2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、細(xì)胞工程學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ★ 實(shí)驗(yàn)一 植物細(xì)胞培養(yǎng)基的種類及配制 ★ 實(shí)驗(yàn)二 植物愈傷組織的誘導(dǎo) ★ 實(shí)驗(yàn)三 植物愈傷組織細(xì)胞的培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)一 植物細(xì)胞培養(yǎng)基的種類及配制 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、了解植物細(xì)胞培養(yǎng)基的種類及營(yíng)養(yǎng)要求。 2、掌握MS培養(yǎng)基的配制方法。二、實(shí)驗(yàn)材料 1、實(shí)驗(yàn)設(shè)備:高壓滅菌鍋、電子分析天平、pH計(jì)、超凈

2、 工作臺(tái)。 2、實(shí)驗(yàn)器材:電磁爐、燒杯、量筒、攪拌棒、吸量管、 移樣槍。,三、植物細(xì)胞培養(yǎng)基的種類 在100多年的植物組織、器官和細(xì)胞離體培養(yǎng)研究中,研制開發(fā)了數(shù)十種適宜不同植物、不同組織、不同細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的培養(yǎng)基配方,但多數(shù)培養(yǎng)基是在幾種普遍應(yīng)用的培養(yǎng)基上演變而來(lái)的,其中應(yīng)用最為廣泛的仍為MS培養(yǎng)基。植物組織培養(yǎng)基早期

3、的建立,如White提出的根培養(yǎng)基和Gautheret提出的愈傷組織培養(yǎng)基,都是由先前的用于整體植物栽培的營(yíng)養(yǎng)液發(fā)展而來(lái)的。以后所有的各種培養(yǎng)基又都是在White培養(yǎng)基和Gautheret培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上形成的。各種培養(yǎng)基在無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)組成上的差異主要是鹽和離子數(shù)量上的不同。常用培養(yǎng)基中根據(jù)無(wú)機(jī)鹽的含量可以分為4類,分述于下:,1、高無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基:高無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基中,鉀鹽、銨鹽及硝酸鹽含量較高,微量元素種類齊全,養(yǎng)分?jǐn)?shù)量及比例較合適,廣

4、泛用于植物的器官、花藥、細(xì)胞及原生質(zhì)體的培養(yǎng)。主要有MS培養(yǎng)基和ER培養(yǎng)基。 2、較高硝酸鉀含量培養(yǎng)基:較高硝酸鉀含量培養(yǎng)基適合于木本植物、十字花科植物和單子葉植物的組織和花藥培養(yǎng)。主要有B5培養(yǎng)基和N6培養(yǎng)基。,3、中等無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基:中等無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基中,大量元素約為MS培養(yǎng)基的一半,微量元素種類減少,但含量較MS的高,適合于花藥培養(yǎng)。主要有Nitsch培養(yǎng)基和NT培養(yǎng)基。 4、低無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基

5、:低無(wú)機(jī)鹽量培養(yǎng)基中,大量元素含量大幅降低而且種類減少,多數(shù)用于生根培養(yǎng)基。主要有White培養(yǎng)基和Heller培養(yǎng)基。各種植物培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成及配方如下表:,四、MS培養(yǎng)基的配制 植物細(xì)胞培養(yǎng)基種類很多,如MS、ER、B5、N6、NT和White等。本實(shí)驗(yàn)以MS完全培養(yǎng)基為例,介紹植物細(xì)胞培養(yǎng)基的配制方法。 (一)MS培養(yǎng)基母液的配制 母液的配制是按藥品的種類和性質(zhì)分別配制,單獨(dú)保存或

6、幾種混合保存。配制好的母液種類一般有大量元素、微量元素、鈣鹽、鐵鹽、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)和單獨(dú)保存的各種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)類物質(zhì)。大量元素一般配制成10倍濃度的母液,微量元素和有機(jī)物常配制成100倍濃度的母液。見下表。,上表提供了MS培養(yǎng)基母液的配方。將各種化合物按指定擴(kuò)大倍數(shù)準(zhǔn)確稱量、分別溶解后,按先后次序加入蒸餾水中,最后用蒸餾水定容。 注意:在混合定容時(shí),一定要掌握藥劑的先后次序或稀釋度,以免發(fā)生沉淀。鈣鹽和鐵鹽由于與其它母液混合容易發(fā)

7、生沉淀反應(yīng),因此需單獨(dú)配制。鐵鹽為螯合狀態(tài)時(shí),有利于植物在適宜的pH下吸收和利用,因此需與螯合劑Na2·EDTA混合配制。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)類物質(zhì)一般分別配制成0.2~1.0mg/L的母液,用時(shí)按量吸取。某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不溶于水,需用不同溶劑進(jìn)行溶解,如NAA、2,4-D、IAA、IBA、GA3是醇溶性的,配制時(shí)先用少量95%酒精溶解,然后再用蒸餾水定溶;KT、6-BA、2ip、ZT先溶于少量1mol/L鹽酸中,然后再用蒸餾水定容;葉酸先

8、用少量稀氨水溶解后再定容。 配制好的各種母液倒入棕色瓶中,貼好標(biāo)簽,保存于4℃冰箱中備用。注意:母液保存于冰箱中的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),一般為1~2個(gè)月,當(dāng)母液出現(xiàn)沉淀或霉菌團(tuán)時(shí),則不能再使用。,(二)MS完全培養(yǎng)基的配制 以配制1 000mL MS完全培養(yǎng)基為例,配制全過(guò)程如下: 1、在潔凈的不銹鋼(或搪瓷)容器中加入1/2終體積 (500mL)的蒸餾水; 2、

9、按上表內(nèi)容規(guī)定的量,精確吸取各種母液,依次加入到 盛有1/2終體積蒸餾水的不銹鋼(或搪瓷)容器中,記錄 此時(shí)的總體積。注意:母液不能混合后加入,也不能同 時(shí)加入,必須依次緩慢加入,且要一邊加入一邊攪拌, 以免造成電解質(zhì)局部濃度過(guò)高而發(fā)生沉淀反應(yīng); 3、根據(jù)培養(yǎng)目的及要求,加入所需量的各種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物 質(zhì),記錄此時(shí)的總體積(如用于長(zhǎng)春

10、花葉愈傷組織的誘 導(dǎo):加入2,4-D 1.0mg/L、6-BA 0.5mg/L、 NAA 1.0mg/L、 KT 0.2mg/L);,4、加入30g蔗糖,5g聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone, PVP,抗氧化劑,防止或減輕植物組織褐化,也可用一定 量的維生素C、活性碳代替,或不加,視情況而定),充 分混勻后,補(bǔ)充蒸餾水至終體積1 000

11、mL,然后用1mol/L 鹽酸或1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)培養(yǎng)基至pH5.8;5、精確稱取15g瓊脂加入其中,在電磁爐上煮沸溶解瓊脂。此 過(guò)程需加以攪拌,防止瓊脂在鍋底燒焦或沸騰溢出;6、瓊脂溶解后,及時(shí)將培養(yǎng)基分裝于150mL三角瓶中,約 50mL/瓶,包膜密封,并于100KPa、121℃下滅菌15~20分 鐘。冷卻備用。,注意:培養(yǎng)基的pH直接影響培養(yǎng)物對(duì)離子的吸收,過(guò)酸或過(guò)堿不僅影

12、響到培養(yǎng)材料的生長(zhǎng),而且還影響到瓊脂的凝固,pH低于5.5時(shí),瓊脂凝固程度不好,pH高于6.0時(shí),瓊脂過(guò)度凝固,培養(yǎng)基變硬,不利于培養(yǎng)材料對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收及對(duì)代謝廢物的排放,從而影響培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)。培養(yǎng)基的pH可用酸度計(jì)測(cè)試,并用1mol/L鹽酸或1mol/L氫氧化鈉調(diào)整至適宜范圍(1mol/L鹽酸配制方法:取12mol/L HCl 84mL,加入蒸餾水定容至1 000mL;1mol/L氫氧化鈉配制方法:稱40g NaOH,溶解后加入蒸

13、餾水,定容至1 000 mL)。培養(yǎng)的植物材料其生長(zhǎng)最適pH范圍為5.6~6.0,培養(yǎng)基經(jīng)高壓高溫滅菌后,由于某些成分的降解或氧化,酸度會(huì)增加,pH一般可降低0.2,因此配制植物培養(yǎng)基時(shí),通常調(diào)整pH至5.8。,對(duì)于某些不能高壓高溫滅菌的試劑或藥品,必須過(guò)濾除菌,待培養(yǎng)基滅菌后未凝固之前(45~60℃)加入,并輕搖使混勻。這時(shí),每個(gè)培養(yǎng)容器的裝入量和過(guò)濾除菌后的物質(zhì)都要事先計(jì)算好,定量加入其中。植物培養(yǎng)基的配制程序可用流程圖表示如下:,

14、水 藥品 混勻 pH調(diào)整 瓊脂 加熱溶解 糖 玻璃器皿 水洗 干燥 分裝 密封

15、 接種 冷卻 高溫蒸汽滅菌,,,,,,,,,,,,,,,,實(shí)驗(yàn)二 長(zhǎng)春花葉片愈傷組織的誘導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過(guò)對(duì)長(zhǎng)春花葉片愈傷組織的誘導(dǎo),分析生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)長(zhǎng)春花葉片離體培養(yǎng)的作用,熟練掌握植物組織離體培養(yǎng)培的基本操作技術(shù),了解植物組織在離體培養(yǎng)條件下脫分化的條件及特點(diǎn)。二、實(shí)驗(yàn)原理 根據(jù)植物細(xì)胞全能性理論,利用MS培養(yǎng)基,加

16、入一定濃度的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)長(zhǎng)春花葉片組織進(jìn)行培養(yǎng),在光照或黑暗條件下均可誘導(dǎo)長(zhǎng)春花葉片組織發(fā)生脫分化而產(chǎn)生愈傷組織,這已經(jīng)在許多植物的組織培養(yǎng)中得到證實(shí),甚至在一些低等植物(如葫蘆蘚)中也得到了證實(shí)。,三、實(shí)驗(yàn)材料 1、實(shí)驗(yàn)設(shè)備:超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋、pH計(jì)、光照培養(yǎng) 箱、暗培養(yǎng)箱。 2、實(shí)驗(yàn)器材:三角瓶(150 mL)、棕

17、色瓶(100 mL, 500 mL,1000 mL)、長(zhǎng)柄鑷子、塑料燒杯(500 mL,l000 mL)、玻璃燒杯(100 mL、500 mL,l000 mL)、量筒(100 mL,500mL,

18、 1000 mL)、培養(yǎng)皿(∮=12 cm)、手術(shù)刀。 3、實(shí)驗(yàn)試劑:萘乙酸(Napthylacetic acid,NAA)、6-芐基 氨基嘌呤(6-Benzylamino purine,6-BA)、 2,4-二氯苯氧

19、乙酸(2,4- Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)、KT (kinetin,KT)、升汞(HgCl)、次 氯酸鈉 溶液、95%酒精、蔗糖(Sucrose)、瓊脂

20、 (Agar)、MS基本培養(yǎng)基母液。,4、試劑配制: (1)MS基本培養(yǎng)基母液:見實(shí)驗(yàn)一MS培養(yǎng)基配方表。 (2)1 mol/L NaOH:將40g NaOH溶解在1升蒸餾水中, 攪拌均勻。 (3)1 mol/L HCl:用蒸餾水將12mol/L的濃鹽酸稀釋12

21、 倍。 (4)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑母液: ① 0.2 mg/mL萘乙酸(NAA)溶液:精確稱取20mg 萘乙酸,用少量1 mol/L NaOH溶解后,用蒸餾水 稀釋并定容到100 ml。 ② 0.2 mg

22、/mL 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)溶液:精 確稱取20 mg 2,4-二氯苯氧乙酸,用少量1 mol/L 的NaOH溶解后,用蒸餾水稀釋并定容到100ml。,③ 0.2 mg/mL 6-芐氨基嘌呤(6-BA)溶液:精確稱取20 mg 6-芐基氨基嘌呤,用少量1 mol/L的HCl溶解后,

23、 用水稀釋并定容到100ml。 ④ 0.1 mg/mL KT(kinetin,KT)溶液:精確稱取10 mg KT,用少量1 mol/L的HCl溶解后,用水稀釋并定容 到100ml。 (5)75%的消毒酒精:精確量取75ml無(wú)水乙醇溶于100ml 蒸餾水中。 (6)0.1%升汞(HgCl)溶液:精確稱取1 g HgCl,

24、用蒸餾 水溶解并定容到1 000ml,盛裝于棕色試劑瓶中避光保 存。 (7)10%次氯酸鈉溶液:精確量取100ml次氯酸鈉溶液 溶,用蒸餾水溶解并定容到1 000ml,盛裝于棕色試劑 瓶中避光保存。 5、實(shí)驗(yàn)用植株:長(zhǎng)春花幼苗。,四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、MS完全培養(yǎng)基的配制: (1)將各種貯液按比例混合,配制

25、成MS培養(yǎng)基(具體操 作見實(shí)驗(yàn)一); (2)分別加入2,4-D 1.0mg/L、6-BA 0.5mg/L、 NAA 1.0mg/L、KT 0.2mg/L(此激素配方只適用于長(zhǎng)春 花葉片愈傷組織的誘導(dǎo)。對(duì)于不同植物的外植體來(lái) 說(shuō),影響其脫分化的激素種類和用量是不一樣的,

26、 必需通過(guò)正交試驗(yàn)來(lái)篩選才能獲得最佳配方);,(3)培養(yǎng)基中加入3%蔗糖,完全溶解后加蒸餾水至終體 積; (4)用l N的NaOH調(diào)整培養(yǎng)基至pH 5.8; (5)加入15g/L瓊脂,將培養(yǎng)基置電磁爐上煮沸至瓊脂完全 溶解,然后分裝到150ml三角瓶中,每瓶約70 ml,用 封口膜包扎瓶口; (6)將三

27、角瓶放入高壓滅菌鍋,于121℃、100KPa下滅菌 15~20 min。待壓力下降為零,溫度降低到105℃以 下,打開放氣閥排氣后,取出三角瓶,平放冷卻備用; (7)按上述方法高壓滅菌蒸餾水、空三角瓶、培養(yǎng)皿(帶 濾紙)及其它相關(guān)用具。,2、外植體的表面消毒與接種培養(yǎng): (1)取長(zhǎng)春花完全展開的幼葉,用自來(lái)水流水沖洗1~2 h;

28、(2)在超凈工作臺(tái)上用無(wú)菌水將葉片洗滌2~3次,每次1 min,然后浸于含75%酒精的無(wú)菌三角瓶中輕搖30s, 再移入0.1%升汞溶液中輕搖5~8 min或10%的次氯酸鈉 溶液中輕搖8~10 min(消除外植體表面的微生物), 無(wú)菌水洗滌3~5次(消毒液對(duì)外植體有很大傷害,必須 清洗干凈),每次3 mi

29、n;,(3)將消毒后的長(zhǎng)春花葉片置于無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)(有無(wú)菌濾 紙),用手術(shù)刀將無(wú)菌葉片切成5mm×5 mm大??; (4)將適宜大小的外植體接種到培養(yǎng)基上,每個(gè)三角瓶中接 入3~4塊葉外植體; (5)將接種好的三角瓶置于光培養(yǎng)箱(光周期為:光照16 h 和黑暗8 h,光照強(qiáng)度約l500 lx左右)或暗培養(yǎng)箱內(nèi)的培

30、 養(yǎng)架上,培養(yǎng)溫度為26±1℃; (6)每天觀察培養(yǎng)情況,記錄結(jié)果。如:接種培養(yǎng)后,外植 體(培養(yǎng)材料)在形態(tài)學(xué)上的變化情況,愈傷組織開始 出現(xiàn)時(shí)間、愈傷組織誘導(dǎo)率、形態(tài)、生長(zhǎng)速率、顏色變 化及質(zhì)地等指標(biāo)。預(yù)期結(jié)果見圖2-1。,,【思考題】 1、影響長(zhǎng)春花葉外植體脫分化的條件及特點(diǎn)是什

31、 么? 2、對(duì)于同一物種的不同組織來(lái)說(shuō),其愈傷組織誘 導(dǎo)條件是否一樣?為什么?,實(shí)驗(yàn)八 植物愈傷組織細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、  掌握植物愈傷組織細(xì)胞傳代培養(yǎng)的原理及操作方法。 2、 了解植物細(xì)胞培養(yǎng)的意義。二、實(shí)驗(yàn)原理 和動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)一樣,植物細(xì)胞傳代培養(yǎng)也是組織培養(yǎng)的常規(guī)保種方法之一,是幾乎

32、所有細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞不斷生長(zhǎng)增殖,培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分逐漸耗盡,同時(shí)也積累大量的代謝廢物,從而反饋抑制細(xì)胞的生長(zhǎng),甚至導(dǎo)致細(xì)胞褐化而死。這時(shí)需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足,營(yíng)養(yǎng)障礙,生長(zhǎng)條件惡化而死亡。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離后轉(zhuǎn)到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程稱為傳代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)所需。,三、實(shí)驗(yàn)材料 1、實(shí)驗(yàn)設(shè)備:超凈工作臺(tái)、pH計(jì)、高壓滅菌鍋、生化培

33、 養(yǎng)養(yǎng)箱。 2、實(shí)驗(yàn)器材:三角瓶(150 mL)、棕色瓶(100 mL, 500 mL,1000 mL)、長(zhǎng)柄鑷子、塑料燒 杯(500 mL,l000 mL)、玻璃燒杯(100

34、 mL、500 mL,l000 mL)、量筒(100 mL,500 mL,1000 mL)、培養(yǎng)皿 (∮=12 cm)、手術(shù)刀。 3、實(shí)驗(yàn)試劑:萘乙酸(Napthylacetic acid,NAA)、6-

35、 芐基氨基嘌呤(6-Benzylamino purine,6- BA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4- Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)、 KT(kinetin,KT)、95%酒精、

36、蔗糖 (Sucrose)、瓊脂(Agar)、MS基本培 養(yǎng)基母液。,4、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑母液: ① 0.2 mg/mL萘乙酸(NAA)溶液:精確稱取20mg萘乙 酸,用少量1 mol/L NaOH溶解后,用蒸餾水稀釋并定 容到100 ml。

37、 ② 0.2 mg/mL 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)溶液:精確稱取 20 mg 2,4-二氯苯氧乙酸,用少量1 mol/L的NaOH溶解 后,用蒸餾水稀釋并定容到100ml。 ③ 0.2 mg/mL 6-芐氨基嘌呤(6-BA)溶液:精確稱取20 mg 6-芐基氨基嘌呤,用少量1 mol/L的HCl溶解后,用

38、 水稀釋并定容到100ml。 ④ 0.1 mg/mL KT(kinetin,KT)溶液:精確稱取10 mg KT,用少量1 mol/L的HCl溶解后,用水稀釋并定容到 100ml。,5、75%的消毒酒精:精確量取75ml無(wú)水乙醇溶于100ml蒸 餾水中。 6、實(shí)

39、驗(yàn)材料:長(zhǎng)春花葉片愈傷組織細(xì)胞。,四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、MS完全培養(yǎng)基的配制: (1)將各種貯液按比例混合,配制成MS培養(yǎng)基(具體操 作見實(shí)驗(yàn)一); (2)分別加入2,4-D 0.5mg/L、6-BA 0.5mg/L、 NAA 0.5mg/L、KT 0.3mg/L(此激素配方只適用于長(zhǎng)春花

40、葉片愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)。對(duì)于不同的愈傷組織細(xì)胞 來(lái)說(shuō),影響其生長(zhǎng)的激素種類和用量是不一樣的,必 需通過(guò)正交試驗(yàn)來(lái)篩選才能獲得最佳配方);,(3)培養(yǎng)基中加入3%蔗糖,完全溶解后加蒸餾水至終體 積; (4)用l N的NaOH調(diào)整培養(yǎng)基至pH 5.8; (5)加入15g/L瓊脂,將培養(yǎng)基置電磁爐上煮沸至瓊脂完全溶

41、 解,然后分裝到150ml三角瓶中,每瓶約50 ml,用封口 膜包扎瓶口; (6)將三角瓶放入高壓滅菌鍋,于121℃、100KPa下滅菌 15~20 min。待壓力下降為零,溫度降低到105℃以下, 打開放氣閥排氣后,取出三角瓶,平放冷卻備用; (7)按上述方法高壓滅菌蒸餾水、空三角瓶、培養(yǎng)皿(帶濾

42、 紙)及其它相關(guān)用具。,2、外植體的接種與培養(yǎng): (1)用長(zhǎng)柄鑷子取新鮮的長(zhǎng)春花葉片愈傷組織細(xì)胞,接種 到新鮮培養(yǎng)基表面,每瓶3~4塊(每塊愈傷組織的大小 約為3mm×3 mm,重約0.5g); (2)將接種好的三角瓶置于生化培養(yǎng)箱中進(jìn)行暗培養(yǎng),培 養(yǎng)溫度為26±1℃;

43、 (3)每天觀察培養(yǎng)情況,記錄結(jié)果。如:傳代培養(yǎng)后,外 植體在形態(tài)學(xué)上的變化情況,愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)速 率、顏色變化及質(zhì)地等指標(biāo)。,注意:植物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)常采用新鮮、疏松、生長(zhǎng)良好的愈傷組織細(xì)胞作為外植體,一般為白色或淺黃色,用鑷子比較容易分離。但是,有些植物的愈傷組織細(xì)胞生長(zhǎng)致密(如長(zhǎng)春花愈傷組織細(xì)胞),用鑷子不易分離。因此,接種時(shí)先轉(zhuǎn)入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,再用手術(shù)刀將其

44、切成3mm×3 mm的愈傷組織塊,然后接種于新鮮培養(yǎng)基中,每瓶3~4塊。 培養(yǎng)過(guò)程見圖2-2和圖2-3。,,圖2-1 長(zhǎng)春花愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果A:葉愈傷組織B:莖愈傷組織 C:花蕊愈傷組織注:以上結(jié)果均于MS培養(yǎng)基上暗培 養(yǎng),誘導(dǎo)時(shí)間為24d。,C,B,A,,圖2-2 長(zhǎng)春花葉片愈傷組織細(xì)胞 MS培養(yǎng)基暗培養(yǎng)28d 接種量:

45、0.83±0.02g 鮮重增長(zhǎng)量:9.04±1.03g 增長(zhǎng)倍數(shù):10.84倍,圖2-3 長(zhǎng)春花花蕊愈傷組織細(xì)胞 MS培養(yǎng)基暗培養(yǎng)28d 接種量: 0.45±0.34g 鮮重增長(zhǎng)量: 9.07±0.93g 增長(zhǎng)倍數(shù):

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