高效液相色譜法測定保健食品中維生素a含量的不確定度評定

1、高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的不確定度評定第1頁共9頁高效液相色譜法測定保健食品中維生素高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的不確定度評定含量的不確定度評定黃成安黃康惠潘拾朝張喜金（湯臣倍健股份有限公司，廣東珠海519040）【摘要】目的：目的：全面地分析高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的不確定度來源和影響不確定度的因素。方法：方法：根據(jù)檢測過程，建立數(shù)學(xué)模型，分析影響不確定度因素的來源，通過對不確定度進(jìn)行量化分

2、析，得出擴(kuò)展不確定度。結(jié)果：結(jié)果：高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的擴(kuò)展不確定度為1.843%。結(jié)論：結(jié)論：高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的不確定度主要由標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度校正、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和方法總重復(fù)性引入?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法；維生素A；數(shù)學(xué)模型；不確定度AssessmentofcontentuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCHuangChenganHuangKanghu

3、iPanShichaoZhangXijin(ByHealthCoLtdGuangdongZhuhai519040)【Abstract】Objective:ComprehensivetoanalyzethesourcesinfluencingfactsofcontentuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLC.Methods:Accdingtothetestingprocessamathematica

4、lmodelwasestablishedtoanalyzethesourcesinfluencingfactsinuncertaintythroughthequantitativeanalysisofuncertaintyobtainedtheexpeduncertainty.Result:TheexpeduncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCwas1.843%.Conclusion:Themai

5、nsourcesofuncertaintyofVitaminAinhealthfoodbyHPLCwasregulatingtheconcentrationofstardsolutionpreparationofstardsolutiontherepeatabilityofmethod.【Keywds】HPLCVitaminAMathematicalmodelUncertainty引言維生素A能夠調(diào)節(jié)人體的多種生理機(jī)能，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力

6、，在調(diào)節(jié)體內(nèi)各方面的代謝及促進(jìn)骨骼的生長發(fā)育上有著極其重要的作用，同時它也參與視網(wǎng)膜視紫質(zhì)的合成與再生，維持正常的視覺反應(yīng)，以降低夜盲癥和視力減退的發(fā)生[12]。而維生素A攝入過量也會引起副作用，可損害腦組織等，因此維生素A制劑含量的控制十分重要[3]。本文根據(jù)JJF1059.12012《測量不確定度評定與表示》[4]，并參考JJG1962006《常用玻璃量器檢定規(guī)程》[5]，結(jié)合檢測方法和數(shù)學(xué)模型，對高效液相色譜法測定保健食品中維生素

7、A的含量進(jìn)行不確定度評估，找出不確定度主要來源，為方法的優(yōu)化和評定測量結(jié)果提供依據(jù)。高效液相色譜法測定保健食品中維生素A含量的不確定度評定第3頁共9頁精密加入內(nèi)標(biāo)溶液3mL，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得5個不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度校正精密量取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲備母液至50mL容量瓶中，加入適量乙醇搖勻并定容至刻度以乙醇為空白，在325nm波長處測定，其平均吸光度為0.4376。維生素A的吸光系數(shù)為1835。2.3.5樣品處

8、理2.3.5.1皂化本實驗樣品為維生素A維生素D軟膠囊(兒童型)。取20粒樣品，擠出內(nèi)容物，攪拌均勻。精密稱取試樣0.1g，置于250mL錐形瓶中，用約50mL乙醇使其溶解，直到顆粒物分散均勻為止。加入25mL10%抗壞血酸水溶液、3mL內(nèi)標(biāo)溶液、10mL氫氧化鉀水溶液(1:1)，混勻。于沸水浴回流60min，使皂化完全。取出立刻冷卻至室溫。2.3.5.2提取及濃縮用50mL的水分兩次將皂化液全部轉(zhuǎn)入500mL分液漏斗中，加入100mL

9、乙醚，輕輕搖動，排氣后蓋好瓶塞，室溫下振蕩約10min后靜置分層，將水相轉(zhuǎn)入另一500mL分液漏斗中，按上述方法進(jìn)行第二次萃取。合并醚液，用水洗至近中性。醚液通過無水硫酸鈉過濾脫水，濾液收入500mL圓底燒瓶中，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在50℃2℃充氮條件下蒸至近干(絕不允許蒸干)。殘渣加入適量乙醇，超聲波提取溶解，將乙醇轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶中，用乙醇洗滌圓底燒瓶數(shù)次，洗滌液全部轉(zhuǎn)移到同一25mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，過濾，即得供試品

10、溶液。2.3.5.3測定待儀器穩(wěn)定后分別吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定。3.數(shù)學(xué)模型數(shù)學(xué)模型=10式中：X—樣品中維生素A的含量，mg100g；M—樣品的質(zhì)量，g；V—樣品的稀釋體積，mL；C—樣品溶液中維生素A的濃度，μgmL。由實驗過程和數(shù)學(xué)模型可以看出，影響維生素A測定結(jié)果的不確定度因素有：除了樣品的質(zhì)量，樣品的稀釋體積樣品溶液中維生素A的濃度之外，還有高效液相色譜儀進(jìn)樣的重復(fù)性，樣品處理過程的一致性和