elisa實驗標本的采集、處理和保存

1、ELISA實驗標本的采集、處理和保存實驗標本的采集、處理和保存發(fā)布時間:20091019ELISA實驗標本的采集、處理和保存能夠應(yīng)用ELISA實驗的樣本種類很多，有血清，血漿，細胞上清，細胞裂解液，尿液，關(guān)節(jié)滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了biotnt收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻和試劑盒說明書，部分方法經(jīng)Biotnt驗證過，但有的方法并沒有實際操作過，所以，以

2、下方法僅供參考。一、一、ELISAELISA實驗中血清的采集、處理和保存；實驗中血清的采集、處理和保存；1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中；2、采血后室溫靜置1小時；3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時；20℃下，可放置保存1個月；70℃下，可放置保存6個月；5、根據(jù)你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELIS

3、A測定。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細菌污染，因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。二、二、ELISAELISA實驗中血漿的采集、處理和保存；實驗中血漿

4、的采集、處理和保存；1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中；2、按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?0℃下，可放置保存6個月；4、根據(jù)你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA測定。六、六、ELISAELISA實驗中

5、細胞裂解液的采集、處理和保存；（需要測蛋白濃度）實驗中細胞裂解液的采集、處理和保存；（需要測蛋白濃度）1、取細胞培養(yǎng)板或細胞懸液，用PBS（PH7.27.4）洗滌細胞培養(yǎng)板12次。2、通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑（裂解液），使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心20min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時；20℃下，可放置保存1個月；

6、70℃下，可放置保存6個月；5、根據(jù)你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA測定。七、七、ELISAELISA實驗中肺泡灌洗液的采集、處理和保存；實驗中肺泡灌洗液的采集、處理和保存；1、10%水合氯醛溶液，腹腔麻醉。2、打開腹腔，另取10ml注射器行下腔靜脈采血，盡可能將血放盡。3、在冰面上對左肺進行肺灌洗。取37℃生理鹽水5ml，分三次灌洗：2ml、1.5ml、1.5ml灌洗。回收率在70%以上。4、將肺泡灌洗液用離心機4℃，15

7、00rpm離心10min。5、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時；20℃下，可放置保存1個月；70℃下，可放置保存6個月；6、根據(jù)你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA測定。八、八、ELISAELISA實驗中關(guān)節(jié)滑液的采集、處理和保存；實驗中關(guān)節(jié)滑液的采集、處理和保存；1、口腔關(guān)節(jié)：口腔關(guān)節(jié)：患者取坐位，常規(guī)消毒后，作皮下及關(guān)節(jié)后區(qū)局部浸潤麻醉。然后囑患者大張口，采用裝有2ml生理鹽水的注射器（5號針頭）作關(guān)節(jié)