檢驗(yàn)標(biāo)本的采集分解

1、檢驗(yàn)標(biāo)本的采集,黎平縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 石登燕,檢驗(yàn)標(biāo)本的采集,血液標(biāo)本的采集微生物標(biāo)本的采集,血液標(biāo)本的采集,一、病人采樣前準(zhǔn)備,1．運(yùn)動(dòng)檢驗(yàn)前要求病人處于較好休息狀態(tài)。 因?yàn)閯诶酆罂墒寡獫{葡萄糖、肌酸激酶(cK)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)等升高。長時(shí)間的體力活動(dòng)還可使白細(xì)胞(wBC)、尿素、肌酐及乳酸增高，碳酸氫根減少。因此，取血標(biāo)本時(shí)，應(yīng)在患者相對安靜和情緒穩(wěn)定時(shí)采取。在取血的前一天晚上

2、不應(yīng)有劇烈的運(yùn)動(dòng)，取血當(dāng)日早晨不要走長路，盡量避免上下樓走動(dòng)，取血前應(yīng)有10min的休息。,病人采樣前準(zhǔn)備,2．空腹（禁食8～12h)后采血。但并不是空腹時(shí)間越長越好 。 餐后血中不但葡萄糖升高，而且鈣、磷、膽紅素、尿酸和白蛋白均有改變。但空腹時(shí)間過長(超過16h)，同樣也會(huì)影響血液中成分，如血清白蛋白、補(bǔ)體、轉(zhuǎn)鐵蛋白及葡萄糖等含量下降；血清膽紅素含量增加。故空腹時(shí)間并非越長越好。,病人采樣前準(zhǔn)備,3、采血前晚應(yīng)

3、禁食高脂肪、高蛋白食物、咖啡、濃茶及酒類。 食物進(jìn)餐以后血漿脂肪、蛋白質(zhì)、糖類有所增加。高脂肪飲食可使外源性乳糜微粒、三酰甘油升高，并將影響肝功能、免疫球蛋白、血脂等測定，當(dāng)晚應(yīng)禁食此類食品。同時(shí)停止飲用咖啡、濃茶類飲料及酒類。,病人采樣前準(zhǔn)備,4、時(shí)間 采樣時(shí)間必須考慮病人的生物鐘規(guī)律，特別是激素水平分析，要在來月經(jīng)的第3-5天（經(jīng)期）空腹抽血做性激素六項(xiàng)檢查 。做餐后2h血糖的病人，一定要詳細(xì)

4、告訴病人何時(shí)服用葡萄糖，計(jì)劃在何時(shí)抽血等。對同一病人作多次測定，最好每次在同一時(shí)間收集標(biāo)本，便于比較，以減少該項(xiàng)目在人體內(nèi)晝夜變化的影響。一般檢驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)清晨空腹采集，急診、用藥效果監(jiān)測的除外。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。,病人采樣前準(zhǔn)備,5．藥物 藥物對檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜。例如服用大劑量維生素C可使酶法測定血中葡萄糖、膽固醇、三酰甘油的結(jié)果假性降低；應(yīng)用大劑量青霉素后可使血中AST、cK、肌酐、總蛋白升高，白蛋白、膽

5、紅素降低等。為此要求病人停用一切藥物2d后才可采取標(biāo)本，以免產(chǎn)生偏倚，影響診斷和治療。嚴(yán)禁輸液過程中或輸液4小時(shí)內(nèi)采血，輸液時(shí)急診標(biāo)本應(yīng)在輸液的對側(cè)采集標(biāo)本。,二、常用采血管選擇與檢測項(xiàng)目,1．普通血清管 紅色頭蓋。主要用于血清生化（肝功、腎功、心肌酶、淀粉酶等）、電解質(zhì)（血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等）、甲狀腺功能、藥物檢測、艾滋病檢測、腫瘤標(biāo)志物、血清免疫學(xué)。,常用采血管選擇與檢測項(xiàng)目,2、EDTA抗凝管紫色頭蓋。適用于一般血液學(xué)檢驗(yàn)，

6、即血常規(guī)。采血時(shí)請注意試管上的采血量標(biāo)示（一般為兩毫升），采足血量，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。采血后請立即顛倒混勻5－8次。,常用采血管選擇與檢測項(xiàng)目,3、枸櫞酸鈉抗凝管淺藍(lán)頭蓋。適用于凝血實(shí)驗(yàn)，采血時(shí)請注意試管上的采血量標(biāo)示（一般為兩毫升），采足血量，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。采血后請立即顛倒混勻5－8次。,常用采血管選擇與檢測項(xiàng)目,4、枸櫞酸鈉血沉抗凝管 黑色頭蓋，一般用于血沉檢測。采血時(shí)請注意試管上的采血量標(biāo)示（一般為兩毫升），采足

7、血量，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。采血后請立即顛倒混勻5－8次。,常用采血管選擇與檢測項(xiàng)目,5、肝素抗凝管綠色頭蓋，采血管內(nèi)添加有肝素。適用于血流變試驗(yàn)、血?dú)夥治觥⑽⒘吭販y定。采血時(shí)請注意試管上的采血量標(biāo)示（血流變測定管為5毫升），采足血量，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。采血后請立即顛倒混勻5－8次。,三、常用真空采血管的使用,1、推薦的采血順序?yàn)槟?血清管)→枸櫞酸鈉管→肝素或EDTA管→血沉管。2、主要原因是第一管內(nèi)往往含有組織液,易

8、造成凝血,不適于做血凝測定。3、取血時(shí)患者應(yīng)松弛,環(huán)境溫暖,防止靜脈攣縮，束膊時(shí)間不可過長,禁止拍打手臂,否則可造成局部血液濃縮或激活凝血系統(tǒng)。,常用真空采血管的使用,4、血液與抗凝劑的比例必須精確,抗凝劑在血標(biāo)本中的絕對含量可改變血漿中鈣離子濃度進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5、采血結(jié)束后，我們應(yīng)將相應(yīng)試管的小標(biāo)簽撕下粘貼于相應(yīng)檢驗(yàn)申請單右上角，并在試管標(biāo)簽處寫上病人科別、床號(hào)、姓名。,微生物標(biāo)本的采集,一、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集,1、 

9、采集方法 （1）75%酒精清潔局部皮膚。 （2）待皮膚干后，再用2%—2.5%碘酒從穿刺點(diǎn)中心部位開始消毒，范圍不應(yīng)小于5cm，且不能用手指觸摸消毒后的皮膚。（3）皮膚碘酒干后，穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，嬰幼兒1-5ml。 （4）采血后立即在床旁接種培養(yǎng)瓶，并迅速輕搖，充分混勻防止凝固，但又不可劇震以防溶血。,血培養(yǎng)標(biāo)本的采集,2、注意事項(xiàng) （1）懷疑菌血癥應(yīng)盡早采血，體溫上升（38.5℃）采血可提高陽性率002。

10、 （2）對已經(jīng)使用抗菌藥物，而又不能停藥者，也應(yīng)在下次用藥前采血。切忌不要在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本，也不能從靜脈導(dǎo)管及動(dòng)脈插管中取血。 （3）對接受抗菌藥物治療的病人，培養(yǎng)基與采血量之比可為20:1 (采血5ml)或大于這個(gè)比例。 （4）近年研究表明，將血液注入血培養(yǎng)基前，更換針頭反而易導(dǎo)致污染。,血培養(yǎng)標(biāo)本的采集,（5）每例至少采血兩次，間隔0.5-1h，以利于提高陽性率和區(qū)分感染菌與污染菌。 （6）疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎

11、及布魯氏病的病人，以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜，除在發(fā)熱期采血外，并要多次采血（24h  3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。 （7）采血后立即送檢，如不能立即送檢可置室溫，而不能放置冰箱。 （8）如臨床表現(xiàn)很似敗血癥，而血培養(yǎng)多次陰性者，提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。,二、骨髓培養(yǎng)標(biāo)本的采集,1、采集方法   在病灶部位或髂前（后）上脊處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培養(yǎng)瓶內(nèi)。 2、注意事項(xiàng)

12、 （1）骨髓內(nèi)含有大量的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞，因而骨髓培養(yǎng)對傷寒病人的診斷較血培養(yǎng)優(yōu)越。 （2）用于懷疑細(xì)菌性骨髓炎病人。,三、靜脈導(dǎo)管標(biāo)本的采集,1、采集方法（1）常規(guī)導(dǎo)管部位皮膚消毒（2）無菌方法從病人體內(nèi)拔出靜脈導(dǎo)管，剪下導(dǎo)管尖端5cm，放入無菌瓶中。（3）立即（15min內(nèi)）送檢，避免標(biāo)本干燥。,四、痰標(biāo)本的采集,1、采集方法（1）清晨起床后用涼開水漱口多次，以除去口腔內(nèi)大量雜菌，用力咳出肺深部的膿痰，置于清潔干燥

13、容器中送檢。（2）痰量極少者可用45℃  3%-10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對于咯痰量少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，當(dāng)其咯痰后用無菌棉棒采集標(biāo)本。（3）咳嗽無力或昏迷病人，可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔經(jīng)氣管腔內(nèi)吸引痰液送檢。,痰標(biāo)本的采集,（4）氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。（5）可用支氣管鏡直接在病灶部位采集高濃度的病原菌。（6）用無菌導(dǎo)管經(jīng)鼻腔插入氣管鏡內(nèi)，緩慢注入無菌蒸餾水5ml，取出導(dǎo)管。留取患者在3h

14、內(nèi)咳出的痰液，放入無菌容器中送檢。（7）胃內(nèi)采痰法。無自覺癥狀的結(jié)核病人。有時(shí)可把痰誤咽入胃內(nèi)，因而可采用胃內(nèi)溶物做結(jié)核菌培養(yǎng)，其陽性結(jié)果比咯痰高10%左右，該方法于晨起空腹時(shí)，把滅菌的胃管，從鼻腔送入胃內(nèi)，用20ml注射器抽取胃液。,痰標(biāo)本的采集,2、注意事項(xiàng)（1）痰標(biāo)本的采集以晨痰為準(zhǔn)，此時(shí)患者痰量較多且含菌量也多。（2）標(biāo)本采集后立即送檢，若不能及時(shí)送檢者，可暫存2-8℃冰箱。若晚1-2h接種，會(huì)失去苛氧菌，并使得革蘭陰性菌

15、過分生長。（3）不能接受的標(biāo)本：唾液；24h留的痰（結(jié)核桿菌培養(yǎng)除外）、拭子。,五、咽拭子、口腔拭子的采集,1、采集方法（到細(xì)菌室取專用拭子）（1）患者清水漱口后，由檢查者將其舌外拉，用棉拭子將咽后壁或懸雍垂的后側(cè)反復(fù)擦拭數(shù)次；（2）化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時(shí)，直接用棉拭子在病灶部位擦拭；（3）插入運(yùn)送培養(yǎng)基中立即送檢，防止干燥。,咽拭子、口腔拭子的采集,2、注意事項(xiàng)   （1）棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔

16、黏膜和唾液；   （2）采集標(biāo)本前數(shù)小時(shí)不可用消毒藥物漱口或接觸病灶局部。,六、糞便標(biāo)本的采集,1、采集方法    選取膿血、黏液糞便2-3g，液體糞便取絮狀物1-2ml。盛于滅菌瓶中或蠟紙盒中及時(shí)送檢。,糞便標(biāo)本的采集,2、注意事項(xiàng)（1）標(biāo)本要采集新鮮的，陳舊標(biāo)本影響陽性檢出率；（2）切忌糞尿混合；（3）若要分離阿米巴，標(biāo)本要立即送檢并注意保溫；（4）運(yùn)送培養(yǎng)基

17、可提高陽性率；（5）標(biāo)本在病理早期或治療前采集；（6）一般認(rèn)為用抗菌藥三天后，標(biāo)本培養(yǎng)病原菌陰性。,七、肛拭子的采集,在無法獲得糞便的情況下，可用經(jīng)無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4-5cm（幼兒2-3cm）處，輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后取出，置運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。,八、尿培養(yǎng)標(biāo)本的采集,（一）、中段尿1、采集方法 成年男性和女性分別用肥皂水或 1：1 000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部，再用滅菌水沖洗尿

18、道口，無菌生理鹽水沖去消毒液，然后排尿棄去前段尿液，收集中段尿 5～1 0ml盛于帶蓋的無菌容器內(nèi)送檢。,尿培養(yǎng)標(biāo)本的采集,2、注意事項(xiàng)（1）導(dǎo)尿雖然可以減少污染，但是多次重復(fù)導(dǎo)尿可以造成逆行性感染，因此近年來大多采用中段尿。（2）女性病人最好采取膀胱截石位由護(hù)士采取標(biāo)本，減少污染。（3）采集標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳。（4）采集標(biāo)本后，若不能在1h內(nèi)送檢，暫放4℃冰箱，但不能超過8h。,尿培養(yǎng)標(biāo)本的采集,（5）疑為尿道炎時(shí)可將最

19、初3-4ml尿液收集在滅菌容器內(nèi)。該尿中即使有少數(shù)細(xì)菌，如反復(fù)檢查為同一細(xì)菌，也應(yīng)考慮為病原菌。（6）兒童在多數(shù)情況下，僅沖洗外陰是不夠的，故采集標(biāo)本較為困難。如果尿內(nèi)細(xì)菌明顯增多，可以高度懷疑為尿路感染，無菌則可否定。（7）若細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為兩種或兩種以上細(xì)菌，需考慮污染可能，建議重新留取標(biāo)本送檢。,尿培養(yǎng)標(biāo)本的采集,（二）、膀胱穿刺采集法 避免污染是很困難的，培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時(shí)，或尿厭氧菌培養(yǎng)，或嬰幼兒中段尿采集困

20、難時(shí)，可以用恥骨上穿刺膀胱內(nèi)采尿。（三）、留置導(dǎo)尿者采集法 拔去閉式引流的集尿袋，棄去導(dǎo)尿管前段尿液，留無污染的膀胱內(nèi)尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標(biāo)本。,九、腦脊液標(biāo)本的采集,1、采集方法 由臨床醫(yī)師以無菌方法收集腦脊液3-5ml（細(xì)菌1ml，真菌2ml，抗酸桿菌2ml，病毒1ml）盛于無菌試管或小瓶中立即送檢。2、注意事項(xiàng)  （1）采集標(biāo)本后立即送檢，因腦膜炎奈瑟菌離體后迅速自溶，

21、肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡；  （2）疑為上述細(xì)菌感染時(shí)，應(yīng)注意保溫，不可置冰箱或低溫保存。,十、膽汁標(biāo)本的采集,1、十二指腸引流法     在無菌操作下，將十二指腸導(dǎo)管吞咽至十二指腸乳頭部（距齒65-70cm）時(shí)，收集A液（來自總膽管，為橙黃或金黃色），隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml，經(jīng)1-2min后再采取B液（來自膽囊，為棕黃綠色），隨后收取C液（來自肝膽管，

22、為檸檬色），一般認(rèn)為B液做細(xì)菌培養(yǎng)意義較大。,膽汁標(biāo)本的采集,2、膽囊穿刺法 膽囊造影術(shù)時(shí)，可同時(shí)采取膽汁。3手術(shù)采取法 由總膽管、膽囊直接穿刺采取膽汁。以上采集之標(biāo)本應(yīng)立即送檢，否則置于4℃冰箱內(nèi)，采集時(shí)需小心，避免被唾液、十二指腸液細(xì)菌污染。,十一、穿刺液標(biāo)本的采集,1、穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等。 2、采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后

23、2～3d采集標(biāo)本。,穿刺液標(biāo)本的采集,3、采集方法 ① 無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本； ② 標(biāo)本采集量應(yīng)>1ml(結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)時(shí)應(yīng)為 l～5m1)； ③ 標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中立即送檢； ④ 可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝 5ml標(biāo)本)。,十二、膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,（一）、膿液和創(chuàng)面分泌物標(biāo)本的采集1、開放膿腫

24、 用無菌生理鹽水擦洗病灶表面后，用蘸有無菌生理鹽水的滅菌拭子采取膿液和病灶深部的分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢。 注意盡量取化膿組織與正常組織交界處的膿汁，因?yàn)槟撝行牡募?xì)菌大部分已死亡，交接處的活菌較多，會(huì)提高陽性率。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,2、閉鎖膿腫 一般采用穿刺或手術(shù)引流的方法采取。采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周圍皮膚后，用無菌注射器抽取膿液刺入無菌橡皮塞中送檢；也可于切

25、開排膿時(shí)用無菌棉拭子采樣。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,3、燒傷傷口 燒傷 12h 后，清創(chuàng)，無菌棉拭子做采集標(biāo)本；要注意從多個(gè)創(chuàng)面取樣,燒傷嚴(yán)重感染時(shí)易發(fā)生敗血癥，取樣同時(shí)應(yīng)采集血樣送做血培養(yǎng)(必須同時(shí)做需氧菌培養(yǎng)和厭氧菌培養(yǎng)) 。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,（二）、泌尿生殖道分泌物標(biāo)本 1、尿道分泌物：清洗尿道口，采取尿道溢出的膿性等分泌物,或用無菌拭子插入尿道 2-4cm處輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后取出,置無菌試管中送

26、檢。 2、前列腺液：采集前列腺液時(shí)，先將尿道、膀胱沖洗，然后從肛門用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出。3、精液：受檢者應(yīng)5天未排精,清洗尿道后手淫或體外排精法,射精于無菌容器內(nèi)送檢。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,4、陰道、宮頸分泌物：通過陰道擴(kuò)張器,用滅菌拭子采取陰道口或?qū)m頸管 1-2cm處分泌物,置無菌試管中送檢。盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,三、蜂窩織炎1、用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚；

27、2、用細(xì)針在炎癥最顯著處穿刺吸引；3、抽少量滅菌生理鹽水在針管內(nèi)；4、注入無菌試管內(nèi)送檢。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,四、組織標(biāo)本1、活體組織采取的微量標(biāo)本，可直接接種在培養(yǎng)基內(nèi)；2、表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去；3、深部組織標(biāo)本可經(jīng)皮膚穿刺或手術(shù)切取送檢；4、有時(shí)也可將沾有膿汁的最內(nèi)層敷料放入無菌平皿內(nèi)送檢。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,五、注意事項(xiàng)：1、采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑，應(yīng)在用藥之前采取

28、。2、對大多數(shù)開放傷口，采集前應(yīng)先清創(chuàng)，去除表面菌群。3、除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)。,膿汁及病灶分泌物標(biāo)本的采集,4、閉合膿腫應(yīng)取滲出物和膿腫壁標(biāo)本，不能用拭子采集。開放膿腫處理同開放傷口。5、不要僅僅送檢膿液，應(yīng)在病灶活動(dòng)區(qū)域或基底部采集標(biāo)本，最好是組織標(biāo)本。6、陰道分泌物、宮頸口分泌物標(biāo)本采集前24h內(nèi)禁止性交、盆浴、陰道灌洗和局部上藥等。,十三、眼標(biāo)本采集,1、先用無菌生理鹽水沖洗眼部,然后用棉拭子拭子，再