番茄生長素響應(yīng)因子SlARF6在果實(shí)形成和發(fā)育過程中的功能研究.pdf

1、番茄生長素響應(yīng)因子SlARF6在果實(shí)形成和發(fā)育過程中的功能研究重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文（學(xué)術(shù)學(xué)位）學(xué)生姓名：唐雨微指導(dǎo)教師：鄧偉教授專業(yè)：生物學(xué)學(xué)科門類：理學(xué)重慶大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院二〇一六年四月重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要I摘要番茄（SolanumlycopersicumL.）是茄科的代表作物，也是研究果實(shí)發(fā)育的模式植物。ARFs（AuxinResponseFacts）是一類重要的生長素響應(yīng)因子，由特異性調(diào)控依賴生長素的發(fā)育過程的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子

2、家族基因編碼。近年來已有研究報(bào)道一些AFRs家族成員參與了番茄果實(shí)形成和發(fā)育過程。本論文分析了SlARF6序列，結(jié)果顯示其編碼868個(gè)氨基酸，具有典型的ARFs家族的保守結(jié)構(gòu)域：B3DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域、ARF結(jié)構(gòu)域和AUXIAA結(jié)構(gòu)域，是番茄ARFs家族成員，并且與擬南芥ARF6基因同源，具有很近的親緣關(guān)系。我們采用番茄表達(dá)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)SlARF6在所有器官或組織中都有表達(dá)，在莖和盛花期表達(dá)水平很高。通過定量PCR技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證分

3、析結(jié)果，證實(shí)SlARF6在莖和花器官的表達(dá)水平最高，在果實(shí)里面也有表達(dá)。同時(shí)我們又采用RNAi干擾技術(shù)來研究SlARF6在番茄發(fā)育過程中的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)SlARF6下調(diào)表達(dá)的番茄果實(shí)出現(xiàn)種子減少，可育性降低的表型，通過花粉管熒光染色和雜交實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)下調(diào)表達(dá)SlARF6會(huì)降低花粉管進(jìn)入子房與胚珠結(jié)合的能力，從而產(chǎn)生無籽表型。采用RNAsequence技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因番茄進(jìn)行了表達(dá)譜分析，發(fā)現(xiàn)有72個(gè)差異表達(dá)基因參與生長素、乙烯和赤霉素等植物激

4、素的生物合成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程；有61個(gè)差異表達(dá)基因編碼了分別屬于24個(gè)家族的61個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，這些差異表達(dá)基因可能參與或影響了番茄花粉管與胚珠的結(jié)合過程。我們采用超表達(dá)技術(shù)提高了SlARF6在番茄植株中的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因番茄在幼果期到破色期間果實(shí)顏色深綠，葉綠素含量明顯提高，表明SlARF6與果實(shí)發(fā)育過程中的葉綠色形成相關(guān)。我們的研究證實(shí)了SlARF6基因參與了果實(shí)形成和發(fā)育過程，表明了ARF家族基因在番茄發(fā)育過程中的基因功能的多樣性。