慢性腦缺血大鼠海馬notch1表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化

1、Comment[Edit1]:如何隨機(jī)？請(qǐng)指明具體的隨機(jī)方法。如果是隨便分的，則請(qǐng)刪除隨機(jī)二字慢性腦缺血大鼠海馬Notch1表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化與進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙的關(guān)系1姬亞杰，張博愛，劉榮麗，李星，賈賀，張小敏，劉宇（450052鄭州，鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科）摘要目的觀察慢性腦缺血大鼠海馬Notch信號(hào)通路的表達(dá)變化，初步探討該通路在慢性腦缺血后對(duì)認(rèn)知功能的調(diào)控作用。方法SD大鼠，隨機(jī)采用隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、缺血8周組、缺血1

2、0周組、缺血12周組，每組10只。采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎方法（2VO）制備慢性腦缺血大鼠模型，Mris水迷宮法測(cè)定各組大鼠學(xué)習(xí)記憶功能，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色及Westernblot法測(cè)定大鼠手術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)海馬Notch1的表達(dá)水平。結(jié)果假手術(shù)組的潛伏期為（32.509.70）s，缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為（51.0011.16）、（63.5014.11）、（77.908.41）s缺血后各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力

3、較假手術(shù)組顯著下降(P0.01)；缺血8周組Notch1表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)（46.6014.50）較假手術(shù)組（64.1014.66）明顯降低，缺血后10周陽性細(xì)胞數(shù)（24.709.38）進(jìn)一步降低，缺血后12周陽性細(xì)胞數(shù)（53.2014.22）又有升高趨勢(shì)，達(dá)缺血8周組水平（P＞0.05）。Westernblot檢測(cè)結(jié)果與免疫組化檢測(cè)結(jié)果一致缺血8周組和缺血10周組Notch1的表達(dá)較假手術(shù)組呈進(jìn)行性下降，缺血12周組Notch1的表達(dá)較

4、缺血10周組顯著增高較缺血8周組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論在大鼠慢性腦缺血模型中，Notch信號(hào)通路呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)表達(dá)變化，提示該通路可能參與了缺血后認(rèn)知功能障礙的調(diào)節(jié)。[關(guān)鍵詞]：慢性腦缺血；Notch1；認(rèn)知功能中圖法分類號(hào)：R741.02RelationshipRelationshipbetweenbetweenexpressionexpressionofofNotch1Notch1cognitivecognitivefunctionfunct

5、ionininratrathippocampushippocampusafterafterchronicchroniccerebralcerebralischemiaischemiaJiYajieZhangBoaiLiuRongliLiXingJiaHeZhangXiaominLiuYu(DepartmentofNeurologytheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityZhengzh

6、ouHenan450052China)[AbstractAbstract]ObjectiveTodetecttheexpressionpatternsofNotch1inthehippocampusofchroniccerebralischemiainvestigatewhethertheNotchpathwayisinvolvedintheregulationofcognitiveimpairmentinthehippocampusu

7、nderischemicconditions.MethodsChroniccerebralischemiamodelswereestablishedbypermanentocclusionofbilateralcommoncarotidarteries(2VO)inSDrats.Theratswereassignedto4groups:thosewithchroniccerebralischemiaf8weeks10weeks12wee

8、ksthosegivenshamoperations.ThespatialmemyabilityoftheratswastestedwithMriswatermaze.ImmunohistochemistrywesternblotwereusedtodetecttheproteinlevelofNotch1.ResultsTheintelligenceofrats81012weeksaftertheoperationwasimpaire

9、dobviouslyincomparisonwiththatintheshamoperatedrates.TheproteinexpressionlevelsofNotch1onthe8thweek10thweekofthe2VOgroupweregraduallysignificantlylowerthanthoseoftheshamgroup.Thelevelonthe12thweekwassignificantlyhigherth

10、anthoseofthe10thweektherewerenotsignificantdifferencesinthelevelonthe12thweekthe8thweek.ConclusionTheproteinexpressionofNotch1variesdynamicallyinthehippocampusofchroniccerebralischemiawhichsuggeststhattheNotchpathwaymayb

11、eapotentialmechanismintheregulationofthecognitiveimpairmentinthehippocampusunderischemicconditions.[Key[Keywds]wds]Chroniccerebralischemia；Notch1；CognitivefunctionSupptedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(81000

12、530).Crespondingauth:：ZhangBoaiTel:8637166295113Email:zhangboaidoct@hotmail.com[基金項(xiàng)目基金項(xiàng)目]國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81000530)[通信作者通信作者]張博愛，電話：（0371）66295113，Email:zhangboaidoct@hotmail.comComment[Edit5]:缺血12周的數(shù)據(jù)與假手術(shù)組比較差異似乎更大？Comment[E

13、dit6]:請(qǐng)指明染色方法，DAB只是顯色方法，如免疫組化SPComment[Edit7]:請(qǐng)將圖2中的標(biāo)注abcd改為數(shù)字1234采用單因素方差分析。2結(jié)果2.1水迷宮測(cè)試結(jié)果假手術(shù)組的潛伏期為（32.509.70）s，缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為（51.0011.16）、（63.5014.11）、（77.908.41）s，各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）缺血8周組與假手術(shù)組差異更明顯（P＜0.01

14、），假手術(shù)組、缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為32.509.70s，51.0011.16s、63.5014.11s、77.908.41s，跨越平臺(tái)次數(shù)分別為15.903.11次、11.603.41次、8.202.94次、4.802.49次，潛伏期和跨越平臺(tái)次數(shù)的各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）說明隨著慢性腦缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力呈明顯下降趨勢(shì)。2.2免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果缺血8周組Notch1表達(dá)的

15、陽性細(xì)胞數(shù)較假手術(shù)組明顯降低，缺血后10周陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)一步降低，缺血后12周陽性細(xì)胞數(shù)又有升高趨勢(shì)，達(dá)缺血8周組水平（P＞0.05）。見圖1，表1。A:假手術(shù)組；B:缺血8周組；C:缺血10周組；D:缺血12周組圖1免疫組化檢測(cè)各組大鼠海馬神經(jīng)元Notch1的表達(dá)（DAB染色免疫組化PV，400）2.3Westernblot檢測(cè)結(jié)果各組海馬區(qū)均可見Notch1的表達(dá)。缺血8周組Notch1的表達(dá)較假手術(shù)組明顯降低，缺血后10周其表達(dá)進(jìn)一

16、步降低，缺血后12周又有升高趨勢(shì)，達(dá)缺血8周組水平（P＞0.05）。與免疫組化檢測(cè)結(jié)果一致。見圖2，表1。1:假手術(shù)組2:缺血8周組3:缺血10周組4:缺血12周組圖2Westernblot檢測(cè)各組大鼠海馬神經(jīng)元Notch1的表達(dá)表1各組大鼠Notch1表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)及Westernblot相對(duì)灰度值（）xs?組別陽性細(xì)胞數(shù)相對(duì)灰度值（%）假手術(shù)組64.1014.6666.9014.56缺血8周組46.6014.50a44.309.6

17、0a缺血10周組24.709.38c32.209.13b缺血12周組53.2014.22d51.309.20da：P＜0.01，與假手術(shù)組比較；b：P＜0.0105，c:P0.01與缺血8周組比較；d:P＜0.01，與缺血10周組比較；◇與△比較P＞0.05；●與▲比較P＜0.01；▲與★比較P＜0.05；★與◆比較P＜0.01；◆與▲比較P＞0.053討論腦缺血是神經(jīng)系統(tǒng)一種常見的病理狀態(tài)，既往人們對(duì)腦缺血的研究主要集中在急性腦缺血，