高考生物選修3知識點總結(jié)_第1頁
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1、師中學師中學2015屆高三生物科組二輪復習選修資料屆高三生物科組二輪復習選修資料回歸課本,注重基礎(chǔ)!謙虛、淡定!善于思考,勤于總結(jié)!回歸課本,注重基礎(chǔ)!謙虛、淡定!善于思考,勤于總結(jié)!高考生物選修高考生物選修3知識點總結(jié)知識點總結(jié)專題一專題一基因工程基因工程一、基因工程的基本工具基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶限制酶)功能:能夠識別雙鏈識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列分子的某種特定的核苷酸

2、序列,并且使每一條鏈中特定特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一專一性。結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶連接酶(1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和T4—DNA連接酶)的比較:①相同點:都縫合磷酸二酯磷酸二酯鍵。②區(qū)別:EcoliDNA連接酶只能連接黏性末端黏性末端;T4DNA連接酶連接酶能縫合兩種末端兩種末端

3、,但效率較低。3、“分子運輸車”——運載體運載體(1)載體具備的條件:①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。片段插入。③具有標記基因,供重組具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是:質(zhì)粒質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子

4、分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病毒噬菌體的衍生物、動植物病毒二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取目的基因的獲取從基因文庫中獲得、人工合成、基因文庫中獲得、人工合成、PCR擴增擴增。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法_和化學合成法化學合成法_。(了解基因組文解基因組文庫和庫和CDNA文庫?;如何從基因文庫中提取目的基因??文庫?;如何從基因文庫中提取目的基因??)2、基因表達載體的構(gòu)建(關(guān)鍵步驟)基因表達載

5、體的構(gòu)建(關(guān)鍵步驟)組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因目的基因+啟動子+終止子+標記基因(1)啟動子啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段片段,位于基因的首端首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段片段,位于基因的尾端尾端。(3)標記基因的作用標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中是否含有目的鑒定受體

6、細胞中是否含有目的基因基因,從而將含有目的基因的細胞含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因抗生素基因。3、將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞_(1)常用的轉(zhuǎn)化(導入)方法:導入植物植物細胞:常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(雙子葉植物)(雙子葉植物),其次還有基因槍法基因槍法和花粉管通道法花粉管通道法等。導入動物動物細胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。此方法的受體細胞多是受精卵體細胞多是受精卵。師中學師中

7、學2015屆高三生物科組二輪復習選修資料屆高三生物科組二輪復習選修資料回歸課本,注重基礎(chǔ)!謙虛、淡定!善于思考,勤于總結(jié)!回歸課本,注重基礎(chǔ)!謙虛、淡定!善于思考,勤于總結(jié)!胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)。(2)細胞貼壁細胞貼壁:懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上。接觸抑制:觸抑制:細胞數(shù)目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面相互相互抑制抑制時,會停

8、止分裂增殖。(3)動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)營養(yǎng):糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。需加入血清、血漿血清、血漿等天然成分。③溫度溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。④氣

9、體環(huán)境氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所細胞代謝所必需的,CO2作用是維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pH。2、動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物、動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞胚胎細胞核移植(比較容易)和體細胞體細胞核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細胞細胞的原因:卵(母)細胞比較大,容易操細胞比較大,容易操作;卵作;卵(母)細胞細胞質(zhì)多,營養(yǎng)豐富。細胞細胞質(zhì)多,營養(yǎng)豐富。3、動物細胞融合

10、、動物細胞融合(1)原理級方法:細胞膜的流動性。誘導融合的方法:物理物理法包括離心、振動、電刺激離心、振動、電刺激等。化學法化學法用聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)作誘導劑。還可以用滅活的病毒誘導滅活的病毒誘導。(2)動物細胞融合的意義:克服了遠緣雜交的不親和性遠緣雜交的不親和性。項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導手段用法植物體細胞雜交細胞膜的流動性去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合物理法、物理法、化學法化學法克服遠緣雜交不親和性,獲得雜種植株

11、動物細胞融合細胞膜的流動性使細胞分散后誘導細胞融合物理法、物理法、化學法、化學法、滅活的病毒誘導制備單克隆抗體的技術(shù)之一4、單克隆抗體、單克隆抗體(1)抗體:一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量產(chǎn)量低、純度低、特異性差低、純度低、特異性差。(2)雜交瘤細胞雜交瘤細胞的特點:既能大量繁殖,既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體又能產(chǎn)生專一的抗體。(3)單克隆抗體的優(yōu)點單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈特異性強,靈敏

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