尿液分析儀檢查

1、,,,,尿液分析儀檢查,Urine analyzer,黃 輝huanghui@tmmu.edu.cn 13594135402,教學(xué)要求,,,一、尿液分析儀概述,1956年Clinistix檢測(cè)試紙帶,1972年半自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀,1985年全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀,1987年尿液沉渣分析儀,,尿液分析儀發(fā)展歷史,一、尿液分析儀概述,尿液分析儀分類(lèi),尿干化學(xué)分析儀,尿沉渣分析儀,,一、尿液分析儀概述,發(fā)展趨勢(shì),,檢測(cè)參數(shù)增多檢

2、測(cè)速度提高應(yīng)用更加方便,按測(cè)試項(xiàng)目：八項(xiàng)、十項(xiàng)與十一項(xiàng)尿液分析儀按照自動(dòng)化程度：半自動(dòng)與全自動(dòng)尿分析儀,二、尿干化學(xué)分析儀,儀器分類(lèi),檢測(cè)膜塊與尿液中相應(yīng)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)顏色變化光源照射產(chǎn)生反射光儀器接收反射光轉(zhuǎn)換為電信號(hào)微處理器處理打印結(jié)果,二、尿干化學(xué)分析儀,工作原理,,,,,,,二、尿干化學(xué)分析儀,儀器組成,機(jī)械系統(tǒng)：將待檢試劑帶傳送到檢測(cè)部位，測(cè)試后排送到廢物盒。,光學(xué)系統(tǒng)：包括光源、單色光處理和光電轉(zhuǎn)換三部分。,電

3、路系統(tǒng)：電信號(hào)放大—模數(shù)轉(zhuǎn)換—處理—計(jì)算,光學(xué)系統(tǒng),二、尿干化學(xué)分析儀,發(fā)光二極管系統(tǒng),濾光片分光系統(tǒng),電荷耦合器件,發(fā)光二極管光學(xué)系統(tǒng),二、尿干化學(xué)分析儀,采用發(fā)光二極管（light emitting diode, LED)作為光源，波長(zhǎng)分別為660nm、620nm、555nm。,濾光片分光光學(xué)系統(tǒng),二、尿干化學(xué)分析儀,采用鹵鎢燈作為光源，通過(guò)光纖傳導(dǎo)至濾光片進(jìn)行分光，從510nm～690nm分為10個(gè)波長(zhǎng)。,電荷耦合器件光學(xué)系統(tǒng),二

4、、尿干化學(xué)分析儀,采用電荷耦合器件(charge coupling device, CCD)技術(shù)進(jìn)行光電轉(zhuǎn)換，把反射光分解為紅綠藍(lán)三原色，又將三原色中的每一種顏色細(xì)分為2592色素，整個(gè)反射光分為7776色素，可精確分辨顏色由深到淺的各種微小變化。,尿干化學(xué)試帶,二、尿干化學(xué)分析儀,單項(xiàng)試帶,多聯(lián)試帶,二、尿干化學(xué)分析儀,試帶組成,尼龍膜層：防止大分子物質(zhì)對(duì)反應(yīng)的污染。,碘酸鹽層：破壞維生素C等干擾物質(zhì)。,試劑層：與尿中所檢測(cè)化學(xué)物質(zhì)發(fā)

5、生反應(yīng)。,支持層：塑料片，起支持作用。,二、尿干化學(xué)分析儀,二、尿干化學(xué)分析儀,檢測(cè)參數(shù),pH,PRO,SG,GLU,BIL,URO,NIT,ERY,LEU,KET,VITC,……,酸堿度 （pH） 酸堿指示劑法 比重 （SG） 多聚電解質(zhì)解離法 葡萄糖 （GLU） 葡萄糖氧化酶—過(guò)氧化物酶法 蛋白質(zhì) （PRO） pH

6、指示劑蛋白質(zhì)誤差 酮體 （KET） 亞硝基鐵氰化鈉法 膽紅素 （BIL） 偶氮反應(yīng) 尿膽原 （URO） 醛反應(yīng)法或重氮反應(yīng)法 紅細(xì)胞 （ERY） 血紅蛋白類(lèi)過(guò)氧化物酶法 亞硝酸鹽（NIT） 亞硝酸鹽還原法 白細(xì)胞 （LEU） 白細(xì)胞酯酶法,二、尿干化學(xué)分析儀,檢測(cè)參數(shù),某患

7、者尿液標(biāo)本采用尿液干化學(xué)分析儀進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果如下： pH 8.0 SG 1.020 GLU (—) PRO (+) KET (—) BIL (—) URO（± ） ERY (—) NIT (—) LEU (—)

8、 VITC (+++) 請(qǐng)問(wèn)： 1.該檢驗(yàn)報(bào)告單可以直接發(fā)出嗎？ 2.需要對(duì)該尿液標(biāo)本進(jìn)行如何處理？,二、尿干化學(xué)分析儀,病例分析,試劑帶的批間差異；標(biāo)本對(duì)結(jié)果的影響；干擾物對(duì)紅、白細(xì)胞測(cè)定的影響；鏡檢法與干化學(xué)的相應(yīng)關(guān)系。,二、尿干化學(xué)分析儀,質(zhì)量控制,1.血紅蛋白尿或紅細(xì)胞破壞釋放出血紅蛋白。,加強(qiáng)與臨床醫(yī)師的溝通非常必要！,紅細(xì)胞檢查：干化學(xué)（+）、顯微鏡檢查（-）,2.尿液中有

9、熱不穩(wěn)定性酶或肌紅蛋白尿。,二、尿干化學(xué)分析儀,尿液中含有大量維生素C！,紅細(xì)胞檢查：干化學(xué)（-）、顯微鏡檢查（+）,加強(qiáng)與臨床醫(yī)師的溝通非常必要！,二、尿干化學(xué)分析儀,優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)本用量少；速度快；準(zhǔn)確度較高；適用于大批量標(biāo)本篩檢。缺點(diǎn)：不能代替顯微鏡檢查；不能判斷紅細(xì)胞形態(tài)；不適用于腎病患者；易受外源性物質(zhì)干擾。,二、尿干化學(xué)分析儀,方法學(xué)評(píng)價(jià),三、尿沉渣分析儀,三、尿沉渣分析儀,儀器分類(lèi),基于影像分析原理,基于流式細(xì)胞分析原理,三、

10、尿沉渣分析儀,基于影像分析原理,三、尿沉渣分析儀,基于影像分析原理,尿液標(biāo)本,離心沉淀,尿沉渣,,顯微攝像,,,,圖像識(shí)別,,結(jié)果報(bào)告,三、尿沉渣分析儀,基于流式細(xì)胞分析原理,光學(xué)系統(tǒng)：由氬激光、激光反射系統(tǒng)、流動(dòng)池、前向光采集器和前向光檢測(cè)器組成。,液壓系統(tǒng)：使細(xì)胞成單個(gè)的縱列。,電阻抗檢測(cè)系統(tǒng)：測(cè)定細(xì)胞體積和尿液電導(dǎo)率。,電子系統(tǒng)：處理電信號(hào)，進(jìn)行計(jì)算,菲啶(phenantridine): 主要使核酸成分DNA著色(黃

11、色熒光)，用于區(qū)別有核的細(xì)胞和無(wú)核的細(xì)胞。羧花氰(carborcyanine): 與細(xì)胞質(zhì)膜的脂層成分結(jié)合(綠色熒光)，主要用于區(qū)別細(xì)胞大小。,三、尿沉渣分析儀,細(xì)胞熒光染色,細(xì)胞熒光染色后圖片,三、尿沉渣分析儀,熒光強(qiáng)度（Fluorescent light intensity，F(xiàn)l）： 主要反應(yīng)細(xì)胞染色質(zhì)的強(qiáng)度前向熒光脈沖寬度（Forward fluorescent light intensit

12、y width，F(xiàn)lw）： 主要反映染色質(zhì)的長(zhǎng)度前向散射光強(qiáng)度（Forward scattered light intensity，F(xiàn)sc）： 反映細(xì)胞大小,三、尿沉渣分析儀,檢測(cè)原理,前向散射光脈沖寬度（Forward scattered light intensity width，F(xiàn)scw）：反映細(xì)胞長(zhǎng)度電阻抗大小：與細(xì)胞體積成正比,三、尿沉渣分析儀,檢

13、測(cè)原理,三、尿沉渣分析儀,三、尿沉渣分析儀,三、尿沉渣分析儀,三、尿沉渣分析儀,RBC 紅細(xì)胞WBC 白細(xì)胞EC 上皮細(xì)胞CAST 管型BACT 細(xì)菌Path.CAST病理管型SRC 小圓細(xì)胞YLC 酵母樣細(xì)胞X‘TAL 結(jié)晶SPERM 精子,Isomorphic RBC 均一性紅細(xì)胞 Dysmorphic RBC 非均一性紅細(xì)胞Non-Lysed RBC

14、 非溶血紅細(xì)胞數(shù)量 Conductivity 電導(dǎo)率,三、尿沉渣分析儀,紅細(xì)胞,紅細(xì)胞出現(xiàn)在第一和第二散射圖的左角，由于沒(méi)有細(xì)胞核和線(xiàn)粒體，所以熒光強(qiáng)度（FL）很弱。通過(guò)觀(guān)察尿中紅細(xì)胞數(shù)量可幫助血尿有關(guān)疾?。ㄈ缒I炎、膀胱炎、腎結(jié)石、腎結(jié)核等）的診斷和鑒別診斷。,三、尿沉渣分析儀,紅細(xì)胞,三、尿沉渣分析儀,白細(xì)胞,白細(xì)胞因有細(xì)胞核，產(chǎn)生高強(qiáng)度的前向熒光，白細(xì)胞出現(xiàn)在散射圖的中央。觀(guān)測(cè)尿液中白細(xì)胞數(shù)量可幫助如泌尿系統(tǒng)感染、

15、膀胱炎、結(jié)核與腫瘤等的診斷與鑒別診斷。,三、尿沉渣分析儀,白細(xì)胞,三、尿沉渣分析儀,上皮細(xì)胞,上皮細(xì)胞體積較大，散射光強(qiáng)度強(qiáng)，含有細(xì)胞核和線(xiàn)粒體，熒光強(qiáng)度也較強(qiáng)。由于各種上皮細(xì)胞產(chǎn)生散射光、熒光強(qiáng)度及電阻抗信號(hào)的差異較小，儀器不能完全區(qū)分哪一類(lèi)細(xì)胞，因此需要結(jié)合離心染色鏡檢才能得出準(zhǔn)確結(jié)果。,三、尿沉渣分析儀,上皮細(xì)胞,三、尿沉渣分析儀,管型,三、尿沉渣分析儀,管型,透明管型因體積較大和不含內(nèi)含物，可產(chǎn)生極高的前向散射光和微弱的熒光強(qiáng)度

16、，而病理管型因含內(nèi)含物，除產(chǎn)生極高的前向散射光外，也產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光強(qiáng)度。當(dāng)儀器標(biāo)出有病理管型存在時(shí)，需要結(jié)合離心鏡檢才能確定是那一種管型。,三、尿沉渣分析儀,管型,,,,,,三、尿沉渣分析儀,細(xì)菌,細(xì)菌體積小、含有DNA和RNA，所以前向散射光強(qiáng)度要比紅、白細(xì)胞弱，但熒光強(qiáng)度要比紅細(xì)胞強(qiáng)，而弱于白細(xì)胞，因此細(xì)菌分布在第一個(gè)散射圖紅細(xì)胞和白細(xì)胞的下方區(qū)域。,三、尿沉渣分析儀,細(xì)菌,尿沉渣分析儀除檢測(cè)上述參數(shù)外，還能標(biāo)出酵母細(xì)胞(YLC)、

17、精子細(xì)胞(SPERM)、結(jié)晶(X’TAL)，并能給出定量值。,三、尿沉渣分析儀,其他檢測(cè)項(xiàng)目,尿沉渣分析儀標(biāo)本用量少，檢測(cè)細(xì)胞多，檢測(cè)速度快，易于質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化；尿沉渣分析儀目前不能檢出滴蟲(chóng)、胱氨酸、脂肪滴或藥物結(jié)晶等，也不能鑒別異常細(xì)胞，細(xì)菌、酵母菌會(huì)干擾計(jì)數(shù)，對(duì)影紅細(xì)胞容易漏檢，不能明確病理管型的分類(lèi)。,三、尿沉渣分析儀,方法學(xué)評(píng)價(jià),,尿液干化學(xué)分析儀與尿沉渣分析儀的聯(lián)機(jī)分析,課堂小結(jié),尿干化學(xué)分析儀的檢測(cè)原理及參數(shù)；尿沉渣分

18、析儀的檢測(cè)原理及參數(shù)。,病例分析,某男，81歲，突然出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛癥狀前來(lái)就醫(yī)。 尿干化學(xué)分析結(jié)果： SG：1.010 KET：neg NIT：pos LEU：500/μl BIL：neg GLU：pos PRO：0.75g/L pH：7.0