms,膿胞、癤子、膿腫發(fā)紅，腫脹疼痛化膿、出水出現(xiàn)spider bite,Us vs. MRSA,

13、Keep skin clean,Keep skin intact,Do not share personal items,Keep environment clean,“The more you sweat in practice the less you bleed in battle.”,二、凝固酶陰性葡萄球菌,（Coagulase negative staphylococcus, CNS）,CNS已成為醫(yī)院感染的重要病原菌，耐藥菌

14、株日益增多；當機體免疫功能低下或細菌進入非正常寄居部位時，CNS可引起多種感染，僅次于大腸埃希菌而居病原菌的第2位，造成診治困難。,泌尿系感染細菌性心內膜炎敗血癥術后及植入醫(yī)用器械引起的感染,CNS主要為表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌等G+，不產生血漿凝固酶、α溶素等毒性物質。,第二節(jié) 鏈球菌屬（Streptococcus）,A群（化膿性）鏈球菌（S. pyogenes）肺炎鏈球菌（S. pneumoniae）,概述鏈球菌屬

15、是一大類G＋、排列呈雙或長短不一的鏈狀球菌。分類1)溶血現(xiàn)象分類 ①甲(α)型溶血； ②乙(β)型溶血； ③丙(γ)型溶血。,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類,2）抗原結構分類 據(jù)鏈球菌細胞壁中抗原結構（C多糖抗原）不同,運用血清學方法分成A～V 20群。對人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群，其他群少見。 同一群的鏈球菌又分若干型。A群根據(jù)其M抗原不同，可分成約100個型。,3）生化反

16、應分類 對一些不具有群特異性的鏈球菌（如肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌等），需用生化反應、藥物敏感和對氧的需要分類。對氧的需要分類分為：需氧、厭氧和微需氧鏈球菌。,醫(yī)學常見鏈球菌,,一、A群（化膿性）鏈球菌 本屬細菌的代表種，致病性強，對人致病的鏈球菌有90%屬此種。,1.形態(tài)與染色 球形或橢圓形，鏈狀排列，革蘭染色陽性（G＋），無芽胞，無鞭毛，透明質酸的莢膜。,(一)生物學性狀,2.培養(yǎng)特性,液體培養(yǎng)為沉淀

17、生長。,營養(yǎng)要求高：血平板或含血清培養(yǎng)基；,血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一， 多數(shù)有透明溶血環(huán)（β溶血現(xiàn)象)；,,3.生化反應,分解葡萄糖，產酸不產氣。不分解菊糖，不被膽汁溶解 (可鑒別甲型溶血性鏈球菌與肺炎鏈球菌)。鏈球菌不產生觸酶，與葡萄球菌不同。,,,4.抗原結構,1）多糖抗原(C抗原)：群特異性抗原，細胞壁的多糖組分。 2）表面抗原或稱蛋白質抗原：壁外的菌毛樣結構含M蛋白，位于C抗原外層，具型

18、特異性，有近100種血清型。M抗原與致病性有關。3）P抗原或稱核蛋白抗原：無特異性。,,,,,抗原結構,5.抵抗力一般鏈球菌均可在60℃被殺死，對常用消毒劑敏感。在干燥塵埃中生存數(shù)月。乙型鏈球菌對青霉素、紅霉素，四環(huán)素、桿菌肽和磺胺藥都很敏感。,A群鏈球菌有較強的侵襲力，產生多種外毒素和胞外酶。 1.致病物質(三大類)： 細菌的胞壁成分，胞壁上的粘附素 外毒素 胞外侵襲酶類

19、,（二）致病性與免疫性,,1)胞壁成分 (1)粘附素： ①脂磷壁酸（lipoteichoic acid, LTA） 與生物膜有高度親和力，是該菌定植在機體皮膚和呼吸道黏膜等表面的主要侵襲因素。 ② F蛋白(protein F) 位于化膿性鏈球菌細胞壁內，其結合區(qū)暴露在菌體表面，是纖維粘連蛋白（fibronectin, FBP）的受體。有利于細菌定植和繁殖。,(2)M蛋白（M protein） 是

20、A群鏈球菌的主要致病因子，含M蛋白的鏈球菌具有抗吞噬和抵抗細胞內殺菌作用；與某些超敏反應疾病有關。(3)肽聚糖 A群鏈球菌的肽聚糖具有致熱、溶解血小板、提高血管通透性和誘發(fā)實驗性關節(jié)炎等作用。,2）外毒素類 (1)致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 是人類猩紅熱的主要毒性物質。致熱外毒素抗原性強，具有超抗原作用，對兔有致熱性和致死性。,(2)鏈球菌溶素（streptolys

21、in） 溶解紅細胞、破壞白細胞和血小板。 A族鏈球菌可分為兩種溶血素(hemolysin)： 鏈球菌溶素O(SLO)：對哺乳動物多種細胞有毒性作用 鏈球菌溶素S(SLS)：對白細胞和多種組織細胞有破壞作用,,3）侵襲性酶（invasive enzyme） A群鏈球菌可產生多種侵襲酶，均是擴散因子。 A 透明質酸酶（hyaluronidase）： 分解間質內透明質酸，使病菌易擴散。

22、 B 鏈激酶（streptokinase, SK）： 與葡激酶類似，使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，溶解血塊或阻止血漿凝固，利于病菌擴散。 C 鏈道酶（streptodomase, SD）： 亦稱鏈球菌DNA酶，降解DNA，使膿液稀薄，促進病菌擴散。,2.所致疾病,A群鏈球菌引起的疾病約占人類鏈球菌感染的90%,淋巴管炎、蜂窩組織炎、扁桃體炎等。,猩紅熱,(3)超敏反應性疾病,(1)化膿性感染,(2)中毒性疾病,,

23、,風濕熱,急性腎小球腎炎,,,,3.免疫性,可刺激機體產生各種抗體，獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。型別間無交叉免疫?？筂蛋白抗體有保護作用，不同型M蛋白均可誘生γ-干擾素。猩紅熱患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。,,,,,必要時做：生化反應或藥敏實驗等,(三)微生物學檢查法,,血清學檢查,抗O試驗（ASO test）： 鏈球菌侵入體內產生SLO，刺激機體產生相應抗體ASO，當兩者中和后，在加入SLO乳膠試劑，因病人血清中A

24、SO量很多，未被中和的抗體與乳膠試劑反應。 產生凝集，為陽性；無凝集，為陰性。原理：中和試驗，用SLO檢測血清中的ASO方法：間接凝集結果：效價大于400單位意義：活動性風濕熱及腎小球腎炎輔助診斷,積極治療兒童鏈球菌感染，防止發(fā)生急性腎炎和風濕熱。 抗生素首選青霉素：用長效青霉素預防鏈球菌感染，對減少腎小球腎炎及風濕熱的發(fā)生有一定效果。,,(四)防治原則,二、肺炎鏈球菌 (S. pneamoniae),在自然

25、界廣泛分布，常寄居于正常人的鼻咽腔中，形成帶菌狀態(tài)，在機體抵抗力下降時引起疾病。主要引起大葉性肺炎，約占細菌性肺炎的80%。,(一) 生物學特性,形態(tài)染色：革蘭陽性球菌，矛尖狀，成雙排列，在人和動物體內形成莢膜,(一) 生物學特性,血平板上菌落特征：菌落細小、周圍有草綠色溶血環(huán)，48 h后，由于菌落自溶，呈現(xiàn)“臍窩狀”生化反應：Optochin敏感試驗（+） 膽汁溶菌試驗（

26、+） 菊糖分解試驗（+）動物試驗： 小白鼠毒力試驗（+）,抗原結構 （1）莢膜多糖抗原 具有型特異性，可將肺炎鏈球菌分為85個型別。（2）其他抗原 肺炎鏈球菌含有M蛋白和C多糖。 C反應蛋白（C reactive protein，CRP）：CRP不是抗體，但在炎癥的活動期含量增多。,(一) 生物學特性,致病性 條件致病。 致病

27、物質：主要是莢膜的抗吞噬作用。 所致疾病：主要引起人的大葉肺炎(lobar pneumonia)，還可引起急性或慢性支氣管炎、副鼻竇炎、中耳炎和兒童的化膿性腦膜炎等。,(二)致病性和免疫性,免疫性 感染后機體產生莢膜抗體，有調理作用，對同型菌建立較牢固的特異性免疫。,(二)致病性和免疫性,直接涂片染色鏡檢：典型鏈球菌，可做初步診斷。　　 分離培養(yǎng)（血液瓊脂平板） 典型的鏈球菌菌落

28、。 直接涂片染色鏡檢 膽汁溶菌試驗與菊糖發(fā)酵試驗 藥敏實驗,（三）微生物學檢查法,標本,細菌分離和鑒定,（三）微生物學檢查法,動物試驗 將標本給小鼠腹腔接種，待其瀕死時剖檢，取心血或腹腔液涂片、染色、鏡檢，并做分離培養(yǎng)與鑒定；也可用鼠腹腔液做莢膜腫脹實驗。,據(jù)報道

29、用多價肺炎鏈球菌莢膜多糖菌苗可預防肺炎鏈球菌所致的肺部感染，對預防兒童中耳炎及一些高危人群感染也有一定的效果。 治療用藥同鏈球菌。,(四)防治原則,肺炎鏈球菌與甲型鏈球菌的鑒別,二、其他鏈球菌 （一）甲型溶血性鏈球菌: 也稱草綠色鏈球菌（streptococcus viridians）。無多糖抗原，不屬于Lancefield血清學分類的任何族。 包括多個種，條件致病，可引起下列兩種疾?。?1.齲齒(denta

30、l caries)：常由變形鏈球菌引起。 2.亞急性細菌性心內膜炎(subacute bacterial endocarditis, SBE)由此菌引起的SBE占全部病例50%。,（二）B族鏈球菌 又稱無乳鏈球菌?？杉木佑谡D女陰道和直腸，也寄居在健康人鼻咽部，故可引起皮膚感染、心內膜炎、產后感染、新生兒敗血癥和腦膜炎。,（三）D族鏈球菌（條件致病菌） 本菌包括糞鏈球菌、牛鏈球菌和馬

31、鏈球菌。D族鏈球菌正常寄居在皮膚、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，偶爾引起泌尿道感染、腹部化膿性感染、敗血癥和心內膜炎。身體虛弱和免疫功能低下者易感染。,第四節(jié) 奈瑟菌屬 （Neisseria）,奈瑟菌屬對人有致病性的有淋病奈瑟菌(N. gonorrhoeae) 和腦膜炎奈瑟菌（N. meningitidis），其余均為人類呼吸道正常菌群，偶而可引起腦膜炎和心內膜炎等。G－雙球菌，無鞭毛、芽胞，有菌毛。典型細胞內寄生。,一、淋病奈瑟菌

32、(N. gonorrhoeae),（一）生物學性狀,1）菌毛蛋白2）外膜蛋白3）脂寡糖,4.表層抗原,（一）生物學性狀,1.致病物質,菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。外膜蛋白Ⅱ：有助于粘附。IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA。 內毒素：損害人體黏膜的重要因素。,（二）致病性與免疫性,,,1.淋病,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主，屬性傳播疾?。╡xually transmitted disease ，STD） 主要通過性接觸引起泌

33、尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,,,2.所致疾病,gonorrhea,,,2.新生兒淋菌性結膜炎/新生兒膿漏眼,新生兒由產道感染有淋病性陰道炎或子宮頸炎的孕婦，胎兒經產道娩出時可被感染。,3.淋病奈瑟菌性結膜炎及幼女陰道炎,,2.所致疾病,通過毛巾、浴池間接感染。,,,（三）微生物學檢查法,,,,（四）防治原則,二、腦膜炎奈瑟菌（N. meningitidis）,1.形態(tài)與染色 G－雙球菌,腎形或豆形，無鞭毛、芽胞，有菌毛。,,2.分離培

34、養(yǎng) 專性需氧菌 巧克力培養(yǎng)基,（一）生物學性狀,3.抗原構造與分類,莢膜多糖群特異性抗原 分群外膜蛋白型特異性抗原 分型脂多糖抗原核蛋白抗原,4.抵抗力,很弱四怕：熱、寒冷、干燥、消毒劑,1.致病物質 主要是內毒素,2.所致疾病,呼吸道傳播，飛沫或接觸流行性腦脊髓膜炎,,,菌毛：粘附于黏膜上皮細胞，利于定植；莢膜：有抵抗吞噬的作用；內毒素：可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙，嚴重者可致內毒素休克、血栓、DI

35、C等。,傳染源：病人和帶菌者,,（二）致病性與免疫性,（三）免疫性,人對腦膜炎奈瑟菌抵抗力較強：機體感染后以體液免疫為主，血清中特異抗體能殺死腦膜炎奈瑟菌；抗體的調理作用能增強吞噬細胞的功能；分泌型IgA可阻止腦膜炎奈瑟菌對上呼吸道黏膜的粘附。 母體中的IgG還可通過胎盤傳給胎兒，故6個月內嬰兒極少患流行性腦膜炎。,（二）致病性與免疫性,1.標本,3.分離培養(yǎng)與鑒定,腦脊液、血液、出血點滲出液、鼻咽拭子保暖、保濕、立即送檢，培