藥物雜質(zhì)和檢驗(yàn)

1、第二節(jié) 一般雜質(zhì)及其檢查方法,一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則,《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定： 1. 遵循平行操作原則,（1）儀器的配對性 如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致（2）對照品與供試品的同步操作,2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍 ?1g不超過±2%，＞1g不超過±1% 。,3. 正確的比色、比濁方法。,4. 檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對供試管和

2、對照管各復(fù)查二份。,二、氯化物檢查法,（一）原理 對照法,（二）檢查方法 藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml,納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對照溶液。,于供試

3、溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得,（三）測定條件,1. 標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液 10?gCl?/ml，50ml溶液中含50～80?g的Cl?所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5～8ml。,2. 反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。,（1）加速AgCl渾濁的形成；,（2）產(chǎn)生較好的乳濁；,（3）

4、避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。,3. 試劑：硝酸銀,5. 避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。,4. 供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀,,6. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。,7. 平行操作原則,（四）干擾及排除,1. 若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。,（1）內(nèi)消色法：倍量法，如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。,（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇

5、適量，使其還原褪色后再依法檢查。,2. 當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時(shí)，必需在檢查前除去 （1）碘中氯化物和溴化物的檢查  （2）碘化物中氯化物的檢查 （3）溴化物中氯化物的檢查,3. 不溶于水的有機(jī)藥物,（1）加水振搖，過濾，取濾液進(jìn)行檢查。,（2）加熱使供試品溶解，放冷，過濾，取濾液進(jìn)行檢查。,（3）溶于有機(jī)溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。,4. 有機(jī)藥物中有機(jī)氯雜質(zhì)的檢查，具體情況，

6、具體分析。,示例. 藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（B）A. 硫酸 B. 硝酸 C. 鹽酸 D. 醋酸 E. 磷酸,例1. 中國藥典 （2000年版） 規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，一般取用標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10µgCl－/ml）5～8ml的原因是（D）A. 使檢查反應(yīng)完全B. 藥物中含氯化物的量均在此范圍C.

7、 加速反應(yīng)D. 所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E. 避免干擾,例2. 采用硝酸銀試液檢查氯化物時(shí)，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)B．消除某些弱酸鹽的干擾C．消除碳酸鹽干擾D．消除磷酸鹽干擾E．避免氧化銀沉淀生成,例3. 當(dāng)采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應(yīng)該選用的處理方法為（AB）A．內(nèi)消色法B．外消色法C．比色法D．差示比濁法 E．差示可見分光法

8、,例4. 若要進(jìn)行高錳酸鉀中氯化物的檢查，最佳方法是（D）A. 加入一定量氯仿提取后測定B. 氧瓶燃燒C. 倍量法D. 加入一定量乙醇E. 以上都不對,例5. 下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件（ABC）A. 所用比色管需配套B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C. 避光放置5分鐘D. 用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液做對照E. 在白色背景下觀察,三、硫酸鹽檢查法,（一）原理 對照法,（二）測定條件,1. 標(biāo)準(zhǔn)K2SO4

9、溶液:每1ml 相當(dāng)于0.1mg的SO42－，50ml溶液中含0.1～0.5mg的SO42－所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1.0～5.0ml。,2. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。,3. 試劑：氯化鋇,5. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。,4. 供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀,若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。,（三）干擾及排除,

10、例：藥物中硫酸鹽檢查時(shí)，所用的標(biāo)準(zhǔn)對照液是（D）A. 標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇B. 標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液C. 標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液D. 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 E. 以上都不對,四、鐵鹽檢查法,1. 原理 對照法,（一）硫氰酸鹽法 ChP（2005）、USP（24）,2. 檢查方法 藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成,35m

11、1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，,加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得,3. 測定條件,（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水

12、解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10?g Fe3+/ml，50ml溶液中含10～50?g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0～5.0ml,（2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。,（3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行,（4）檢查Fe2+和Fe3+,（5）鐵鹽檢查時(shí)，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時(shí)可防止光線使硫氰酸鐵還

13、原或分解褪色。 加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+,（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。,4. 干擾及排除,（1）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。,（2）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。,（3）干擾離子的影響,（二）巰基醋酸法 BP（1998） 對照法,本法靈敏度較高，但試劑較貴,,例1. 中國藥典（2005年版）規(guī)

14、定鐵鹽的檢查方法為（A）A. 硫氰酸鹽法B. 巰基醋酸法C. 普魯士藍(lán)法D 鄰二氮菲法E. 水楊酸顯色法,例2. 中國藥典（2005年版）規(guī)定，硫氰酸銨法檢查鐵鹽時(shí)，加入過硫酸銨的目的是（AB） A. 使藥物中鐵鹽都轉(zhuǎn)變?yōu)镕e3+ B. 防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色 C. 使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深 D．防止干擾 E．便于觀察、比較,例3. 某藥物（黃色）欲進(jìn)行鐵鹽檢查，應(yīng)采用下面哪種方法（E）A. 倍

15、量法B. 微孔濾膜過濾法C. 調(diào)色法D. 600～700℃熾灼殘?jiān)鬁y定E. 以上都不對,例4. 中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（D）A. FeB. Fe2+C. Fe3+D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不對,五、重金屬檢查法 以鉛為代表,中國藥典（2005年版）共收載四法。,（一）第一法 硫代乙酰胺法,1. 原理 對照法,適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。,2. 測定條件,（1）用硝酸鉛

16、配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10?g Pb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20?g的Pb2+。,（2）本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5。,（3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑,（1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。,A. 外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。,B. 內(nèi)消色法,C. 改用第四

17、法，微孔濾膜過濾法,3. 干擾及排除,（2）若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾,（3）若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成HFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查,（4）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+

18、后，依第三法檢查,（二）第二法 熾灼殘?jiān)?適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。,500～600℃熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。,1. 原理 對照法,2. 操作方法,含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）,（三）第三法 硫化鈉法,適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。,1. 原理 對照法,2. 測定條件,（1）NaOH

19、堿性條件下,（2）顯色劑：硫化鈉,（四）第四法 微孔濾膜法,適用于含2～5?g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。 依一法檢查，微孔濾膜過濾后比較色斑。,USP（23）檢查重金屬時(shí)，使用硫化氫試液顯色。檢查時(shí)，除用供試管、對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管（含25ml供試品溶液和2ml標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液），三管同法檢查。 我國《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬時(shí)，應(yīng)用該法。,示例1．重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時(shí)溶液

20、控制最佳的pH值是（B）A. 1.5 B. 3.5 C．7.5D. 9.5 E. 11.5,示例2．微孔濾膜法是用來檢查（C）A. 氯化物 B. 砷鹽C. 重金屬 D. 硫化物E. 氰化物,示例3. 中國藥典(2005年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（BC） A. 硫化氫試液 B. 硫代乙酰胺試液 C. 硫化鈉試液 D. 氰化鉀試液

21、 E. 硫氰酸銨試液,示例4. 葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時(shí)，適宜的條件是（C）A. 用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化C. 在pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中D. 用硫化鈉為試液E. 結(jié)果需在黑色背景下觀察,例5. 現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用《中國藥典》上收載的重金屬檢查的哪種方法（C）A. 一法B. 二法C. 三法D. 四法E. 以上都不對,例6. 下面哪些方法為《中

22、國藥典》收載的重金屬檢查方法（ACD） A. 500～600℃熾灼殘?jiān)?按一法操作 B. pH3～3.5條件下，加入硫化氫試液 C. 堿性下，加入硫化鈉試液 D. 按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑 E. 以上都對,六、砷鹽檢查法,（一）古蔡法,遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較,1. 原理 對照法,2. 操作方法,（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備,（2

23、）供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作,3. 測定條件,（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1?gAs/ml。,（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。,（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：,A. 還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；,B. 碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；,C. 氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)

24、地發(fā)生；,D. 可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100 ?gSb存在也不干擾測定。,（4）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。,（5）鋅粒應(yīng)無砷,（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察,4. 干擾及排除,（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。,（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為

25、Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。,（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。 常用的有機(jī)破壞方法：,（4）本法適用于不含Sb或含Sb量小于100?g的供試品。,堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法 酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查,（二）Ag-DDC法 檢查、含量測定 ChP(2005)、USP（24）,,對照法,砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色

26、膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，進(jìn)行比較。,用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（24）用吡啶，ChP（2005）用三乙胺。,本法適用于含Sb量小于500?g的供試品。,（三）白田道夫法 ChP（2005） 含Sb藥物中砷鹽的檢查 如葡萄糖酸銻鈉,,原理 對照法,,,（四）次磷酸法 BP（1998）,原理 對照法,示例. 在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超

27、過百萬分之十的是（D）A. 氯化物 B. 硫酸鹽C. 醋酸鹽 D. 砷鹽 E. 淀粉,示例. 在用古蔡法檢查砷鹽時(shí)，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（C）A. 除去I2 B. 除去AsH3C. 除去H2S D. 除去HBrE. 除去SbH3,示例. 古蔡氏法中，SnC12的作用有（ACD）A. 使As5+→As3+ B. 除去H2SC. 除去I2 D. 組成鋅錫齊E.

28、除去其它雜質(zhì),示例. Ag—DDC法檢查砷鹽的原理為：砷化氫與Ag—DDC吡啶作用，生成的物質(zhì)是（E）A. 砷斑B. 銻斑 C. 膠態(tài)砷D. 三氧化二砷 E. 膠態(tài)銀,示例. 中國藥典（1995年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是（BE） A. 與鋅、酸作用生成H2S氣體 B. 與鋅、酸作用生成AsH3氣體 C. 產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑 D. 比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品

29、砷斑的面積大小 E. 比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強(qiáng)度,示例.用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時(shí)，排除干擾的方法： A. 先用硝酸氧化 B. 先加酸性氯化亞銻還原 C. 改用白田道夫法 D. 先加氰化鉀掩蔽 E. 先加草酸生成沉淀 1. 硫化物（A） 2. 亞硫酸鹽（A） 3. 硫代硫酸鹽（A） 4. 高鐵鹽（B） 5. 銻鹽（C）,示例. Ag—DDC

30、法檢查砷鹽時(shí)，所產(chǎn)生的紅色溶液為（C） A. HDDC吡啶溶液 B. Ag吡啶溶液 C. Ag的膠態(tài)溶液 D. Ag(DDC)溶液 E. AsAg3溶液,示例. ChP（2005）檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時(shí)，應(yīng)選用（B）A. 古蔡氏法B. 白田道夫法C. 碘量法D. Ag—DDC法E. 契列法,示例. 葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有（BCDE） A．P

31、b2+標(biāo)準(zhǔn)液 B．SnCl2試液 C．KI試液 D．Zn E．醋酸鉛棉花,例. Ag-DDC法檢查砷鹽時(shí)，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為（ABCDE）A．將As5+還原為As3+B．有利于AsH3生成反應(yīng)C．抑制SbH3的生成D．形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣E．催化加速生成AsH3,例. 古蔡氏法檢砷，藥典規(guī)定制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑時(shí)，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（C）A. 1mlB.

32、5mlC. 2mlD. 依限量大小決定E. 以上都不對,例. 古蔡氏法檢查所用的溶液是(B)A. 強(qiáng)堿性溶液B. 強(qiáng)酸性溶液C. 含稀鹽酸10ml/50ml溶液D. 含稀硝酸10ml/50ml溶液E. 含強(qiáng)氧化劑(硝酸或過硫酸銨)溶液,例：[1—5]所含待測雜質(zhì)的適宜檢測量為A. 0.002mg B. 0.01～0.02mgC. 0.01～0.05mg D. 0.05～0.08m

33、gE. 0.1～0.5mg 1. 硫酸鹽檢查法中，50ml溶液中(E)2. 鐵鹽檢查法中，50ml溶液中(C)3. 重金屬檢查法中，27ml溶液中(B)4. 古蔡氏法中，反應(yīng)液中(A)5. 氯化物檢查法中，50ml溶液中(D),[1—5]A. 硝酸銀試液 B. 氯化鋇試液C. 硫代乙酰胺試液 D. 硫化鈉試液E. 硫氰酸鹽試液1．藥物中鐵鹽檢查（E）2．磺胺嘧啶中重金屬檢查（D）3

34、．藥物中硫酸鹽檢查（B）4．葡萄糖中重金屬檢查（C）5．藥物中氯化物檢查（A）,[1—5]可用于檢查的雜質(zhì)為A. 氯化物 B. 砷鹽 C. 鐵鹽D. 硫酸鹽 E. 重金屬1．在酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁液的方法（D）2．在酸性溶液中與硫氰酸鹽生成紅色的方法（C）3．在實(shí)驗(yàn)條件下與硫代乙酰胺形成均勻混懸溶液的方法（E）4．Ag-DDC法（B）5．古蔡法（B）,例[1～5] 雜質(zhì)檢查中所

35、用的酸是A. 稀硝酸 B. 稀鹽酸 C. 硝酸 D. 鹽酸 E. 醋酸鹽緩沖液1. 氯化物檢查法（A）2. 硫酸鹽檢查法（B）3. 鐵鹽檢查法（B）4. 重金屬檢查法（E）5. 砷鹽檢查法（D）,檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的無機(jī)雜質(zhì)(金屬氧化物或無機(jī)鹽類)。 1. 原理 樣品炭化后+ H2SO4濕潤→700～800℃熾灼至恒

36、重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑?限量一般為0.1%～0.2%,七、熾灼殘?jiān)鼨z查法,2. 操作方法,,,3. 注意事項(xiàng),（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。,（3）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500～600℃熾灼至恒重。,（2）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。,（4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化,例1. 熾灼殘?jiān)鼨z查法一般加熱恒重的溫度為（C）A. 500～600℃B. 60

37、0～700℃C. 700～800℃D. 800～1000℃E. 1000～1200℃,例2. 熾灼殘?jiān)鼨z查后，將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查時(shí)，熾灼溫度應(yīng)為（A）A. 500～600℃B. 600～700℃C. 700～800℃D. 800～1000℃E. 1000～1200℃,例3. 熾灼殘?jiān)南蘖恳话銥椋‥）A. 1％B. 0.5％～1％C. 0.4％～0.5％D. 0.2％～0.3％E. 0.1％～0.2％,例4.

38、 熾灼殘?jiān)鼨z查時(shí)，炭化后經(jīng)硫酸處理后灰化至完全的稱為（C）A. 灰分B. 殘?jiān)麮. 硫酸灰分D. 熾灼灰分E. 殘余灰分,八、溶液顏色檢查法,控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。,ChP(2000)采用三種方法檢查。,第一法 目視比色法 即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察,觀察方法,,標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制,第二法 分光光度法 單一波長定量,第三法 色差計(jì)法 全波長范圍定量,本法是通過色差計(jì)直接測定溶液的透視三刺激值

39、，對其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。,測色儀器一般為光電積分型色差計(jì),九、易炭化物檢查法,檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。,方法：H2SO4炭化后與對照液比較。,對照液：（1）“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對照液；,比色：同置白色背景前，平視觀察比較。,（3）高錳酸鉀液,十、澄清度檢查法,檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料

40、藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。,1. 檢查方法 對照法,,,2. 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制,中國藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。,反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。,1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個級號）,3. 判斷 藥典中規(guī)定的“澄清

41、”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。,4. 溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑有機(jī)酸的堿金屬鹽類藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過的冷水”,十一、干燥失重測定法,干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法：,（一）常壓恒溫干燥法,適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。,干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。,熾灼殘?jiān)旱诙渭耙院蟾鞔畏Q重

42、均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼０.5h后進(jìn)行。,（二）干燥劑干燥法,適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。,干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5 。,（三）減壓干燥法,適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。,除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。,例[1～5] A．干燥失重測定法 B．熾灼殘?jiān)鼨z查 C．兩者皆是 D．兩者皆不是1. 有機(jī)物雜質(zhì)檢測法（D）2. 不溶物的測定法（D

43、）3. 雜質(zhì)檢查法（C）4. 有機(jī)藥物中不揮發(fā)無機(jī)物的檢測法(B)5. 藥物中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測法（A）,例6. 干燥失重測定的方法有（BCDE）A．熾灼（500～600℃）法B．常壓恒溫干澡法C．減壓干燥法D．干燥劑干燥法E．減壓干燥劑干燥法,例7. 干燥失重測定中應(yīng)注意哪幾個方面（ABCD） A. 供試品平鋪在稱量瓶中的厚度一般不超過5mm B. 干燥溫度一般為105℃ C. 可用干燥劑干燥

44、 D. 主要指水分和揮發(fā)性物質(zhì) E. 測定時(shí)間不超過3小時(shí),（四）熱分析法 熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變,化，對物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)（如熔點(diǎn)和沸點(diǎn)）的確定、鑒別和純度檢查的方法。,亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選,1. 熱重法（TGA）,熱重法是在程序控制溫度下，測量物質(zhì)

45、質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。,記錄質(zhì)量變化對溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時(shí)間(t)。,m,本法適用于藥物結(jié)晶水的測定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。,特點(diǎn)：準(zhǔn)確測量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化速度、樣品用量少、速度快,2. 差熱分析法（DTA）,差熱分析法是在程序控制溫度下，測量待測物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時(shí)間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。,差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品

46、與參比物的溫度差(?T)，?T與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。,△T,本法可鑒別藥物或其多晶形，可檢查藥物的純度,3. 差示掃描量熱法（DSC）,差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測量輸給待測物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的一種技術(shù)。,本法可鑒別藥物或其多晶形、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測定。,十二、有機(jī)溶劑殘留量測定法,1. 有機(jī)溶劑殘留量測定法 是用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機(jī)溶劑，包括苯、氯

47、仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。,2. 檢查方法 中國藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑,色譜條件：固定相：直徑為0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球,載氣：氮?dú)鈾z測器：氫火焰離子化檢測器檢測柱溫：80～170℃,色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國藥典規(guī)定，在殘留溶劑測定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。,（1）用待測物的色譜峰計(jì)算的理論板數(shù)應(yīng)大于1000；,（2）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測物色譜峰的分離度

48、應(yīng)大于1.5；,（3）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，取標(biāo)準(zhǔn)溶液（含限量待測溶劑與內(nèi)標(biāo)液）進(jìn)樣5次，待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5％；若用外標(biāo)法測定，待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于10％,3. 測定法 殘留溶劑的測定有直接進(jìn)樣法（第一法）和頂空進(jìn)樣法（第二法）兩種。,第一法 溶液直接進(jìn)樣法,第二法 頂空進(jìn)樣法,從方法的精密度考慮，二氧六環(huán)、吡啶宜用第一法；苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，環(huán)氧乙烷直接用第二

49、法。,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)及其檢查方法,不同的藥物，由于其合成工藝，原料和結(jié)構(gòu)性能等不同，在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入特有的雜質(zhì)，即特殊雜質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢查，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的，方法的專屬性十分關(guān)鍵。,（一）利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異，檢查藥物中的特殊雜質(zhì) 1、如利用藥物和雜質(zhì)在臭味及揮發(fā)性上的差異、顏色的差異（雜質(zhì)有色，檢查溶液顏色），溶解行為的差異（主藥可溶于水、有機(jī)

50、溶劑或酸、堿，雜質(zhì)不溶，檢查溶液澄清度）、旋光性質(zhì)的差異（限定藥物溶液的比旋度范圍，從而限定雜質(zhì)的含量）、對光吸收性質(zhì)的差異（如雜質(zhì)有UV最大吸收波長而藥物無） ，則限定藥液在該波長處的A值來控制雜質(zhì)；雜質(zhì)與藥物UV譜重疊時(shí)，控制供試液的UV吸收度比值來控制雜質(zhì)的量。雜質(zhì)與藥物的紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異，可用以檢查藥物中低效或無效晶型雜質(zhì)。此外尚有原子吸收分光光度法用于雜質(zhì)（金屬元素）限量檢查；熒光分析法用

51、于雜質(zhì)限量檢查等。,2、利用吸附或分配性質(zhì)的差異檢查藥物中的特殊雜質(zhì) 藥物中的一些雜質(zhì)，如反應(yīng)的中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等，和藥物的結(jié)構(gòu)相近，與某些試劑的反應(yīng)也相同或相似，必須分離后再檢查。由于色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的吸附或分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測，因而廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法檢查特殊雜質(zhì)的方法有：TLC、紙色譜法和HPLC。,（1）TLC法 TLC簡便、快速、靈敏度

52、也較高，又不需要特殊設(shè)備，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多。常用的方法有： ①雜質(zhì)對照品法：適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況。供試液和雜質(zhì)對照品溶液分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，用展開劑展開后，顯色，供試品溶液如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色（或熒光強(qiáng)度）與對照品溶液的主斑點(diǎn)顏色（或熒光強(qiáng)度）比較，不得更深。 雜質(zhì)限量計(jì)算：假設(shè)供試液濃度為0.10g?ml-1，對照品（雜質(zhì)）溶液濃度為0.50 mg?ml-1，

53、點(diǎn)樣量均為5μl： L=（0.50×5/0.1×103×5）×100％＝0.5％,②供試品自身的對照法 適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品的情況。要求供試品與所檢雜質(zhì)對顯色劑所顯的顏色應(yīng)相同，顯色靈敏度也應(yīng)相同或相近。方法：取供試品制成供試品溶液（濃度假設(shè)為20mg?ml-1）。取供試品溶液加溶劑稀釋制成對照品溶液（濃度假設(shè)為0.4 mg?ml-1）。各取10μl，分別

54、點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，展開劑展開，晾干，顯色劑顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于1個（或數(shù)個，視具體藥品而定），其顏色與對照品溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。雜質(zhì)限量計(jì)算L=0.4×10/20×10＝2％,③對照藥物法 （2）HPLC法 HPLC法不僅分離效能高，而且可以準(zhǔn)確地測定各組分的峰面積，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用日益增多。 采用HPLC法檢查雜質(zhì)時(shí)，應(yīng)對儀器進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（柱理論板

55、數(shù)、分離度、拖尾因子等），以保證儀器達(dá)到要求。HPLC法檢查雜質(zhì)的方法有五種類型，僅舉兩種類型，其余請自閱。,① 峰面積歸一化法：通常用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)。 方法：取供試品溶液適量，進(jìn)樣，經(jīng)HPLC分離，測定后，計(jì)算出各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積（含藥物的峰面積，不含溶劑峰面積（做空白試驗(yàn)確定））的百分率，不得超過限量。 注意事項(xiàng) 峰面積歸一化法檢查雜質(zhì)雖簡便、易行、但當(dāng)雜質(zhì)與藥物的吸收程

56、度不一致時(shí)，測定誤差大。應(yīng)用示例：利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)的檢查,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水或0.03mol/L硫酸銨溶液為流動相，檢測波長為207nm。取供試品，加水分別制成每1ml中含0.4mg的供試品溶液與每1ml中含5μg的對照溶液，取對照溶液10 μl注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)試，調(diào)整檢測靈敏度，使主成分色譜峰高度達(dá)滿量程的20％--25％；再取供試品溶液10 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的兩倍，計(jì)算各雜質(zhì)峰面

57、積之和，不得大于總峰面積的1.0％。,②不加校正因子的主成分自身對照法：用于沒有雜質(zhì)對照品時(shí)雜質(zhì)的限量檢查。方法：首先制備供試品溶液（假定濃度為0.1 mg?ml-1）。取此液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)臐舛龋ㄈ綦s質(zhì)限量為1％，則該濃度應(yīng)為1μg?ml-1）,作為對照溶液。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％－30％，取上述兩種溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間

58、的2倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，計(jì)算各雜質(zhì)峰面積之和，不得大于對照溶液主成分峰的峰面積。雜質(zhì)限量：1％應(yīng)用示例：甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑的檢查,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水（15：85）為流動相，檢測波長為300nm。取供試品，加甲醇分別制成每1ml中含0.1mg的供試品溶液與每1ml中含0.01mg的對照溶液。取對照溶液20μl 注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)試，調(diào)整檢測靈敏度，使主成分色譜峰高度達(dá)滿量程的10％-

59、-30％；再取上述兩種溶液各20 μl 分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的兩倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，計(jì)算各雜質(zhì)峰面積之和，不得大于對照溶液主成分峰面積的1％（雜質(zhì)限量：0.1％）。,（二）利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異檢查藥物中的雜質(zhì) 如利用藥物與雜質(zhì)之間的酸堿性的差異、氧化還原性的差異進(jìn)行檢查；利用雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀、顏色、氣體等進(jìn)行檢查。,藥物除檢查一般雜質(zhì)外，還需檢查

60、可能存在的特殊雜質(zhì)，由于藥物品種不同，所含的特殊雜質(zhì)不同（與不同藥物的生產(chǎn)、貯存有關(guān)）。 檢查方法也不同，一般按藥物和雜質(zhì)在物理、化學(xué)性質(zhì)上的差異，采用物理、化學(xué)方法檢查。,1.利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異 臭味和揮發(fā)性的差異、顏色差異、溶解行為差異、旋光性差異、對光吸收差形色譜差異等。 1）溶解行為的差異：如葡萄糖中檢查糊精，葡萄糖在乙醇中加熱溶解，糊精則不溶，規(guī)定應(yīng)澄明。 2）對光吸收的差異：利用

61、藥物與雜質(zhì)對Vis,，UV，IR，原子吸收光譜的不同，進(jìn)行檢查。優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高，適用于微量物質(zhì)的檢查。,UV法：腎上腺素中腎上腺酮的檢查，后者在310nm處有吸收，而腎上腺素沒有，規(guī)定本品配成濃度為2mg/ml的0.05mol/L HCI溶液，于310nm處測定，吸收度A≯0.05,（已知腎上腺酮 ）,3）吸附或分配性質(zhì)的差異（色譜差異） （1）TLC:根據(jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或展開劑的解析能力不同，加以

62、分離和檢查。 ①利用待檢雜質(zhì)的純品作對照：用待檢雜質(zhì)純品（或可能存在的雜質(zhì)純品）作為對照液，與供試液點(diǎn)于同一薄層板上，展開和定位后進(jìn)行檢查。,例如ChP2000枸櫞酸乙胺嗪中檢查N-甲基哌嗪。 板：硅膠G薄層板 點(diǎn)樣：供試品（50mg/ml甲醇液，對照品(N-甲基哌嗪50μg/ml甲醇液），各10μl 展開劑：氯仿：甲醇：氨水(13：5：1） 顯色劑：置碘蒸氣中顯色。 規(guī)定：供試品液所顯與對照

63、品液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，顏色不得深于對照品液主斑點(diǎn)。,②將供試品液稀釋成適當(dāng)濃度作對照（高低濃度對照法） 如ChP2000氫化可的松中檢查其他甾體。 板：硅膠G板。 展開劑：二氯甲烷：乙醚；甲酸：水（385：60：30：2) 點(diǎn)樣：供試液：3mg/ml氯仿：甲醇(9：1)液； 對照液：60 μg/ml（供試液稀釋液），各點(diǎn)樣5μl 顯色劑：堿性四氮唑藍(lán)。,規(guī)定：供試液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不

64、得多于3個。其顏色與對照液的主斑點(diǎn)比較不得更深。 優(yōu)點(diǎn)：不需制備對照標(biāo)準(zhǔn)品，還可配成幾種限量的對照液，簡便易行，應(yīng)用較多。 注意：供試品與所檢雜質(zhì)的顯色靈敏度應(yīng)相同或相近，且斑點(diǎn)顏色相同。③對照藥物法,(2) HPLC法：利用HPLC法檢查藥物中的雜質(zhì)。 ①峰面積歸一化法：計(jì)算各雜質(zhì)峰面積的和占總峰面積的百分率，不能超過限度。檢查中應(yīng)注意的問題：溶劑峰不應(yīng)計(jì)算在總峰面積內(nèi)；色譜峰的記錄時(shí)間一般為主峰保留時(shí)間的

65、倍數(shù)。 優(yōu)點(diǎn)：簡便易行，不需要雜質(zhì)的對照品。 缺點(diǎn)：在檢查波長處，雜質(zhì)和藥物的吸收強(qiáng)度可能有差異，因此控制雜質(zhì)峰面積的百分率不一定就是雜質(zhì)的限量；同時(shí)色譜條件也影響檢查結(jié)果（各雜質(zhì)要求出峰）。,②不加校正因子的主成分自身對照法(TLC中高低濃度對照法）：當(dāng)雜質(zhì)峰面積與主成分峰面積相差懸殊時(shí)，可采用主成分自身對照法。 檢查時(shí)：將供試溶液稀釋成一定濃度作為對照溶液，分別取供試溶液和對照溶液進(jìn)樣分析，供試溶液中各雜質(zhì)峰面積

66、及其總和與對照溶液主成分峰面積進(jìn)行比較，控制供試品中雜質(zhì)的限量。 判定時(shí)一般按兩點(diǎn)：a.顯示的雜質(zhì)峰個數(shù)；b.各雜質(zhì)峰面積及其總和分別與對照溶液主峰面積比較。,③加校正因子的主成分自身對照法 將供試溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)濃度作為對照溶液，分別取供試溶液和對照溶液進(jìn)樣分析，供試液中各雜質(zhì)峰面積總和與校正因子相乘后與對照溶液主成分峰面積比較，計(jì)算供試品中雜質(zhì)的含量。,④內(nèi)標(biāo)法測定樣品中雜質(zhì)的總量限度： 內(nèi)標(biāo)峰加校正

67、因子：配內(nèi)標(biāo)溶液+雜質(zhì)對照溶液 作為校正因子測定液，測定內(nèi)標(biāo)和雜質(zhì)的峰高或峰面積，計(jì)算校正因子。,,式中：As，AR分別為對照品溶液中內(nèi)標(biāo)和對照物的峰面積或峰高，Cs、CR分別為內(nèi)標(biāo)和對照物的濃度。 配內(nèi)標(biāo)液+供試液 測定，量出內(nèi)標(biāo)的峰高和雜質(zhì)的峰高或峰面積，計(jì)算所測雜質(zhì)含量。 濃度,,采用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，用測定組分的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值作定量依據(jù)，可消除進(jìn)樣量不夠準(zhǔn)確引入的誤差。,⑤外標(biāo)法測定供試品中某個雜質(zhì)限

68、量： 用梯度濃度的雜質(zhì)對照液繪制雜質(zhì)峰高與其濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；供試品液同法測定，量出雜質(zhì)峰高，標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對應(yīng)的濃度C，計(jì)算雜質(zhì)限量。 本法由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，應(yīng)采用定量環(huán)進(jìn)樣。（3）GC已廣泛用于藥物的含量測定和雜質(zhì)檢查（同HPLC),2,利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異1．酸堿性的差異：若有雜質(zhì)，可用如下方法檢查：①規(guī)定消耗滴定液的體積；②pH值測定法；③指示劑法。2．氧化還原性質(zhì)的差異