熒光定量pcr技術(shù)簡(jiǎn)要

1、熒光定量PCR的化學(xué)原理,,水解探針的MIX,SYBR染料的MIX,SYBR染料,結(jié)合于雙鏈核酸的小溝處與雙鏈DNA結(jié)合后受激產(chǎn)生熒光在變性條件下雙鏈分開(kāi)，熒光消失背景強(qiáng)，非特異性較強(qiáng),SYBR染料法的擴(kuò)增曲線,Taqman探針類(lèi),水解探針-Roche cobas與ABI Taqman,Scorpions®,,,,,雜交探針檢測(cè)－羅氏專(zhuān)利性技術(shù),熒光定量PCR儀的光學(xué)原理,熒光染料的光學(xué)性質(zhì),ABI 7500 Re

2、al-Time PCR Systems 光學(xué)原件,熒光定量PCR的數(shù)據(jù)分析,標(biāo)準(zhǔn)曲線法 2 -△△Ct法,相對(duì)定量,標(biāo)準(zhǔn)曲線法,LogX0與循環(huán)數(shù)呈線性關(guān)系，通過(guò)已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)未知樣品Ct值，就可以在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出未知樣品初始模板量。,優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需作標(biāo)準(zhǔn)曲線 實(shí)用適合于配對(duì)樣本的相對(duì)定量分析,2 -△△Ct法,實(shí)例,舉例-BCR/ABL1融合基因定量檢測(cè),AB