選修三知識點填空答案

1、1選修選修3《3《現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)代生物科技專題》專題專題1基因工程基因工程基因工程的概念概念基因工程是指按照人們的愿望（定向變異）（定向變異），進行嚴格的設(shè)計，通過體外體外（體內(nèi)、體外）DNADNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在分子分子水平水平上進行設(shè)計和施工的，又叫做DNADNA重組技術(shù)技術(shù)?；蚬こ碳夹g(shù)的原理原理：基因重組基因工程的優(yōu)點：（優(yōu)

2、點：（1）目的性強，能夠定向的改變生物的品質(zhì)。（）目的性強，能夠定向的改變生物的品質(zhì)。（2）克服遠緣雜交不親和）克服遠緣雜交不親和。1.11.1基因工程的基本工具基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”——限制酶限制酶（全稱：限制性核酸內(nèi)切酶）（1）主要來源：原核生物。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定特定的核苷酸序列（被識別序列具反向?qū)ΨQ反向?qū)ΨQ特點），并且使每一條鏈中特定特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵

3、斷開，因此具有專一專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性黏性末端末端和平末端末端。（4）與解旋酶的區(qū)別：解旋酶：斷開堿基對間氫鍵氫鍵限制酶：斷開兩個脫氧核苷酸之間（即磷酸與脫氧核糖之間）的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵2.“分子縫合針分子縫合針”——DNADNA連接酶連接酶(1)兩種DNA連接酶（EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都連接磷酸二酯磷酸二酯鍵。②區(qū)別：EcoliDNA連接酶來

4、源于T4噬菌體噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶：只能將單個核苷酸單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶：連接兩個兩個DNADNA片段片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3.“分子運輸車”——運載體載體（1）運載體具備的條件：①具有一至多個限制酶切點，供外源具有

5、一至多個限制酶切點，供外源DNADNA片段插入片段插入。②能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。③具有標記基因，供重組具有標記基因，供重組DNADNA的鑒定和選擇的鑒定和選擇。④能在受體細胞中穩(wěn)定保存（對受體細胞無害對受體細胞無害），大小合適。（2）最常用的載體是質(zhì)粒質(zhì)粒它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體之外，獨立于細菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的很小的雙鏈環(huán)狀環(huán)狀DNADNA分子分子。（3）其它

6、載體：λ噬菌體的衍生物噬菌體的衍生物、動植物病毒動植物病毒。3（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段片段，位于基因的首端首端（編碼區(qū)上游的非編區(qū)），含有RNARNA聚合酶聚合酶識別和結(jié)合的位點，有助于RNA聚合酶驅(qū)動基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段片段，位于基因的尾端尾端（編碼區(qū)下游的非編區(qū)）。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將

7、含有目的基因的將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因抗生素基因，此外還有熒光蛋白基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定維持穩(wěn)定和表達表達的過程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（該方法主要針對雙子葉植雙子葉植物植物和裸子裸子植物，而對大多數(shù)單子葉單子葉植物無效。利用農(nóng)桿菌Ti

8、質(zhì)粒上的TDNA可整合到受全細胞染色體DNA上的特性）。其次還有基因槍法基因槍法（又稱微彈轟擊法），以及花粉管通花粉管通道等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射法顯微注射法。此方法的受體細胞多是受精卵受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因原因是：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少。最常用的原核細胞是大腸桿菌大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用鈣離子鈣離子處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞，再將重組表達載重

9、組表達載體DNADNA分子分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3.重組細胞導(dǎo)入受體細胞的成功率很低，需利用標記基因篩選含有基因表達載體受體細胞。第四步：目的基因的檢測和鑒定第四步：目的基因的檢測和鑒定1.分子水平的檢測（1）首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNADNA上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因方法技術(shù)：DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)基因探針：用放射

10、性同位素或熒光分子等標記的目的基因單鏈。檢測對象：DNA存在標志：出現(xiàn)雜交帶。（2）其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRNA方法技術(shù)：DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)基因探針：用放射性同位素或熒光分子等標記的目的基因單鏈。檢測對象：mRNAmRNA。存在標志：出現(xiàn)雜交帶。（3）最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法技術(shù)：抗原抗原抗體雜交抗體雜交存在標志：出現(xiàn)雜交帶。目的基因翻譯成的蛋