食品生物技術基因工程復習題

1、復習題復習題一、名詞解釋基因重組基因重組(gene(generecombination)recombination)：是指DNA片段在細胞內、細胞間，甚至在不同物種之間進行交換，交換后的片段仍然具有復制和表達的功能?？寺。郝。簛碜酝皇甲娴南嗤北净蚩截惖募?。限制性內切酶：限制性內切酶：限制酶是在生物體(主要是微生物)內的一種酶，能將外來的DNA切斷，由于這種切割作用是在DNA分子內部進行的，故名限制性內切酶。黏性末端：黏性末端：被限

2、制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。質粒：質粒：是染色體外能夠進行自主復制的遺傳單位，包括真核生物的細胞器和細菌細胞中核區(qū)外的DNA分子。基因：因：是一切生物體內儲存遺傳信息的，有自我復制能力的遺傳功能單位。CDNACDNA：以RNA為模板，在逆轉錄酶的作用下，生成的RNADNA中的DNA為CDNA。CCCDNACCCDNA：絕大多數(shù)的天然DNA質粒具有共價、封閉、環(huán)狀的分子

3、結構，即CCCDNA。生物技術：生物技術：是在細胞水平上，特別是在分子水平上對生物體遺傳性實現(xiàn)巨大的接近定向改造的一套內容繁多和復雜的技術。DNADNA克?。ǚ肿涌寺?、基因克隆、重組克?。ǚ肿涌寺?、基因克隆、重組DNADNA）：）：應用酶學方法，在體外將外源性遺傳性物質與載體結合成重組DNA分子，繼而通過轉化或轉染宿主細胞、篩選出含有目的基因的轉化子細胞，再進行擴增、提取獲得大量同一DNA分子的過程?；匚慕Y構：回文結構：在切割部位，一條

4、鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。同尾酶：同尾酶：來源各異，識別的靶子序列也各不相同，但都產(chǎn)生出相同的粘性末端。目的基因：目的基因：是人們所需要轉移或改造的基因。ＤＮＡ序列分析：ＤＮＡ序列分析：是指對某一段ＤＮＡ分子或片段的核苷酸排列順序測定，測得組成ＤＮＡ分子的Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ的排列順序基因轉移（基因轉移（transgenosistransgenosis）：）：是借助于物理、化學或生物的手段將外源基因導入受體細胞，并檢查

5、其在該細胞內表達情況的一種技術，是細胞工程中一項重要而應用廣泛的技術。報告基因：報告基因：系指其編碼產(chǎn)物能夠被快速地測定，常用來判斷外源基因是否已經(jīng)成功地導入寄主細胞（器官或組織）并檢測其表達活性的一類特殊用途的基因選擇標記基因：選擇標記基因：簡稱選擇基因，是指可使被轉化的細胞獲得其親本細胞所不具備的新的遺傳特性，從而使得人們能夠使用特定的選擇培養(yǎng)基，將轉化的新細胞從親本細胞群體中選擇出來的一類特殊的基因基因探針：基因探針：是一段與目的

6、基因互補的核酸序列，可以是ＤＮＡ，也可以是ＲＮＡ，用它與待測樣品ＤＮＡ或ＲＮＡ進行核酸分子雜交，可以判斷兩者的同源程度原位雜交：原位雜交：將標記的核酸探針與固定在細胞或組織中的核酸進行雜交，DotDot印跡雜交：印跡雜交：將待測ＤＮＡ或ＲＮＡ的細胞裂解物變性后直接點在硝酸纖維素膜上，不需要限制性酶進行酶切，既可與探針進行雜交反應基因的轉移技術：基因的轉移技術：就是將外源目的基因或DNA片段引人受體生物或細胞并檢查其在轉化細胞中表達結果的

7、一種技術。cDNAcDNA文庫文庫：是指某生物某一發(fā)育時期所轉錄形成的cDNA片段與某種載體連接而成的克隆的集合。RTPCRRTPCR:先用逆轉錄酶作用于mRNA，以寡聚dT為引物合成cDNA第一鏈，然后用已知一對引物，擴增嵌合分子，這種方法稱為逆轉錄PCRmRNA反轉錄合成單鏈cDNA探針；(3)用不對稱PCR合成單鏈DNA探針。23.根據(jù)Nthern雜交的結果可以說明：外源基因是否進行了轉錄。24.RNA分子經(jīng)凝膠電泳后按大小不同分

8、開，然后被轉移到一張硝酸纖維素膜(尼龍膜)上，同一放射DNA探針雜交的技術稱Nthern印跡。25.在Southern印跡技術中，DNA限制性片段經(jīng)凝膠電泳分離后，被轉移到硝酸纖維素膜(或尼龍膜)上，然后與放射性的DNA探針雜交。26.可用T4DNA聚合酶進行平末端的DNA標記，因為這種酶具有5’3’合成酶；和3’5’外切核酸酶的活性。27.根據(jù)外源片段提供的遺傳表型篩選重組體，必需考慮三種因素：(1)__克隆的是完整的基因；(2)__

9、使用的是表達載體；(3)不含內含子。28.Nthern印跡和Southern印跡有兩點根本的區(qū)別：(1)_____印跡的對象不同：Nthern是RNA，Southern是DNA(2)__電泳條件不同，前者是變性條件，后者是非變性條件29.放射免疫篩選的原理基于以下三點：(1)___抗體能夠被吸附到固體支持物上；(2)_______同一個抗原可以同幾種抗體結合；(3)____抗體能夠被標記_30.番茄在運輸和貯藏過程中，由于過早成熟而易腐

10、爛。應用基因工程技術，通過抑制某種促進果實成熟激素的合成能力，可使番茄貯藏時間延長，培育成耐貯藏的番茄新品種，這種轉基因番茄已于1993年在美國上市。請回答：（1）促進果實成熟的重要激素是乙烯。（2）在培育轉基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是限制性內切酶，基因的“針線”是DNA連接酶，基因的“運輸工具”是運載體。（3）與雜交育種、誘變育種相比，通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點是目的性強、育種周期短和克服遠緣雜交的障礙。31.

11、科學家通過基因工程培育抗蟲棉時，需要從蘇云金芽孢桿菌中提取出抗蟲基因，“放入”棉的細胞中與棉的DNA結合起來并發(fā)揮作用，請回答下列有關問題：（1）從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制性內切酶，此工具主要存在于微生物中，其特點是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的位點切割。（2）蘇云金芽孢桿菌一個DNA分子上有許多基因，獲得抗蟲基因常采用的方法是“鳥槍法”。具體做法是：用限制性內切酶將蘇云金芽孢桿菌的DNA切成許多

12、片段，然后將這些片段分別與運載體結合，再通過運載體轉入不同的受體細胞，讓它們在各個受體細胞中大量復制，從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片斷分離出來。（3）進行基因操作一般要經(jīng)過的四個步驟是：提取目的基因、目的基因與載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達。32、在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲