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文檔簡介
1、實驗2、流動注射化學發(fā)光聯(lián)用技術用于眼藥水中的鹽酸環(huán)丙沙星含量的研究[實驗目的實驗目的]1掌握流動注射技術的基本原理以及化學發(fā)光分析法的基本原理2熟悉流動注射化學發(fā)光分析系統(tǒng)的工作原理及儀器使用方法3.掌握流動注射化學發(fā)光法測量鹽酸眼藥水中鹽酸環(huán)丙沙星含量的方法。[實驗原理實驗原理]化學發(fā)光化學發(fā)光(chemiluminescence)是指某些化學反應中發(fā)出可見光的現(xiàn)象。其發(fā)光機理是:反應體系中的某些物質分子,如反應物,中間體或者熒光物
2、質吸收了反應釋放的能量而由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后從激發(fā)態(tài)回到基態(tài),同時將能量以光輻射的形式釋放出來,產(chǎn)生化學發(fā)光。圖1化學發(fā)光發(fā)生的反應過程直接化學發(fā)光直接化學發(fā)光間接化學發(fā)光間接化學發(fā)光流動注射技術(流動注射技術(FlowInjection):):原始的手工操作和現(xiàn)代化的檢測儀器共存,嚴重阻礙了先進檢測儀器更好的發(fā)揮作用;同時分析過程中的試驗處理往往占去整個分析時間的90%,這種狀況自然不能滿足現(xiàn)代分析化學的要求。流動注射法是為解決這
3、一矛盾在70年代中期出現(xiàn)的溶液處理技術的新觀念。其主要特點包括:①廣泛的適應性:可與多種檢測PabcPMTHVAMPRECVFWW圖1流動注射化學發(fā)光系統(tǒng)示意圖Figure1DiagramofFlowinjectionchemluminescencesystemP.蠕動泵(peristaltic)V.六通閥(sixwayvalve)F.流通池(flowcell)W.廢液(waste)PMT.光電倍增管(photomultiplier)A
4、MP.放大器(amplifier)HV.負高壓(highvoltage)REC.記錄儀(recder)。[實驗步驟實驗步驟]1.1.儀器預熱儀器預熱(1)接通計算機電源,啟動windows系統(tǒng);打開BPCL主機電源,儀器預熱30min以上,選擇所需溫度及負高壓。打開快門(探測器樣品室又下方旋鈕:指示柄端頭位于紅色標記處,快門打開;綠色標記處,快門關閉)不能使探測器頂蓋和快門同時處于開啟狀態(tài),否則會損壞探測器中光電轉換器!開啟BPCL測量
5、程序,設定參數(shù)后啟動測量。(2)清洗流路:開啟蠕動泵,旋緊蠕動泵上面及兩側的4個旋鈕(力度相同保證流速同一流速下的樣品進樣速度一致),選擇蠕動泵轉向(方向錯誤將導致蠕動泵卡?。?,打開蠕動泵,選擇流速(可以用60rpm)。按圖1組裝流路,用0.1moll硝酸清洗流路,而后用0.1mollNaOH清洗流路,最后用二次蒸餾水清洗,直到基線穩(wěn)定(基線信號值和所加負高壓相關,當副高壓為750V時,基線在100單位化學發(fā)光信號為合適)。2.2.數(shù)據(jù)
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