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1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備與滅菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備與滅菌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧?shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)習(xí)并掌握培養(yǎng)基配制的原理,掌握配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的方法和步驟。2、學(xué)習(xí)并了解高壓蒸汽滅菌的原理和操作技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理:二、實(shí)驗(yàn)原理:(一)微生物分離與純化1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備與滅菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,
2、而NaCl提供無(wú)機(jī)鹽。在配制固體培養(yǎng)基時(shí)還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時(shí)溶化,一般實(shí)際應(yīng)用時(shí)在下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化,以免瓊脂燒焦。瓊脂在40℃時(shí)凝固,通常不被微生物分解利用。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌,因此,要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性,以利于細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。三、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑三、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑1、儀器:分析天平;錐形瓶;移液管;高溫電爐;容量瓶;燒杯;無(wú)菌培養(yǎng)皿;pH試紙;膠頭滴管;玻璃試管;酒精燈;
3、高壓蒸氣鍋;玻璃棒;2、試劑:牛肉膏;蛋白胨;NaCl;瓊脂;蒸餾水;四、實(shí)驗(yàn)步驟:四、實(shí)驗(yàn)步驟:(一)分離純化制備試驗(yàn)菌種的菌懸液力計(jì)和溫度計(jì)的指針上升,當(dāng)壓力達(dá)到1.05kgcm2(溫度為121℃)即滅菌開(kāi)始,這時(shí)開(kāi)、關(guān)電源,保證壓力維持在1.05kgcm2,20min左右。⑥中斷熱源,達(dá)到滅菌時(shí)間要求后停止加熱,任其自然降壓,當(dāng)指針回到“0”時(shí),打開(kāi)排氣閥(排氣閥不能過(guò)早打開(kāi),否則培養(yǎng)基因壓力突降,溫度沒(méi)下降而翻騰沖到棉塞處,既損
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