艾滋病檢測(cè)質(zhì)量管理ppt課件

1、艾滋病檢測(cè)質(zhì)量管理,山西省疾病預(yù)防控制中心郭曉黎,質(zhì)量管理(Quality management,QM),對(duì)確定和達(dá)到質(zhì)量要求所需的職能和活動(dòng)的管理。是制定和實(shí)施質(zhì)量方針的一系列管理職能，通過質(zhì)量體系來實(shí)現(xiàn)質(zhì)量管理。,質(zhì)量保證(Quality Assurance, QA),（一）    定義 質(zhì)量保證是指從接收檢驗(yàn)標(biāo)本起，到實(shí)驗(yàn)室發(fā)出報(bào)告止，為確保實(shí)驗(yàn)室最終報(bào)告結(jié)果的正確性所進(jìn)行的全過程，包括

2、采取各種行政和技術(shù)上的措施和方法。,質(zhì)量保證,為了提供足夠的信任,表明實(shí)體能夠滿足質(zhì)量要求.而在質(zhì)量體系中實(shí)施,并根據(jù)需要進(jìn)行證實(shí)的,全部有計(jì)劃和有系統(tǒng)的活動(dòng) (GB/T 6583 1994) 為確保實(shí)驗(yàn)室所報(bào)告的最終結(jié)果的正確性所采取的所有程序控制 (逆轉(zhuǎn)錄病毒檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室診斷及基本的質(zhì)量控制 里爾.康斯坦丁),質(zhì)量保證 (Cont.),質(zhì)量保證是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的基本條件，其實(shí)施程度直接影響試驗(yàn)結(jié)果和最后報(bào)告的每個(gè)參數(shù)。質(zhì)量保

3、證取決于良好的質(zhì)量控制程序，并經(jīng)良好的質(zhì)量評(píng)價(jià)程序加以鑒定。因此，要求所有的實(shí)驗(yàn)室工作人員有責(zé)任時(shí)刻注意解決影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的每個(gè)環(huán)節(jié)上可能出現(xiàn)的問題。,質(zhì)量保證 (Cont.),管理是關(guān)鍵 (組織結(jié)構(gòu)、崗位責(zé)任)硬件要規(guī)范（試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境）人員要合格 (人員素質(zhì)與培訓(xùn) )操作按文件 （制度、操作指導(dǎo)、質(zhì)量控制及質(zhì)量記錄）,1． 行政支持,HIV篩查實(shí)驗(yàn)室和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證是整個(gè)艾滋病檢測(cè)工作的組成部分。要實(shí)施全面質(zhì)量

4、保證，除了各級(jí)衛(wèi)生行政部門加強(qiáng)監(jiān)督，責(zé)成專門機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)日常管理工作外，應(yīng)要求實(shí)驗(yàn)室所在單位加強(qiáng)自身管理，保證實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)人和檢測(cè)人員相對(duì)穩(wěn)定，并給予人力和物力的支持。,組織機(jī)構(gòu)的建立,(一) 明確實(shí)驗(yàn)室的工作職責(zé) (二) 實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證組織機(jī)構(gòu) (三) 明確崗位責(zé)任,組織機(jī)構(gòu)的建立,科主任責(zé)任：①建立質(zhì)量體系；②抓質(zhì)量管理；③抓質(zhì)量體系的評(píng)審；④簽字識(shí)別。 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量負(fù)責(zé)人職責(zé)：①直接參與實(shí)驗(yàn)室

5、方針、政策的制定；②全面負(fù)責(zé)質(zhì)量體系的有效運(yùn)用；③檢驗(yàn)報(bào)告的質(zhì)檢簽字制度；④儀器設(shè)備的定期校正和強(qiáng)檢。,組織機(jī)構(gòu)的建立,檢驗(yàn)技術(shù)人員責(zé)任：①每日按時(shí)消毒，搞好實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生，并記錄、簽字；②檢查儀器、冷柜、冰箱、溫箱，記錄使用情況，并簽字；③按質(zhì)量手冊(cè)規(guī)定程序操作試驗(yàn)，并填寫報(bào)告，簽字；④按規(guī)定進(jìn)行檢驗(yàn)的質(zhì)控工作，并作好記錄，簽字。,2.實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化,HIV篩查實(shí)驗(yàn)室和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及其建筑、設(shè)施、設(shè)備必須符合《規(guī)范》要求。,2.實(shí)驗(yàn)室規(guī)

6、范化,初篩實(shí)驗(yàn)室：有獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)用房（或至少有專用的檢測(cè)臺(tái)），污染區(qū)和清潔區(qū)要分開。從我國HIV抗體檢測(cè)工作發(fā)展要求，要以酶聯(lián)免疫法測(cè)定考慮所需的檢測(cè)器材，包括酶標(biāo)讀數(shù)儀和洗板機(jī)、精確的移液器、專用的普通冰箱、低溫冰箱、離心機(jī)以及各種消毒與污物處理設(shè)施、安全防護(hù)用品和恒溫設(shè)施。對(duì)大型開放性實(shí)驗(yàn)室中設(shè)置初篩實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)放在房間的末端，按消毒隔離要求，可用透明材料半墻隔離。,2.實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化,HIV檢測(cè)點(diǎn):可在醫(yī)院或鄉(xiāng)鎮(zhèn)（中心）衛(wèi)生院內(nèi)，有一間

7、實(shí)驗(yàn)室或在檢驗(yàn)科內(nèi)設(shè)一個(gè)專臺(tái)，并可存放試劑、試驗(yàn)器材和登記本、檔案等專用物品。 (《全國艾滋病檢測(cè)工作規(guī)范（第二版）》 ),3.人員培訓(xùn)及其評(píng)價(jià),實(shí)驗(yàn)室人員必須接受過國家或省級(jí)HIV抗體確認(rèn)中心舉辦的HIV抗體檢測(cè)學(xué)習(xí)班培訓(xùn)并獲得合格證書才能上崗操作。,3.人員培訓(xùn)及其評(píng)價(jià),各級(jí)實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該通過定期和不定期的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)和在崗培訓(xùn)，從不同渠道不斷地提高自己的檢驗(yàn)水平。 在開展質(zhì)控前，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員都應(yīng)對(duì)質(zhì)控的重要性、基

8、礎(chǔ)知識(shí)和一般方法有較充分的了解，并在質(zhì)控的實(shí)際過程中不斷進(jìn)行培訓(xùn)提高。,3.人員培訓(xùn)及其評(píng)價(jià),實(shí)驗(yàn)室主管人員必須具有較高的質(zhì)量意識(shí)，領(lǐng)導(dǎo)整個(gè)實(shí)驗(yàn)室工作人員參與質(zhì)量管理工作，并對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員定期作出評(píng)價(jià)，包括工作的準(zhǔn)確性、工作效率、執(zhí)行安全條例和規(guī)章制度、職業(yè)道德、出勤率以及上崗資格等。,實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的評(píng)價(jià),工作質(zhì)量工作數(shù)量工作關(guān)系安全考勤職業(yè)道德相互培訓(xùn)工作時(shí)間薪水繼續(xù)教育,對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作的要求,1.標(biāo)本的采集、運(yùn)送

9、和處理  標(biāo)本的采集、運(yùn)送和處理必須符合《規(guī)范》要求。2．檢測(cè)結(jié)果的判定及其程序  參見《規(guī)范》第3－6 頁。3．檢驗(yàn)方法、儀器和試劑盒的選擇  參見《規(guī)范》. 各HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室在使用試劑時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選擇經(jīng)過臨床評(píng)估質(zhì)量?jī)?yōu)良的試劑盒。4．設(shè)備維修與校準(zhǔn)  實(shí)驗(yàn)室中的設(shè)備必須定期進(jìn)行維修與校準(zhǔn)，并制定設(shè)備維修與校準(zhǔn)的制度。,設(shè)備維修與校準(zhǔn) (1),（1

10、）ELISA 洗板機(jī)與酶標(biāo)儀 (推薦方法)：每天：每次操作要按要求設(shè)立對(duì)照。核對(duì) 酶標(biāo)儀濾光片波長(zhǎng)，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件，不沾灰塵每月：洗滌時(shí)檢查各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求，這是保證各孔洗滌均衡一致的前提。,設(shè)備維修與校準(zhǔn) (1),每年：檢查、清洗濾光片，如果濾光片出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換，根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的所用波長(zhǎng)光密度的

11、精密度進(jìn)行校驗(yàn)，測(cè)定20次，計(jì)算精密度。精密度應(yīng)該控制在廠家說明書中所規(guī)定的范圍 ( 建議請(qǐng)廠方代表校驗(yàn) )。校驗(yàn)結(jié)果要有記錄，保留測(cè)定原始結(jié)果。根據(jù)實(shí)際使用情況更換主要設(shè)備（如洗板機(jī)、全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)）內(nèi)的所有液體裝置和管子(要求廠方代表維修 )。,設(shè)備維修與校準(zhǔn) (2),移液器 ( 包括單頭和多頭移液器 ) 是實(shí)驗(yàn)室中重要的基本器具，一年至少應(yīng)該標(biāo)定或校準(zhǔn)二次，若發(fā)現(xiàn)移液器有異常情況，應(yīng)該立即進(jìn)行標(biāo)定。移液器標(biāo)定方法包括吸取有色溶

12、液進(jìn)行光譜分析、吸取蒸餾水稱量校準(zhǔn)、吸取放射性同位素計(jì)數(shù)校準(zhǔn)，以及使用配套校準(zhǔn)盒等等。特別要注意使用多頭移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)和準(zhǔn)確的加樣。移液器的精密度可根據(jù)生產(chǎn)移液器廠家說明書中所規(guī)定的范圍進(jìn)行校準(zhǔn)。推薦在檢測(cè)過程中，每個(gè)加樣工序使用專用的移液器。,設(shè)備維修與校準(zhǔn) (3),,移液器: 用蒸餾水稱量標(biāo)定移液器方法(參考芬蘭Labsystems移液器標(biāo)定方案),設(shè)備維修與校準(zhǔn) (3),在一室溫為22 ℃的小型工作室(無

13、風(fēng))中，在萬分之一級(jí)別天平上放置一個(gè)小三角燒瓶，用待標(biāo)定的移液器吸取蒸餾水( 隔夜存放 )加入小三角燒瓶?jī)?nèi)底部，每次稱重后計(jì)量，去皮重后再加蒸餾水，連續(xù)加蒸餾水10次。加蒸餾水的量根據(jù)待標(biāo)定的移液器不同規(guī)格而不同，見下表。移液器標(biāo)定合格后，在移液器上貼上合格標(biāo)簽，標(biāo)明日期。在移液器標(biāo)定記錄中填寫移液器規(guī)格、編碼、10次標(biāo)定稱量、標(biāo)定日期和標(biāo)定人簽名。移液器10次標(biāo)定稱量在所要求的重量范圍內(nèi)為合格移液器；不合格移液器要根據(jù)移液器生產(chǎn)廠家所

14、推薦的方法進(jìn)行校準(zhǔn)。,4．文件和文件管理原則,（一）操作規(guī)程和操作手冊(cè) 每個(gè)實(shí)驗(yàn)都應(yīng)有操作規(guī)程或操作手冊(cè)，要準(zhǔn)確、規(guī)范，妥善保管，每個(gè)檢驗(yàn)人員都能隨時(shí)查閱。,4．文件和文件管理原則,（3） 實(shí)驗(yàn)室工作人員不但應(yīng)注重試驗(yàn)，而且應(yīng)重視記錄?！。涗泴?shí)驗(yàn)室溫度、試劑廠名稱和批號(hào)?！。敿?xì)的記錄是分析、統(tǒng)計(jì)、總結(jié)的基礎(chǔ)。（4） 資料的可追查性?。?dāng)報(bào)警信號(hào)發(fā)出后，可以追查原始資料和原始操作

15、記錄。?。暾Y料將為科研和法律訴訟提供可靠的證據(jù)。（5） 更改數(shù)據(jù)或文字　?。匆?guī)則進(jìn)行,4．文件和文件管理原則,(二) 、登記制度（1） 記錄是為已完成的活動(dòng)或得到的結(jié)果提供客觀證據(jù)的文件。（2） 記錄有一定格式，相應(yīng)的表格經(jīng)過實(shí)踐和評(píng)審使之完善。,4．文件和文件管理原則,（三）存檔原則 1. 文件和試驗(yàn)記錄存檔，一般應(yīng)為3年～5年期限。 2. 存檔的資料不應(yīng)隨便堆放，應(yīng)按一定方式編號(hào)，便于查詢?！?/p>

16、　　查詢不到的存檔資料等于沒有存檔。 3. 資料的存檔制度、查詢制度、借閱制度、保密制度應(yīng)健全。,4．文件和文件管理原則,4. 資料是實(shí)驗(yàn)室的公有財(cái)產(chǎn)，即使是一個(gè)人做的實(shí)驗(yàn)，做的記錄，也不可以任意將資料帶走、借走、丟失、不歸還或更改。 5. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有人專職或兼職任資料保管員，以便查詢。查不到的資料等于沒有做記錄，也等于沒有做前面的一切有關(guān)工作，因此，檢驗(yàn)人員必須重視記錄和存檔工作。,５．HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室文件管理,（1

17、）建立標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件(SOP)（2）建立實(shí)驗(yàn)原始記錄表 （3）建立 HIV 抗體檢測(cè)程序（4）填寫檢測(cè)結(jié)果表 （5）建立標(biāo)本的登記記錄,５．HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室文件管理,實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后，有關(guān)參數(shù)應(yīng)該及時(shí)登記在標(biāo)本的登記記錄中，包括受檢者的姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗(yàn)結(jié)果( 包括初篩、復(fù)檢、確證 )、送檢日期、報(bào)告日期、備注 ( 必要時(shí)記錄通信地址 )。,５．HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室文件管理,（6）建立

18、HIV 陽性標(biāo)本的保存記錄 記錄中填寫陽性標(biāo)本血清/血漿的儲(chǔ)存量、標(biāo)本儲(chǔ)存溫度、標(biāo)本儲(chǔ)存起始時(shí)間以及標(biāo)本保管人姓名。所有經(jīng)確認(rèn)的陽性標(biāo)本，包括實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級(jí) HIV 抗體確認(rèn)中心或省級(jí)衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。,５．HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室文件管理,（7）建立實(shí)驗(yàn)室安全措施 參見《規(guī)范》附件一，第9頁。（8）文件存檔 原始記錄包括實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、膜反應(yīng)條帶或其照片、檢測(cè)

19、記錄表、標(biāo)本登記記錄、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等重要記錄都應(yīng)該妥善存檔保存15年以上。推薦同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。內(nèi)含病人姓名的所有工作記錄一定要保密。,修訂日期：2000-07-01 第Ⅰ章 第1頁共1頁 修訂次數(shù)：0 質(zhì)量手冊(cè) 目錄 章節(jié)號(hào)

20、 主 題 Ⅰ 頒布令 Ⅱ 目錄 Ⅲ 文件修改歷史記錄 Ⅳ 公正聲明 Ⅴ 質(zhì)量手冊(cè)管理

21、Ⅵ 前言 Ⅶ 術(shù)語和定義 Ⅷ 目的和適用范圍 1 質(zhì)量管理體系 2 組織和管理 3 文件和資

22、料控制 4 人員 5 設(shè)施與環(huán)境條件 6 設(shè)備 7 測(cè)量的可追溯性

23、 8 檢驗(yàn)申請(qǐng)、要求的評(píng)審 9 分包 10 外部服務(wù)與供給 11

24、 取制樣 12 樣品處理 13 檢驗(yàn)與檢驗(yàn)方法 14 檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量保證

25、 15 結(jié)果報(bào)告 16 對(duì)客戶的服務(wù)與客戶反饋 17 不合格檢驗(yàn)工作的控制 18

26、 糾正與預(yù)防措施 19 內(nèi)部審核與管理評(píng)審 20 記錄  編碼：JSIQ-CJ-I-01-B

27、修訂日期：2000-07-01,操作程序文件(SOP),SOP 是書面質(zhì)量體系中的一個(gè)很重要的部分。SOP是指導(dǎo)完成檢測(cè)工作的一整套書面操作指南，因而每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)就本實(shí)驗(yàn)室所有重要工作制定相應(yīng)的SOP。每一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目都應(yīng)該制定一份SOP，其中包含有詳細(xì)的操作程序，例如實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)條件(溫度等)、儀器的使用和維護(hù)、試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的使用等(設(shè)備和試劑盒說明書作為附錄)，以避免或減少因不同的操作者所引起的誤差。SOP由各崗位工作人員起草，

28、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人審定。實(shí)驗(yàn)人員在操作時(shí)應(yīng)該嚴(yán)格按照SOP進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室主管人員應(yīng)該督查實(shí)驗(yàn)人員執(zhí)行SOP。必要時(shí)，SOP中的內(nèi)容，如說明書或相關(guān)內(nèi)容，應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)室主管人員的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)行修訂，每年至少修訂一次。修訂后的SOP按審批程序批準(zhǔn)后使用。,操作程序文件(SOP)內(nèi)容,1）清楚、簡(jiǎn)潔的標(biāo)題和統(tǒng)一的SOP 編號(hào)2）SOP編寫和修改日期3）編寫和修訂SOP的人員姓名4）方法、目的和原理5）相應(yīng)的職業(yè)規(guī)范6）檢測(cè)設(shè)備和試劑7）參考其他

29、包含相關(guān)步驟的SOP8）健康和安全操作指南 ( 參考《規(guī)范》附件一，實(shí)驗(yàn)室安全實(shí)施 SOP )9）每一操作步驟和質(zhì)控步驟用編號(hào)描述10）結(jié)果的討論和報(bào)告以及出現(xiàn)問題時(shí)所采取的措施11）附錄，包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說明書等。,ELISA實(shí)驗(yàn)SOP,山西省艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室SOP-ELISA.doc,SOP和所有其它文檔的普遍特征,實(shí)驗(yàn)室所有人員都可容易查取所有職員熟悉崗位和內(nèi)容所有程序符合當(dāng)前實(shí)際情況SOP

30、和其他書面程序由作者和/或主任簽署和標(biāo)明明日期– 版本控制所有原始記錄和報(bào)告簽署和標(biāo)明日期用墨涂改，簽署和標(biāo)明日期, 而非“擦白”掌握安全存放的文檔的分布清單確定各種類型文件存放的時(shí)間.,質(zhì)量控制(Quality Control, QC),（一）    定義 質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過程中必須采取的各種措施。,質(zhì)量控制,為達(dá)到質(zhì)量要求所采取的作業(yè)技術(shù)和活動(dòng).1.質(zhì)

31、量控制包括作業(yè)和活動(dòng), 其目的在于監(jiān)視過程,并排除質(zhì)量環(huán)節(jié)中所有階段中導(dǎo)致不滿意的原因,以取得經(jīng)濟(jì)效益.2.質(zhì)量控制和質(zhì)量保證的某些活動(dòng)是相互聯(lián)系的. (GB/T 6583 1994)在每一次實(shí)驗(yàn)過程中所必須采取的一切監(jiān)測(cè)手段以確保實(shí)驗(yàn)工作的正常進(jìn)行 (逆轉(zhuǎn)錄病毒檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室診斷及基本的質(zhì)量控制 里爾.康斯坦丁),實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制　?、俨杉瘶?biāo)本前病人的準(zhǔn)備；?、谡_的標(biāo)本采集方法；?、蹨?zhǔn)確及時(shí)的運(yùn)送標(biāo)本；　④實(shí)驗(yàn)前正確地處理和

32、保存標(biāo)本。,實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制,①質(zhì)控品的準(zhǔn)備采集標(biāo)本前病人的準(zhǔn)備；　②試劑盒的評(píng)價(jià)選擇正確的標(biāo)本采集方法；?、坶_展Levey-Jennings 質(zhì)控圖質(zhì)控（或“即刻法”質(zhì)控）。,實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制,①實(shí)驗(yàn)后準(zhǔn)確填寫檢驗(yàn)結(jié)果；　②及時(shí)發(fā)出報(bào)告；?、壅_地解釋檢驗(yàn)結(jié)果的臨床意義。,基本要求,標(biāo)準(zhǔn) 1．試劑種類 必須使用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)或注冊(cè)，經(jīng)過中國藥品生物制品檢定所批批檢定合格的國產(chǎn)或進(jìn)口 HIV 抗體初篩和確認(rèn)檢測(cè)試劑。初

33、篩用的 HIV 檢測(cè)試劑必須是 HIV－1/2 混合型。在選用試劑時(shí)應(yīng)優(yōu)先選擇經(jīng)過臨床評(píng)估質(zhì)量?jī)?yōu)良的試劑盒。2．必須使用在有效期內(nèi)且保存條件符合要求的診斷試劑3．標(biāo)本使用 冰凍的標(biāo)本待全部融化后必須充分搖勻。,基本要求,4．必須按照 SOP 中規(guī)定的要求進(jìn)行操作 包括進(jìn)行檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)條件如陽性對(duì)照和陰性對(duì)照的設(shè)置、試劑、標(biāo)本加樣量、孵育時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌程序和次數(shù)等。5．標(biāo)本質(zhì)量 在實(shí)驗(yàn)前必須檢查所有待

34、檢標(biāo)本的質(zhì)量，如有脂血、溶血或污染的標(biāo)本原則上不能使用，必須重新采集標(biāo)本。若無法重新采集標(biāo)本，必須在室主管批準(zhǔn)下使用，在檢測(cè)結(jié)果中應(yīng)該注明該份標(biāo)本的情況。,質(zhì)控血清,1．內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清 內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清是指每個(gè)試劑盒內(nèi)廠方提供的一套陰性和陽性對(duì)照2．外部對(duì)照質(zhì)控血清 外部對(duì)照質(zhì)控血清是各級(jí)實(shí)驗(yàn)室為了監(jiān)控每次檢測(cè)的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及檢驗(yàn)試劑盒批間差異而設(shè)置的一套陰性和陽性對(duì)照血清。設(shè)立外部對(duì)照還可以提示標(biāo)本處

35、于臨界值狀態(tài)時(shí)的檢驗(yàn)操作情況。,外部對(duì)照質(zhì)控血清的組成,理想的外部對(duì)照應(yīng)該包括陽性對(duì)照、弱陽性對(duì)照、臨界值對(duì)照和陰性對(duì)照。在每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置一個(gè)單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對(duì)照。這個(gè)弱陽性對(duì)照的值以設(shè)定在該試劑盒Cut-off值的2－3倍為宜。,外部對(duì)照質(zhì)控血清的來源,1）通過向有關(guān)機(jī)構(gòu)購買獲得2）通過實(shí)驗(yàn)室制備獲得 ( 比較經(jīng)濟(jì)的方法 )① 混合試劑盒內(nèi)部對(duì)照血清，等量分裝。② 混合HIV抗體陽性或陰性人血清，3000轉(zhuǎn)/分鐘離

36、心15分鐘，用0.2?m 生物濾膜過濾除菌后再進(jìn)行56 ℃30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對(duì)照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強(qiáng)陽性血清并經(jīng)標(biāo)定后得到。弱陽性對(duì)照的OD值以2－3倍于Cut-off為宜。,ELISA反應(yīng)強(qiáng)度曲線,,,OD,樣品強(qiáng)度,,外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存,1）外部對(duì)照血清或血漿的一次制備量應(yīng)該足夠本實(shí)驗(yàn)室一年使用2）外部對(duì)照血清應(yīng)該均一、無菌3）外部對(duì)照血清標(biāo)定后應(yīng)該等量分裝，每個(gè)分裝的量應(yīng)足夠

37、一周使用,外部對(duì)照質(zhì)控血清的保存,4）外部對(duì)照應(yīng)該分類作好標(biāo)記，使用不同顏色的標(biāo)簽5）外部對(duì)照血清應(yīng)該存放在－70 ℃，如無條件則存放在非自動(dòng)除霜的－20 ℃冰箱6）外部對(duì)照血清一旦融解以后應(yīng)該存放在 2－8 ℃，一周后必須棄去，不能重新凍存。,外部對(duì)照質(zhì)控血清的使用,原則上每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對(duì)照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)操作的一致性和結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。,質(zhì)控圖(1),X,X+S

38、,X-S,X-2S,X+2S,,,,,,建立質(zhì)控圖參數(shù),對(duì)HIV抗體檢測(cè)(ELISA)外部對(duì)照質(zhì)控血清的評(píng)價(jià)采用多次測(cè)定的OD值的均值上下各兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的范圍，即外部對(duì)照OD值的95％可信限為 x ? 2s。各個(gè)外部對(duì)照的標(biāo)定即確定外部對(duì)照的均值和可信限，可用幾個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)如均值( x )、標(biāo)準(zhǔn)差(s)以及變異系數(shù)(cv)來確定可信限。① 算術(shù)平均值( x )代表一組OD值數(shù)的平均值。② 標(biāo)準(zhǔn)差(s) ③ 變異系數(shù)(cv)，,,范例

39、：參考鄭懷競(jìng)主編《免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控》，1997年出版。,x 計(jì)算公式為： Σx x = ── N s 計(jì)算公式為： ─────── ∑( xn - x )2 s =

40、 ─────── N cv 計(jì)算公式為： s cv = ── x 100 % x,,,,,,,,通過上表，計(jì)算S/CO值的均值（x），標(biāo)準(zhǔn)差（s）和變異系數(shù)（cv） x =1.72 s =0.29

41、 cv =16.9% 根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制室內(nèi)質(zhì)控框架圖, 開始質(zhì)量控制,,質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖),質(zhì)控圖的判定和分析,如果檢驗(yàn)進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)時(shí)，質(zhì)控對(duì)照值超出 ? 2s，則本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能被接受( 失控 )。,質(zhì)控圖的判定和分析,位移：如果幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對(duì)照值 (3-5次) 都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化 ( 失控 )。 引起位移的原因有使用新批號(hào)的試劑盒、使用新

42、試劑、實(shí)驗(yàn)員的更換、孵育溫度的改變、儀器 ( 移液器 ) 故障等。,質(zhì)控圖的判定和分析,趨勢(shì)：當(dāng)幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對(duì)照值(5-7個(gè))幾乎按一個(gè)方向分布時(shí)稱之為趨勢(shì)(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準(zhǔn)確等。 發(fā)生漂移和趨勢(shì)的最常見的原因是試劑(如酶標(biāo)記物)或?qū)φ盏氖А?質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),a．可以先進(jìn)行最佳條件下的變異測(cè)定，即在最佳條件下(人、儀器、試劑、實(shí)驗(yàn)室等因素)對(duì)同一批質(zhì)控血清連續(xù)進(jìn)行測(cè)

43、定20次以上，獲得一組數(shù)據(jù)，求 x 和s值。然后求出常規(guī)條件下的 x 和 s。如果常規(guī)條件下的 x 和s 值與最佳條件下的 x 和s值比較接近，則可以接受。若不作最佳條件下的測(cè)定，可以用本室以往處于控制狀態(tài)下的數(shù)值替代。,質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),b．采用S/CO比值制圖要比單用OD或A值制圖的方法給出更為精確的評(píng)估，因?yàn)樗鼘⒚看?每天OD值的浮動(dòng)考慮在內(nèi)。從S/CO質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對(duì)照值的漂移和趨勢(shì)。,質(zhì)量控制圖建立和

44、分析的注意要點(diǎn),c． 由專人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖，每月(月末)定期召開質(zhì)量控制會(huì)，討論本月檢測(cè)的質(zhì)量控制情況，。檢驗(yàn)人員在每次檢驗(yàn)之前，了解一下質(zhì)控圖的結(jié)果，做到心中有數(shù)。,質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),d． 建議長(zhǎng)期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒( 各實(shí)驗(yàn)室本身可以進(jìn)行試劑盒質(zhì)量的比較 )。由于不同廠家生產(chǎn)的ELISA試劑盒所使用的HIV抗原的構(gòu)成(env,gag或pol區(qū))以及使用比例不同，因此對(duì)同一標(biāo)本的反應(yīng)會(huì)有差異，表現(xiàn)在A值相差較

45、大，對(duì)外部對(duì)照質(zhì)控血清結(jié)果的分析造成困難。,質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),e、如果改用新批號(hào)試劑盒，必須重新制作室內(nèi)質(zhì)控框架圖，并建議對(duì)新舊兩批試劑盒進(jìn)行平行性試驗(yàn)，平行性試驗(yàn)包括外部對(duì)照質(zhì)控血清和前一批試劑盒中的內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清。這種平行性試驗(yàn)有利于質(zhì)量控制和分析。,質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),f． 使用新批號(hào)或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。原則上，更換不同廠家生產(chǎn)的試劑盒后，結(jié)果偏離程度較大時(shí)，必須重新計(jì)算

46、均值和標(biāo)準(zhǔn)差并建立新的質(zhì)控圖。g． 發(fā)現(xiàn)全部對(duì)照值劇烈位移，立即報(bào)告室主管，分析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。,質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn),h． 外部和內(nèi)部陰性對(duì)照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應(yīng)該注意試劑、技術(shù)或設(shè)備出現(xiàn)問題(如洗板機(jī)等)。i． 實(shí)驗(yàn)室配制新批次的外部對(duì)照質(zhì)控血清或變動(dòng)外部對(duì)照質(zhì)控血清的值時(shí)，必須重新計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，建立新的質(zhì)控圖。j． 操作者在測(cè)定質(zhì)控血清時(shí)，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，

47、應(yīng)填寫失控報(bào)告單，上交室負(fù)責(zé)人，由室負(fù)責(zé)人決定是否要發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。,13S標(biāo)準(zhǔn),均值,,+1s,+2s,+3s,-3s,-2s,-1s,,,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,,,,,,,,,,,,,22S 標(biāo)準(zhǔn),均值,,+1s,+2s,+3s,-3s,-2s,-1s,,,1 2

48、 3 4 5 6 7 8 9 10,,,,,,,,,,,,,,,41S標(biāo)準(zhǔn),均值,,+1s,+2s,+3s,-3s,-2s,-1s,,,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,,,,,,,,,,,

49、,,,,,,,,R4S標(biāo)準(zhǔn),均值,,+1s,+2s,+3s,-3s,-2s,-1s,,,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,,,,,,,,,,,,,,,分析的文檔編制,所有中間的檢測(cè)步驟 所有數(shù)據(jù)和/或計(jì)算 檢測(cè)人中間和最后檢測(cè)的日期 所有重復(fù)數(shù)據(jù) (包括 “失敗” 的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)) 補(bǔ)救措施

50、檢測(cè)轉(zhuǎn)交的程序正確的貯存 試劑盒和試劑,分析后,檢測(cè)報(bào)告 報(bào)告規(guī)范 記錄保存 計(jì)算機(jī)系統(tǒng) 質(zhì)量保證準(zhǔn)確性評(píng)估數(shù)據(jù)審核 能力評(píng)估,檢測(cè)報(bào)告,僅對(duì)授權(quán)人出示用合時(shí)的方式報(bào)告 報(bào)告包含 :實(shí)驗(yàn)室名稱和地址進(jìn)行的檢測(cè)有度量單位的結(jié)果正確的檢測(cè)“正常范圍"必要地進(jìn)行解釋政策禁止對(duì)超出可報(bào)告范圍的結(jié)果進(jìn)行報(bào)告. 重復(fù)/補(bǔ)充報(bào)告的標(biāo)志?所有檢測(cè)報(bào)告存檔一份易獲得的拷貝,報(bào)告規(guī)范,對(duì)每項(xiàng)檢測(cè)分析

51、有不同的標(biāo)準(zhǔn)通常包括在檢測(cè) SOP 中有效限度 – 當(dāng)QC排除報(bào)告可能時(shí)建立 和 遵循一套生命危險(xiǎn)結(jié)果的報(bào)告程序,記錄保留,常規(guī)的診斷性檢測(cè) – 2 年臨床實(shí)驗(yàn)– 完成后2 年記錄安全和 保密原始記錄,中間和最終記錄記錄應(yīng)當(dāng)確保機(jī)密性,整理有序,容易查取,計(jì)算機(jī)系統(tǒng),數(shù)據(jù)庫認(rèn)證報(bào)告前進(jìn)行數(shù)據(jù)驗(yàn)證安全水平的訪問和修改能力 (錯(cuò)誤矯正策略)常規(guī)備份 (設(shè)備外媒體貯存)檢測(cè)和 數(shù)據(jù)登錄人員的驗(yàn)證,即刻法質(zhì)控的建立,即刻法

52、.doc,質(zhì)量評(píng)價(jià),質(zhì)量評(píng)價(jià)又稱質(zhì)量檢驗(yàn).常用于對(duì)實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生的結(jié)果進(jìn)行評(píng)估.通常包括評(píng)價(jià)小組對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的外部評(píng)價(jià)和內(nèi)部評(píng)價(jià).質(zhì)量評(píng)價(jià)是對(duì)質(zhì)量控制和保證計(jì)劃有效性的監(jiān)控. (逆轉(zhuǎn)錄病毒檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室診斷及基本的質(zhì)量控制 里爾.康斯坦丁),質(zhì)量評(píng)價(jià)(External Quality Assessment, EQA),（一）    定義 質(zhì)量評(píng)價(jià)是一種手段，用于判定實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的質(zhì)量。通常使用有關(guān)權(quán)

53、威機(jī)構(gòu)提供的一套質(zhì)控品( 質(zhì)量控制參比血清 )從外部來評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的工作，即對(duì)數(shù)個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和評(píng)價(jià)。這種評(píng)價(jià)方式常稱為室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）。質(zhì)量評(píng)價(jià)用于評(píng)價(jià)質(zhì)量保證體系的效果，其目的在于幫助發(fā)現(xiàn)其質(zhì)控與質(zhì)保系統(tǒng)有無問題。各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)上一級(jí)提供的質(zhì)評(píng)檢驗(yàn)報(bào)告的結(jié)果，檢查其質(zhì)量控制狀況。,必要性 是監(jiān)督檢驗(yàn)質(zhì)量、得到質(zhì)量保證的重要途徑之一。 作為一種有系統(tǒng)、有組織的外部約束和橫向參比措施，不僅有助于提高各參評(píng)實(shí)

54、驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量，增加實(shí)驗(yàn)室間檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，還通過試劑評(píng)價(jià)、方法比較和技術(shù)交流等方式，促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)方法的進(jìn)步和檢驗(yàn)試劑的優(yōu)化，這些工作都直接或間接地提高了檢驗(yàn)質(zhì)量。,HIV實(shí)驗(yàn)室發(fā)出的報(bào)告與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的可靠性息息相關(guān)。目前HIV檢測(cè)項(xiàng)目主要有HIV抗體、P24抗原、免疫印跡確認(rèn)、PCR核酸檢測(cè)和病毒載量等。如何保證檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量，在實(shí)際工作中如何貫徹實(shí)施質(zhì)量保證措施是當(dāng)前的一個(gè)重要課題。,,目前，許多發(fā)達(dá)國家或國際組織都組織了一系列

55、免疫相關(guān)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)工作，其質(zhì)控項(xiàng)目涉及病毒、細(xì)菌、腫瘤標(biāo)記物、激素、免疫組化和流式細(xì)胞技術(shù)等。相關(guān)工作國內(nèi)已部分開展或正在籌備之中，這一領(lǐng)域的進(jìn)步一定會(huì)成為我國HIV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量保證帶來深遠(yuǎn)的影響。,室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)系,室內(nèi)質(zhì)控是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的即時(shí)性評(píng)價(jià)，通過對(duì)室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的精密性。室內(nèi)質(zhì)控是基礎(chǔ)，沒有完善的室內(nèi)質(zhì)控措施就談不上質(zhì)量保證，即使在室間質(zhì)評(píng)中取得很好的成績(jī)也

56、不能說明實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。因此，實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證工作，應(yīng)首先從室內(nèi)質(zhì)控抓起，持之以恒，不斷的觀察、分析和解決實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量問題，才能使檢驗(yàn)工作的質(zhì)量得到穩(wěn)步提高。,室間質(zhì)評(píng)與室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)系,室間質(zhì)評(píng)是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的回顧性評(píng)價(jià)，其主要目的是評(píng)價(jià)和修正實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并與各參評(píng)單位結(jié)果比較，了解本室結(jié)果的偏倚程度，是發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)誤差的重要手段之一。室間質(zhì)評(píng)應(yīng)在室內(nèi)質(zhì)控具有相當(dāng)水平的基礎(chǔ)上進(jìn)行，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室沒有穩(wěn)定可靠的室內(nèi)質(zhì)控措

57、施，就不可能獲得良好的精密性，沒有良好的精密性是談不上準(zhǔn)確性的。因此，實(shí)驗(yàn)室不能好高鶩遠(yuǎn)，舍本求末,只重視室間質(zhì)評(píng)的成績(jī)，而不實(shí)實(shí)在在地抓好室內(nèi)質(zhì)控。當(dāng)然，室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)都是質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一，兩者應(yīng)互為補(bǔ)充，辯證統(tǒng)一，缺一不可。,室間質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,1．國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室和個(gè)別省級(jí)HIV抗體確認(rèn)中心接受國際相關(guān)機(jī)構(gòu)的質(zhì)量評(píng)價(jià)。2．國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室對(duì)全國各省、自治區(qū)和直轄市的HIV確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室和其他HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室

58、進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，并負(fù)責(zé)提供質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)以及有關(guān)文件。3．省級(jí)HIV確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室對(duì)所在省份內(nèi)各級(jí)HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。,室間質(zhì)評(píng)方式（一）派調(diào)查員到實(shí)驗(yàn)室實(shí)際調(diào)查的方式 事先不通知，臨時(shí)派調(diào)查員到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)地調(diào)查，這種調(diào)查要考慮到以下幾點(diǎn)：（1）保證調(diào)查組人員的資格、素質(zhì)和技術(shù)水平。（2）調(diào)查目的和范圍。（3）評(píng)價(jià)方法和標(biāo)準(zhǔn)。（4）評(píng)價(jià)報(bào)告，報(bào)告的發(fā)出及發(fā)出范圍。（5）記錄、資料存檔。

59、（6）經(jīng)費(fèi)。（7）調(diào)查的審核。,,（二）采用問卷調(diào)查表的方式 采用問卷調(diào)查表的方式不用派調(diào)查員實(shí)地調(diào)查，可以節(jié)約經(jīng)費(fèi)。采用問卷調(diào)查表的方式應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：（1）調(diào)查的內(nèi)容應(yīng)全面、廣泛。（2）有相關(guān)資料可以反映調(diào)查內(nèi)容的，應(yīng)有復(fù)印件和調(diào)查表一同返回。（3）應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)返回調(diào)查表，超過時(shí)間范圍返回的說明情況，否則視為調(diào)查無效。（4）調(diào)查表妥善保存，重要數(shù)據(jù)錄入計(jì)算機(jī)建立數(shù)據(jù)庫。（5）調(diào)查表應(yīng)加蓋被調(diào)查單位公章

60、，以保證其真實(shí)性。,（三）發(fā)放質(zhì)控物的調(diào)查方式,實(shí)驗(yàn)室外部質(zhì)量評(píng)價(jià)參比標(biāo)本，由國家艾滋病參比室制備和統(tǒng)一發(fā)放。（1）質(zhì)量評(píng)價(jià)參比標(biāo)本由經(jīng)確認(rèn)試劑確證的HIV抗體陽性、弱陽性和陰性三種血清/血漿所組成。（2）質(zhì)量評(píng)價(jià)參比標(biāo)本必須經(jīng)過嚴(yán)格標(biāo)定和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理（由20-30家確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)），標(biāo)定值以及統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)必須保密。（3）質(zhì)量評(píng)價(jià)參比標(biāo)本血清/血漿應(yīng)清亮、不溶血、無菌和無過多的脂質(zhì)。 （4）質(zhì)量評(píng)價(jià)參比標(biāo)本經(jīng)加熱滅活并加防