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文檔簡介
1、1生物選修三知識點生物選修三知識點專題一基因工程一、基因工程的概念及基本工具1、概念:操作環(huán)境:體外操作水平:原理:優(yōu)點:定向改造生物性狀2、基因工程的基本工具(1)“分子手術刀”:1)來源:主要是從生物中分離純化出來的。2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的斷開,因此具有專一性。3)結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:2.“分子縫合針”——DNA連接酶常用類
2、型EcoliDNA連接酶T4DNA連接酶來源T4噬菌體功能連接黏性末端連接結果縫合被限制酶切開的兩個核苷酸之間的3.“分子運輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。③具有標記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于之外,并具有能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、等二、基因工程的基本操作程序(一)
3、、目的基因的獲取1.目的基因是指:編碼蛋白質的結構基因。2.獲取方法:從基因組文庫中獲取、利用擴增目的基因、利用人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3.PCR技術擴增目的基因(1)原理:(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。(二)、基因表達載體的構建1.目的:使目的基因在受體細胞中
4、,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因、、、等3轉錄翻譯專題2細胞工程一、細胞工程的概念:1、原理和方法:應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法2、操作水平:水平或細胞器水平3、目的:按照人的意愿來改造細胞內的遺傳物質或獲得4、分類:根據(jù)操作對象的不同,分為植物細胞工程和動物細胞工程二、植物細胞工程1.理論基礎(原理):(1)原因:生物體的任何一個細胞都包含本物種的全能性表達的難易程度:受精卵>生殖細胞>干
5、細胞>體細胞;分化程度低的﹥分化程度高的細胞分裂能力強的﹥細胞分裂能力弱的幼嫩的細胞﹥衰老的細胞植物細胞>動物細胞(2)全能性表達的條件:處于狀態(tài),提供一定的營養(yǎng)、、適宜的溫度和酸堿度、無菌條件等2.植物組織培養(yǎng)技術(1)過程:(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細胞產物的工廠化生產。(3)地位:是培育轉基因植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細胞雜交技術過程:(1)去壁:酶解法所用酶為(2
6、)誘導融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激等?;瘜W法一般是用作為誘導劑。(3)、植物體細胞雜交成功的標志:(4)優(yōu)點:克服了。(5)變異類型:4、植物細胞工程的應用再生再生融合的原生質體融合的原生質體雜種植株雜種植株胚狀體胚狀體愈傷組織愈傷組織雜種細胞雜種細胞去壁去壁植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B原生質體原生質體A原生質體原生質體B融合融合激素、光激素、光根、芽根、芽完整植株完整植株愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體離體的植物器離體
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