慢性腦缺血大鼠海馬notch1表達的動態(tài)變化

1、Comment[Edit1]:如何隨機？請指明具體的隨機方法。如果是隨便分的，則請刪除隨機二字慢性腦缺血大鼠海馬Notch1表達的動態(tài)變化與進行性認知功能障礙的關系1姬亞杰，張博愛，劉榮麗，李星，賈賀，張小敏，劉宇（450052鄭州，鄭州大學第一附屬醫(yī)院神經內科）摘要目的觀察慢性腦缺血大鼠海馬Notch信號通路的表達變化，初步探討該通路在慢性腦缺血后對認知功能的調控作用。方法SD大鼠，隨機采用隨機數(shù)字表法分為假手術組、缺血8周組、缺血1

2、0周組、缺血12周組，每組10只。采用雙側頸總動脈永久性結扎方法（2VO）制備慢性腦缺血大鼠模型，Mris水迷宮法測定各組大鼠學習記憶功能，應用免疫組織化學染色及Westernblot法測定大鼠手術后各時間點海馬Notch1的表達水平。結果假手術組的潛伏期為（32.509.70）s，缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為（51.0011.16）、（63.5014.11）、（77.908.41）s缺血后各組大鼠的學習記憶能力

3、較假手術組顯著下降(P0.01)；缺血8周組Notch1表達的陽性細胞數(shù)（46.6014.50）較假手術組（64.1014.66）明顯降低，缺血后10周陽性細胞數(shù)（24.709.38）進一步降低，缺血后12周陽性細胞數(shù)（53.2014.22）又有升高趨勢，達缺血8周組水平（P＞0.05）。Westernblot檢測結果與免疫組化檢測結果一致缺血8周組和缺血10周組Notch1的表達較假手術組呈進行性下降，缺血12周組Notch1的表達較

4、缺血10周組顯著增高較缺血8周組無統(tǒng)計學意義。結論在大鼠慢性腦缺血模型中，Notch信號通路呈現(xiàn)動態(tài)表達變化，提示該通路可能參與了缺血后認知功能障礙的調節(jié)。[關鍵詞]：慢性腦缺血；Notch1；認知功能中圖法分類號：R741.02RelationshipRelationshipbetweenbetweenexpressionexpressionofofNotch1Notch1cognitivecognitivefunctionfunct

5、ionininratrathippocampushippocampusafterafterchronicchroniccerebralcerebralischemiaischemiaJiYajieZhangBoaiLiuRongliLiXingJiaHeZhangXiaominLiuYu(DepartmentofNeurologytheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityZhengzh

6、ouHenan450052China)[AbstractAbstract]ObjectiveTodetecttheexpressionpatternsofNotch1inthehippocampusofchroniccerebralischemiainvestigatewhethertheNotchpathwayisinvolvedintheregulationofcognitiveimpairmentinthehippocampusu

7、nderischemicconditions.MethodsChroniccerebralischemiamodelswereestablishedbypermanentocclusionofbilateralcommoncarotidarteries(2VO)inSDrats.Theratswereassignedto4groups:thosewithchroniccerebralischemiaf8weeks10weeks12wee

8、ksthosegivenshamoperations.ThespatialmemyabilityoftheratswastestedwithMriswatermaze.ImmunohistochemistrywesternblotwereusedtodetecttheproteinlevelofNotch1.ResultsTheintelligenceofrats81012weeksaftertheoperationwasimpaire

9、dobviouslyincomparisonwiththatintheshamoperatedrates.TheproteinexpressionlevelsofNotch1onthe8thweek10thweekofthe2VOgroupweregraduallysignificantlylowerthanthoseoftheshamgroup.Thelevelonthe12thweekwassignificantlyhigherth

10、anthoseofthe10thweektherewerenotsignificantdifferencesinthelevelonthe12thweekthe8thweek.ConclusionTheproteinexpressionofNotch1variesdynamicallyinthehippocampusofchroniccerebralischemiawhichsuggeststhattheNotchpathwaymayb

11、eapotentialmechanismintheregulationofthecognitiveimpairmentinthehippocampusunderischemicconditions.[Key[Keywds]wds]Chroniccerebralischemia；Notch1；CognitivefunctionSupptedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(81000

12、530).Crespondingauth:：ZhangBoaiTel:8637166295113Email:zhangboaidoct@hotmail.com[基金項目基金項目]國家自然科學基金資助項目(81000530)[通信作者通信作者]張博愛，電話：（0371）66295113，Email:zhangboaidoct@hotmail.comComment[Edit5]:缺血12周的數(shù)據(jù)與假手術組比較差異似乎更大？Comment[E

13、dit6]:請指明染色方法，DAB只是顯色方法，如免疫組化SPComment[Edit7]:請將圖2中的標注abcd改為數(shù)字1234采用單因素方差分析。2結果2.1水迷宮測試結果假手術組的潛伏期為（32.509.70）s，缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為（51.0011.16）、（63.5014.11）、（77.908.41）s，各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）缺血8周組與假手術組差異更明顯（P＜0.01

14、），假手術組、缺血8周組、缺血10周組、缺血12周組的潛伏期分別為32.509.70s，51.0011.16s、63.5014.11s、77.908.41s，跨越平臺次數(shù)分別為15.903.11次、11.603.41次、8.202.94次、4.802.49次，潛伏期和跨越平臺次數(shù)的各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）說明隨著慢性腦缺血時間的延長，大鼠的學習記憶能力呈明顯下降趨勢。2.2免疫組織化學檢測結果缺血8周組Notch1表達的

15、陽性細胞數(shù)較假手術組明顯降低，缺血后10周陽性細胞數(shù)進一步降低，缺血后12周陽性細胞數(shù)又有升高趨勢，達缺血8周組水平（P＞0.05）。見圖1，表1。A:假手術組；B:缺血8周組；C:缺血10周組；D:缺血12周組圖1免疫組化檢測各組大鼠海馬神經元Notch1的表達（DAB染色免疫組化PV，400）2.3Westernblot檢測結果各組海馬區(qū)均可見Notch1的表達。缺血8周組Notch1的表達較假手術組明顯降低，缺血后10周其表達進一

16、步降低，缺血后12周又有升高趨勢，達缺血8周組水平（P＞0.05）。與免疫組化檢測結果一致。見圖2，表1。1:假手術組2:缺血8周組3:缺血10周組4:缺血12周組圖2Westernblot檢測各組大鼠海馬神經元Notch1的表達表1各組大鼠Notch1表達的陽性細胞數(shù)及Westernblot相對灰度值（）xs?組別陽性細胞數(shù)相對灰度值（%）假手術組64.1014.6666.9014.56缺血8周組46.6014.50a44.309.6

17、0a缺血10周組24.709.38c32.209.13b缺血12周組53.2014.22d51.309.20da：P＜0.01，與假手術組比較；b：P＜0.0105，c:P0.01與缺血8周組比較；d:P＜0.01，與缺血10周組比較；◇與△比較P＞0.05；●與▲比較P＜0.01；▲與★比較P＜0.05；★與◆比較P＜0.01；◆與▲比較P＞0.053討論腦缺血是神經系統(tǒng)一種常見的病理狀態(tài)，既往人們對腦缺血的研究主要集中在急性腦缺血，