2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、第四節(jié) 培養(yǎng)基,一、培養(yǎng)基配制應(yīng)遵循的原則二、培養(yǎng)基的類型,人工配制的、適合于不同微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。,用途:促使微生物生長(zhǎng);積累代謝產(chǎn)物;分離微生物菌種;鑒定微生物種類;微生物細(xì)胞計(jì)數(shù);菌種保藏;制備微生物制品。,,根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制不同的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng)物理化學(xué)條件適宜(PH)培養(yǎng)基無(wú)菌,選用價(jià)格低廉,資源豐富的原料,一、培養(yǎng)基配制應(yīng)遵循的原則,(一)培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的

2、營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn),即根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。 不同營(yíng)養(yǎng)類型的微生物,其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的需求差異很大。如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物質(zhì)組成。異養(yǎng)做生物的培養(yǎng)基至少需要含有一種有機(jī)物質(zhì),但有機(jī)物的種類需適應(yīng)所培養(yǎng)菌的特點(diǎn)。 按微生物的主要類類群來(lái)說(shuō),它們所需要的培養(yǎng)基成分也不同: 細(xì)菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 LB (Luria-Bertani) 放線菌:高氏一號(hào)

3、培養(yǎng)基 真菌:查氏合成培養(yǎng)基 PDA (Potato-Dextrose-Agar) 酵母菌; 麥芽汁 當(dāng)對(duì)試驗(yàn)菌營(yíng)養(yǎng)需求特點(diǎn)不清楚的時(shí)候,可以采用‘生長(zhǎng)譜’法進(jìn)行測(cè)定。,(二)營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng),●濃度過(guò)高——微生物的生長(zhǎng)起抑制作用,濃度過(guò)小——不能 滿足微生物生長(zhǎng)的需要。●碳氮比(C/N)直接影響微生物生長(zhǎng)與繁殖及代謝物的形成 與積累,故常作為考察培養(yǎng)基組成時(shí)的一個(gè)重要指標(biāo)

4、;,碳源中的碳原子的mol數(shù)氮源中所含的氮原子的mol數(shù),C/N比值=,●速效性氮(或碳)源與遲效性氮(或碳)源的比例●各種金屬離子間的比例,,(三)物理化學(xué)條件適宜,(1)pH: 各類微生物的最適生長(zhǎng)pH值各不相同: 細(xì) 菌:7.0~8.0放線菌:7.5~8.5 酵母菌:3.8~6.0霉 菌:4.0~5.8 在微生物的生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形

5、成與積累,培養(yǎng)基的初始pH值會(huì)發(fā)生改變,為了維持培養(yǎng)基pH值的相對(duì)恒定,通常采用下列兩種方式:內(nèi)源調(diào)節(jié):在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽;調(diào)節(jié)培 養(yǎng)基的碳氮比。外源調(diào)節(jié):按實(shí)際需要不斷向發(fā)酵液流加酸或堿液,(2)滲透壓和aw,滲透壓等滲溶液適宜微生物生長(zhǎng)高滲溶液細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離低滲溶液細(xì)胞吸水膨脹,直至破裂,大多數(shù)微生物適合在等滲的環(huán)境下生長(zhǎng),而有的菌如Staphyloco

6、ccus aureus則能在3mol/L NaCl的高滲溶液中生長(zhǎng)。能在高鹽環(huán)境(2.8~6.2/L NaCl)生長(zhǎng)的微生物常被稱為嗜鹽微生物(Halophiles)。,(四)根據(jù)培養(yǎng)基的應(yīng)用目的選擇原料及其來(lái)源,用于培養(yǎng)菌體種子的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)應(yīng)豐富,氮源含量宜高(碳氮比低);用于大量生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的培養(yǎng)基其氮源一般應(yīng)比種子培養(yǎng)基稍低,(但若發(fā)酵產(chǎn)物是含氮化合物時(shí),有時(shí)還應(yīng)提高培養(yǎng)基的氮源含量);若代謝產(chǎn)物是次級(jí)代謝產(chǎn)物時(shí)要考慮是否加

7、入特殊元素或特定的代謝產(chǎn)物;當(dāng)所設(shè)計(jì)的是大規(guī)模發(fā)酵用的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)重視培養(yǎng)基中各成份的來(lái)源和價(jià)格,應(yīng)選擇來(lái)源廣泛、價(jià)格低廉 的原料,提倡以粗代精,以廢代好。,按培養(yǎng)基成分分按培養(yǎng)基的用途分按物理性狀分,培養(yǎng)基類型,,合成培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基,基本培養(yǎng)基富集培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基,,,,二、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用,1.按培養(yǎng)基的成分分類,天然培養(yǎng)基complex medium 利用化學(xué)

8、成分還不清楚 或不恒定的天然有機(jī)物質(zhì)制成的培養(yǎng)基。麥汁培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基synthetic medium 利用化學(xué)成分完全了解的高純化學(xué)試劑制成的培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基(g/L)、高氏一號(hào)培養(yǎng)基,半合成培養(yǎng)基semi- synthetic medium 由部分天然有機(jī)物和部分化學(xué)試劑制成的培養(yǎng)基。馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基,一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的來(lái)源與成分,2.據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分類,液體培養(yǎng)基

9、 liquid medium 呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中未加任何凝固劑。常用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)以及實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用方面的研究。 固體培養(yǎng)基 solid medium 外觀呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。加一定量的凝固劑。常用來(lái)進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏。 半固體培養(yǎng)基 semisolid medium 呈當(dāng)容器倒放時(shí)不致流下、但在劇烈振蕩后則能破散狀態(tài)的凝固性固體培養(yǎng)

10、基。瓊脂的加量為0.5%左右。半固體培養(yǎng)基常用來(lái)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征、分類鑒定及噬菌體的效價(jià)。,瓊脂和明膠的區(qū)別,3.按照培養(yǎng)基的特殊用途分類,加富培養(yǎng)基 為分離某種微生物而專門設(shè)計(jì), 加入了助長(zhǎng)該類微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。 選擇培養(yǎng)基 加入了某種化學(xué)物質(zhì)以抑制不需要的菌的生長(zhǎng), 從而促進(jìn)目的菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。(正選擇、反選擇) 鑒別培養(yǎng)基 添加了某種試劑或化學(xué)藥品而對(duì)特定的微生

11、物起鑒別作用的培養(yǎng)基。,EMB(Eosin Methylene Blue)培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+,故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈深紫色。從菌落表面反光還可看到綠色金屬閃光。而產(chǎn)酸弱的菌株的菌落呈棕色。不發(fā)酵乳酸的菌落無(wú)色透明。,鑒別腸道細(xì)菌的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,伊紅美藍(lán)(EMB,Eosin Methylene Blue)培養(yǎng)基,一些鑒別培養(yǎng)基,,種子培養(yǎng)基 seed me

12、dium 培養(yǎng)發(fā)酵用的健壯的種子的培養(yǎng)基。發(fā)酵培養(yǎng)基 fermentation medium 供菌種生長(zhǎng)、繁殖和合成某種預(yù)定的發(fā)酵產(chǎn)物的培養(yǎng)基。繁殖和保藏培養(yǎng)基 細(xì) 菌:營(yíng)養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基 放線菌:馬鈴薯培養(yǎng)基,高氏一號(hào)培養(yǎng)基 酵 母:麥汁培養(yǎng)基,YEPD(用于酵母原生質(zhì)體融合)培養(yǎng)基 霉 菌:麥汁培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖與需要的基本營(yíng)養(yǎng)物

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