含鋅煅燒牛骨的制備及其成骨能力的研究.pdf

1、牙周病引起牙體脫落、牙槽骨低平以至于需要植骨，植骨材料的研究是個(gè)熱門，好的植骨材料既能夠好的成骨能力也必須滿足局部受力的要求。
　　目的：將鋅離子與煅燒骨（ceramic bovine bone CBB）進(jìn)行結(jié)合，制備CBB/Zn2+復(fù)合支架材料，以求改善CBB的力學(xué)性能及成骨能力，為尋求更好的骨支架材料提供實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。
　　方法：將購(gòu)置的胎牛骨進(jìn)行多次煅燒后，獲得CBB/Zn2+復(fù)合支架材料，（1）使用XRD、SEM、ED

2、XI以及INSTRON萬能力學(xué)儀等檢測(cè)手段，對(duì)材料孔徑大小、孔隙率、主要成分、鋅離子的含量及材料的力學(xué)性能進(jìn)行對(duì)比研究。（2）從新西蘭2周齡的幼兔體內(nèi)提取BMSCs，并對(duì)所提取的細(xì)胞進(jìn)行成骨、成脂誘導(dǎo)分化后進(jìn)行特征性染色，以確保獲得的細(xì)胞為就純凈的干細(xì)胞。（3）將CBB/Zn2+浸泡于完全培養(yǎng)基獲得材料的浸提液，再使用浸提液對(duì)材料的細(xì)胞毒性進(jìn)行檢測(cè)；將CBB/Zn2+與細(xì)胞共同培養(yǎng)，檢測(cè)細(xì)胞的粘附率并用SEM觀察細(xì)胞與材料粘附的情況；將

3、細(xì)胞接種于CBB/Zn2+表面培養(yǎng)14天后，收集細(xì)胞，定量分析成骨細(xì)胞分泌表達(dá)的ALP蛋白，并運(yùn)用RT-PCR統(tǒng)計(jì)分析成骨相關(guān)基因（Ⅰ型膠原纖維（COLⅠ）、骨鈣素（OPN）及骨橋蛋白（OCN））的表達(dá)量。（4）以兔子的下頜骨為手術(shù)區(qū)，人工制造骨缺損模型，給骨缺損區(qū)域分別置入CBB/Zn2+、CBB以及醫(yī)藥級(jí)納米HAP，觀察骨缺損修復(fù)的情況，并利用Micro-CT檢測(cè)新生骨量及材料的降解率，以探討材料在體內(nèi)的成骨能力。
　　結(jié)果：

4、（1）CBB的主要成分為β-TCP，CBB/Zn2+的鋅含量為0.32wt％，孔徑大小為123~346μm孔隙率約70%與CBB相比較有所提高但是不顯著（P＞0.05），而材料的力學(xué)性能比CBB有顯著的提高（P＜0.05）。（2）CBB/Zn2+屬于無毒性材料，SEM觀察下，細(xì)胞可以與有很好的與材料結(jié)合，在促進(jìn)成骨分化方面，ALP的表達(dá)量有所提高但是不顯著（P＞0.05），而成骨相關(guān)基因的表達(dá)明顯加強(qiáng)（P＜0.05）。（3）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)4w

5、、8w、12w肉眼觀察，CBB/Zn2+組修復(fù)區(qū)愈合比CBB組愈合更好更早，新生骨量也都比CBB組高，而材料的降解二者無明顯差異。HAP粉組，4W時(shí)骨缺損愈合及新生骨量都最為突出，而到了8w、12w時(shí)，由于缺損區(qū)域過大，中心區(qū)營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不足以至于發(fā)生壞死。
　　結(jié)論：CBB/Zn2+有很好的生物相容性，材料的機(jī)械性能增強(qiáng)，能有效的促進(jìn)BMSCs向成骨細(xì)胞方向分化，并促進(jìn)成骨相關(guān)蛋白的分泌及成骨相關(guān)基因的高表達(dá)，植入動(dòng)物體內(nèi)同樣能夠很