利用反向線(xiàn)狀印跡及高通量技術(shù)分別檢測(cè)蜱體內(nèi)梨形蟲(chóng)及全溝硬蜱體內(nèi)細(xì)菌研究.pdf

1、梨形蟲(chóng)病是由頂復(fù)門(mén)、梨形蟲(chóng)目，巴貝斯屬和泰勒屬的宿主特異性血液原蟲(chóng)引起的原蟲(chóng)病的總稱(chēng)，巴貝斯屬和泰勒屬分別引起巴貝斯蟲(chóng)病和泰勒蟲(chóng)病。蜱是一類(lèi)有害的吸血外寄生蟲(chóng)，是梨形蟲(chóng)病的主要傳播媒介。蜱可以通過(guò)直接的接觸和吸血過(guò)程，或者通過(guò)傳播細(xì)菌，原生動(dòng)物或病毒病對(duì)宿主造成寄生性損傷。在熱帶和亞熱帶地區(qū)，梨形蟲(chóng)病可導(dǎo)致家畜和野生動(dòng)物的臨床障礙。這種疾病造成的經(jīng)濟(jì)影響包括：肉類(lèi)和奶制品產(chǎn)量降低，流產(chǎn)，生育能力降低，較高的預(yù)防與治療成本，以及對(duì)全球動(dòng)物

2、和動(dòng)物制品行業(yè)造成數(shù)十億美元的經(jīng)濟(jì)損失。本文的研究結(jié)果包括兩個(gè)方面：
　　1.利用建立的反向線(xiàn)狀印跡雜交技術(shù)對(duì)采自中國(guó)不同省份草地或動(dòng)物體表的不同蜱種所攜帶的梨形蟲(chóng)蟲(chóng)種進(jìn)行調(diào)查，2015年三月至六月對(duì)樣品進(jìn)行收集。結(jié)果表明，RLB檢測(cè)方法具有高度的特異性，可以區(qū)分不同的梨形蟲(chóng)蟲(chóng)種，通過(guò)構(gòu)建的重組質(zhì)粒，計(jì)算其敏感性可達(dá)到102拷貝/μL。草地上收集的蜱樣品可檢測(cè)到單一或混合感染的情況，環(huán)形泰勒蟲(chóng)(33/408,8.1％)和新疆巴貝斯

3、蟲(chóng)未定種(30/408,7.4%)的檢出率最高。利用建立的RLB檢測(cè)方法，對(duì)動(dòng)物體表收集的蜱樣品評(píng)估傳播牛羊巴貝斯蟲(chóng)和泰勒蟲(chóng)蟲(chóng)種的潛在威脅。結(jié)果顯示單一的環(huán)形泰勒蟲(chóng)(118/652,18.1%)感染和呂氏泰勒蟲(chóng)+中華泰勒蟲(chóng)(18/652,2.8%)混合感染的情況最為常見(jiàn)。許多蜱種所攜帶病原范圍比以前報(bào)道的更廣。
　　2.利用建立的反向線(xiàn)狀印跡雜交技術(shù)對(duì)采自我國(guó)黑龍江省的25只全溝硬蜱攜帶梨形蟲(chóng)種進(jìn)行調(diào)查，同時(shí)在16S rRNA基因

4、V4高變區(qū)域的基礎(chǔ)上，利用高通量測(cè)序法對(duì)25只全溝硬蜱的細(xì)菌種類(lèi)分布進(jìn)行分析研究。RLB檢測(cè)結(jié)果顯示，所檢測(cè)的全溝硬蜱沒(méi)有發(fā)現(xiàn)感染或攜帶任何泰勒蟲(chóng)或巴貝斯蟲(chóng)蟲(chóng)種。通過(guò)全溝硬蜱樣品的高通量測(cè)序顯示，檢測(cè)到200多個(gè)細(xì)菌屬，其中一些對(duì)動(dòng)物或人類(lèi)具有潛在的致病重要性，一些細(xì)菌屬可對(duì)環(huán)境造成污染。根據(jù)測(cè)序結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)了立克次氏體和伯氏疏螺旋體這些對(duì)人和動(dòng)物具有致病性的蜱傳細(xì)菌病原。
　　綜上所述，所建立的特異性RLB檢測(cè)方法可以同時(shí)檢測(cè)