hpv感染與宮頸癌2015

1、HPV感染與宮頸癌Human Papillomavirus(HPV) and Cervical Cancer,看看這位英年早逝的藝人，她死于宮頸癌……,主要內(nèi)容,什么是宮頸癌？關(guān)于HPV宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？HPV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)宮頸癌的篩查如何預(yù)防宮頸癌？,一、什么是宮頸癌？,什么是子宮頸癌？,子宮頸癌又稱宮頸侵潤(rùn)癌，簡(jiǎn)稱宮頸癌，由癌前病變逐步發(fā)展而來的。是目前唯一病因明確、可以預(yù)防的惡性腫瘤。,子宮頸癌現(xiàn)狀,女性第

2、二大常見惡性腫瘤全世界每年新病例數(shù)為56.5萬在發(fā)展中國(guó)家宮頸癌的發(fā)生率為發(fā)達(dá)國(guó)家6倍，有50%的病例發(fā)生在中國(guó)和印度中國(guó)每年新病例為18.15萬中國(guó)每年有3萬多的婦女死于宮頸癌,發(fā)展中國(guó)家的新發(fā)病例多是晚期患者,未能早期診斷細(xì)胞學(xué)檢查未能普及陰道鏡應(yīng)用條件受到限制民眾對(duì)宮頸癌的防范意識(shí)欠缺,發(fā)病年齡,原位癌的發(fā)病年齡為35-39歲浸潤(rùn)癌為40-49歲,宮頸癌的新動(dòng)向,近年來由于生活方式的改變發(fā)病率: 有上升趨勢(shì)

3、發(fā)病年齡: 趨向年輕化,哪些婦女更容易患宮頸癌,性生活過早早孕多產(chǎn)或多次人工流產(chǎn)自己或性伴侶有多個(gè)性伴侶曾經(jīng)或正患有生殖道HPV感染有或曾經(jīng)患有其它性病吸煙、吸毒和營(yíng)養(yǎng)不良內(nèi)分泌紊亂或免疫力低下的婦女,現(xiàn)在基本明確宮頸癌的病因就是高危型HPV的持續(xù)性感染感染HPV病毒到發(fā)展成浸潤(rùn)癌需要大約十年的歷程，只要定期進(jìn)行婦科健康檢查，就可以及早發(fā)現(xiàn)子宮頸癌癌前病變并加以治療，就可預(yù)防子宮頸癌的發(fā)生,宮頸癌可以預(yù)防和治愈,二、關(guān)于

4、HPV(human papillomavirus,人乳頭狀瘤病毒),電鏡下HPV,乳多空病毒科A屬成員直徑50-55nm無被摸正20面體構(gòu)成的病毒殼體,HPV,乳頭瘤病毒科屬小DNA病毒乳頭瘤病毒的基因組主要編碼三組基因三個(gè)癌基因，包括E5、E6和E7，負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程；兩個(gè)調(diào)節(jié)基因，包括E1和E2，負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和病毒基因組的復(fù)制；兩個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白基因，包括L1和L2，組成病毒顆粒,HPV,具有正常細(xì)胞永生化能力及高度

5、種屬特異性和特殊嗜上皮性，病毒DNA以整合形式存在于宿主細(xì)胞中病毒DNA儲(chǔ)存于具生發(fā)活性的基底細(xì)胞，呈隱性狀態(tài)HPV僅限于在人上皮中具有一定分化程度的角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)才能增殖皮膚、粘膜的柱狀上皮和鱗狀上皮是HPV侵犯最敏感之處HPV不進(jìn)入血液，不產(chǎn)生病毒血癥,HPV傳染,屬于常見的性傳播感染 直接的皮膚-皮膚接觸是傳播的最有效途徑病毒不通過血液或體液傳播（例如精液）,HPV感染,10－30％成人感染HPV,性活躍人群甚至更高（

6、50％－80％）好發(fā)年齡20-29歲(40%) 潛伏期: 3 周– 8 月(平均 2.8 月),HPV感染轉(zhuǎn)歸,1%－2%發(fā)生臨床可見的濕疣大多數(shù)感染無癥狀，成為潛伏感染或亞臨床感染(SPI), 與機(jī)體天然免疫有關(guān)一般1－2年內(nèi)自行清除,70%女性可以于二年內(nèi)通過自身免疫消除,SOURCE: GRAPH ADAPTED FROM R. L. WINER ET AL., AMERICAN JOURNAL OF EPIDEMIOLO

7、GY 157, 218 (2003),美國(guó)某大學(xué)467女性大學(xué)生常規(guī)婦檢:HPV的PCR檢測(cè)結(jié)果：生殖道HPV檢出率46% 5年后60％的女性被查出過HPV感染70％女性一年內(nèi)生殖道HPV自行清除,HPV分型,最重要的分類學(xué)單元是型(type) 與宮頸癌相關(guān)程度較為清楚的HPV型歸為高危型HPV（16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 ）和疑似高危型HPV

8、（ 26, 53, 66 ） 與尖銳濕疣等良性疾病相關(guān)的HPV被歸入低危型HPV（ 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81，89 ），一般認(rèn)為這類HPV的感染不會(huì)誘導(dǎo)宮頸癌的發(fā)生,三、宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？,,,HPV致宮頸癌進(jìn)展示意,8—10年（100%治愈）,2—5年（死亡）,,,,正常,低度病變,高度病變,原位癌,侵潤(rùn)癌,,,,,,,宮頸癌前病變,宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變 （C

9、IN）；包括宮頸非典型增生和宮頸原位癌，反映宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過程。從細(xì)胞學(xué)分為CINI、Ⅱ、III級(jí)，包含宮頸鱗狀上皮細(xì)胞內(nèi)病變和腺細(xì)胞內(nèi)病變。,HPV感染多數(shù)不發(fā)展成為宮頸癌，可以在9-16(8-10)個(gè)月消失;間隔半年2次HPV（＋）為HPV持續(xù)感染;28%的持續(xù)感染者 ,在2年內(nèi)發(fā)展為CIN1；70% 的持續(xù)感染者4年內(nèi)發(fā)展為CIN2;,宮頸病變與HPV感染的關(guān)系,HPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件，其相對(duì)危險(xiǎn)度或危險(xiǎn)度比值比

10、高達(dá)250。歸因危險(xiǎn)百分比超過95%；HPV陰性者幾乎不會(huì)發(fā)生宮頸癌,四、HPV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),臨床常用的HPV檢測(cè)方法,病理學(xué)檢查細(xì)胞學(xué)檢查免疫組化檢測(cè)原位雜交技術(shù)檢測(cè)聚合酶鏈反應(yīng)( PCR)技術(shù)　DNA芯片分型檢測(cè)雜交捕獲DNA分析,病理學(xué)檢查,鱗狀上皮疣狀乳頭狀增生表皮角化不全棘層不規(guī)則增厚基底層增生上皮腳延長(zhǎng)中表層出現(xiàn)灶狀分布的挖空細(xì)胞等。,細(xì)胞學(xué)檢查,凹空細(xì)胞、角化不良及濕疣外底層細(xì)胞細(xì)胞學(xué)診斷HPV感染敏

11、感性較差,免疫組化檢測(cè),檢測(cè)HPV的衣殼抗原來進(jìn)一步明確HPV感染所得陽性反應(yīng)定位明確,判斷可靠必須在HPV-DNA 復(fù)制成熟后才有衣殼裝備敏感性較低,原位分子雜交,用來測(cè)定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，檢測(cè)重組體DNA。 通過非放射性探針對(duì)石蠟組織進(jìn)行檢測(cè),能作定位檢測(cè),假陽性率低,但靈敏度不高,大大降低了臨床使用價(jià)值。,雜交捕獲DNA分析,標(biāo)本中的HPV-DNA 與液相中的RNA探針結(jié)合,形成特異性的RNA-DNA

12、雜交體,被微孔板內(nèi)的特異抗體所捕獲,然后被所加的發(fā)光底物檢測(cè),其發(fā)光的強(qiáng)度與標(biāo)本中的DNA 量成比例,因而可對(duì)HPV進(jìn)行半定量檢測(cè)效率高,適于大量人群檢測(cè),臨床上操作簡(jiǎn)便,DNA裂解 → RNA-DNA雜交→ 抗體捕獲 → 化學(xué)發(fā)光 → 計(jì)算機(jī)判讀,裂解 加入探針 雜交 加入二抗和發(fā)光劑,聚合酶鏈反應(yīng)( PCR)技術(shù),設(shè)計(jì)與HPV-DNA互補(bǔ)的一對(duì)特異性核苷酸引物,以HPV-DNA為模板以指數(shù)增長(zhǎng)

13、的速率進(jìn)行體外擴(kuò)增敏感性最高,可對(duì)HPV進(jìn)行分型,測(cè)定病毒載量,發(fā)現(xiàn)新基因型,對(duì)基因進(jìn)行序列分析缺點(diǎn)為樣品間易交叉污染導(dǎo)致假陽性,聚合酶鏈反應(yīng)( PCR)技術(shù),原理：采用HPV13種型別的特異性引物及熒光探針，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）結(jié)合Taqman技術(shù)，對(duì)HPV13種型的特異性DNA核酸片段進(jìn)行分型定性檢測(cè)。最低檢測(cè)限：1.00E+04copies/mL。,聚合酶鏈反應(yīng)( PCR)技術(shù),感染生殖道的HPV可分為兩種：低危型和

14、高危型。本試劑對(duì)生殖道泌尿道分泌物及宮頸細(xì)胞中的人乳頭瘤病毒（Human papillomavims，HPV）16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型68型這13種型別的特異性DNA核酸片段進(jìn)行熒光PCR分型定性檢測(cè)，可用于臨床對(duì)高危型人乳頭瘤病毒感染引起的宮頸癌等疾病的輔助診斷。,五，宮頸癌的篩查,篩查對(duì)象,21歲以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何婦女。高危人群：有多個(gè)性伴

15、侶、性生活過早、HIV / HPV感染、機(jī)體免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識(shí)缺乏。某些情況無需進(jìn)行篩查，如因良性疾病摘除子宮的婦女。,,起始年齡：　　在我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)為25－30歲；經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)為35－40歲。對(duì)于高危婦女人群，篩查起始年齡應(yīng)適當(dāng)提前。終止年齡：　　65歲后患子宮頸癌的危險(xiǎn)性極低，故一般不主張對(duì)65歲以上的婦女進(jìn)行子宮頸癌篩查。,篩查間隔,1、每年一次細(xì)胞學(xué)檢查，連續(xù)2次（-）， 可3年一次2

16、、連續(xù)2次HPV（-），細(xì)胞學(xué)檢查（-） 可5～8年一次3、高危人群：最好每年一次 （CIN及以上、特殊職業(yè)、30歲以上高危HPV感染者）,六，子宮頸癌的生物學(xué)預(yù)防,HPV疫苗,預(yù)防性疫苗： 針對(duì)健康人群。靶向病毒衣殼蛋白L1和L2，刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性中和抗體，以阻斷HPV感染。治療性疫苗： 應(yīng)用對(duì)象為已感染人群。靶向病毒的E6、E7蛋白。主要用于清除在上皮基底細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的病毒和HPV導(dǎo)致的異常細(xì)胞。,