脂肪酸甲酯化方法

1、一、主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于所有的動(dòng)植物油脂和脂肪酸。二、目的油脂及脂肪酸（特別是12碳以上的長(zhǎng)碳鏈脂肪酸）一般不直接進(jìn)行氣相色譜分析，其原因是脂肪酸脂肪酸及油脂的沸點(diǎn)高，高溫下不穩(wěn)定，易裂解，分析中易造成損失。因此，對(duì)脂肪酸及油脂的脂肪酸組分分析時(shí)，先將脂肪酸或油脂與甲醇反映，制備脂肪酸甲酯，降低沸點(diǎn)，提高穩(wěn)定性，然后進(jìn)行氣相色譜分析。三、BF3甲酯化法1、儀器（1）50ml及100ml磨口圓底燒瓶（2）回流冷凝器（長(zhǎng)度20～3

2、0cm，有磨口連接，與燒瓶配套）（3）250ml分液漏斗（4）滴管（5）帶磨口玻璃塞的試管（6）10ml移液管（7）沸石2、試劑（1）正庚烷，色譜純（2）輕汽油（沸程40～60℃）（3）無(wú)水硫酸鈉，分析純（4）0.5M的氫氧化鈉甲醇溶液（不用標(biāo)定），配制如下：稱取2gNaOH溶于100ml甲醇中（甲醇的含水量不得超過(guò)0.5％），該溶液放置一段時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)白色沉淀，這不影響脂肪酸甲酯化制備。（5）12～25％（mm）BF3的甲酯溶液（6）

3、飽和的NaCl水溶液（7）甲基紅指示劑：用60％的乙醇配置0.1％的甲基紅溶液（8）氮?dú)猓汉趿康陀?mgkg3、操作方法，（1）取大約350mg油樣加入50ml燒杯中，移取6ml0.5M的NaOH于油樣中，并加入幾粒沸石，連接回流裝置，開始加熱回流，回流過(guò)程中要不斷搖動(dòng)燒瓶。（2）當(dāng)燒瓶?jī)?nèi)的油珠消失，溶液變得透明時(shí)（大約需要5～10分鐘），從冷凝器上端加7mlBF3甲醇溶液于燒杯內(nèi)（用移液管移?。缓罄^續(xù)回流1分鐘。（3）然后從冷凝

4、管上端加入2～5ml正庚烷后，再回流1分鐘。（4）撤離火源，取出燒瓶，向燒瓶中加入一定量的飽和NaCl溶液，輕輕上下顛倒數(shù)次后，靜置分層。（5）從燒杯內(nèi)的上層溶液中取出約1ml轉(zhuǎn)移到磨口試管中，并加入適量的無(wú)水硫酸鈉，以去除痕量的水分，得到的此甲酯化樣品以備氣相色譜分析用。4、注解（1）BF3有毒，因此該試驗(yàn)應(yīng)在通風(fēng)廚中進(jìn)行，同時(shí)，用后的所有玻璃儀器應(yīng)立即清洗；（2）如果待測(cè)脂肪酸或構(gòu)成油脂的脂肪酸含有2個(gè)以上的雙鍵，建議反應(yīng)的燒杯中先

5、充氮處理；五、酸催化甲酯化——適用于AV2的油脂或脂肪酸1、儀器（1）250ml磨口錐形或圓底燒瓶（2）與燒瓶配套的回流冷凝器（3）50ml錐形瓶（4）150ml或250ml的分液漏斗!（5）電熱磁力攪拌器（6）沸石72、試劑（1）正庚烷，色譜純（2）無(wú)水硫酸鈉，分析純（3）甲醇鈉溶液（不用標(biāo)定），配制如下：稱取1gNaOH溶于100ml甲醇中（甲醇的含水量不得超過(guò)0.5％）（4）甲基紅指示劑：用60％的乙醇配置0.1％的甲基紅溶液（5

6、）氮?dú)猓汉趿康陀?mgkg（6）1MHCl甲醇溶液（無(wú)水，不需標(biāo)定）3、操作方法（1）取約4g油樣于燒杯中；（2）移取40ml甲醇鈉溶液于燒瓶中，并加入幾粒沸石，連接回流裝置，開始加熱回流，回流過(guò)程中要不斷搖動(dòng)燒瓶，直至溶液澄清透明為止（大約需要10～15分鐘），在加入50ml1M得HCl甲醇溶液于燒瓶中，再煮沸10分鐘；（3）撤離熱源，取出燒瓶，并在冷水中冷卻燒瓶；（4）于燒瓶中加入100ml蒸餾水，然后將燒瓶?jī)?nèi)的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到分液漏

7、斗中，并加入30ml正庚烷后，劇烈搖動(dòng)分液漏斗，靜置分層，將放出的下層溶液用30ml正庚烷萃取，萃取的上層溶液倒回分液漏斗中，用蒸餾水對(duì)分液漏斗內(nèi)的脂肪酸酯的正庚烷溶液進(jìn)行多次洗滌，直至廢水層呈中性為止；（5）得到的酯層溶液用無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾，蒸發(fā)得到約20ml的脂肪酸甲酯的正庚烷溶液，以備分析用。4、注解（1）若待分析樣為脂肪酸時(shí)，則可直接取約4g脂肪酸，加入50mlHCl甲醇溶液及沸石，加熱回流10分鐘，其余同3、4、5。（2