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1、實(shí)驗(yàn)3種子生活力的測定目的要求目的要求用化學(xué)試劑測定種子生活力,可以在短時間內(nèi)評定種子質(zhì)量。特別是對于有些樹種種子的休眠期長,難于進(jìn)行發(fā)芽測定,采用此法測定種子的生活力就具有明顯的優(yōu)越性。通過實(shí)驗(yàn)要求了解測定種子生活力的基本原理,并學(xué)會其操作程序。一、氯化三苯基四氮唑(TTC)法【原理】凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化還原反應(yīng),而無生活力的種胚則無此反應(yīng)。當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi),并作為氫受體被脫氫輔酶(NADH或NA
2、DPH)還原時,可產(chǎn)生紅色的三苯基甲(TTF),胚便染成紅色。當(dāng)種胚生活力下降時,呼吸作用明顯減弱,脫氫酶的活性亦大大下降,胚的顏色變化不明顯,故可由染色的程度推知種子的生活力強(qiáng)弱。TTC還原反應(yīng)如下:TTC(無色)TTF(紅色)【儀器與用具】培養(yǎng)皿2套;鑷子1把;單面刀片1片;墊板(切種子用)1塊;燒杯1個;棕色試劑瓶;解剖針1把;搪瓷盤1個;pH試紙?!驹噭縏TC溶液的配制:取1gTTC溶于1L蒸餾水或冷開水中,配制成0.1%的T
3、TC溶液。藥液pH應(yīng)在6.5~7.5,以pH試紙試之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)?!痉椒ā?.將玉米、小麥等作物的新種子、陳種子或死種子,用溫水(30℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。2.隨機(jī)取種子2份,每份50粒,沿種胚中央準(zhǔn)確切開,取每粒種子的一半備用。3.把切好的種子分別放在培養(yǎng)皿中,加TTC溶液,以浸沒種子為度。4.放入30~35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40~60min.5.保
4、溫后,傾出藥液,用自來水沖洗2~3次,立即觀察種胚著色情況,判斷種子有無生活力,把判斷結(jié)果記入表321內(nèi)。表321染色法測定種子生活力記載表ClCNNNN2HCNNNNHHCl1.先將待測種子用水浸泡3~4h,待充分吸脹后取出一部分種子,在沸水中煮沸3~5min,作為死種子。2.取浸好的新種子、陳種子和死種子各50粒,如為小麥和玉米,則用單面刀片沿胚部中線縱切成兩半,其中一半用于測定。3.將備好的種子分別放在培養(yǎng)皿內(nèi),加入紅墨水溶液,以
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