2012cb966500 非整合人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（ips）及相關(guān)技術(shù)用于β地中海貧血治療的研究

1、項(xiàng)目名稱：非整合人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（非整合人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（iPSiPS）及）及相關(guān)技術(shù)用于相關(guān)技術(shù)用于β地中海貧血治療的研地中海貧血治療的研究首席科學(xué)家：潘光錦潘光錦中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院康研究院起止年限：2012.12012.1至2016.82016.8依托部門：中國科學(xué)院中國科學(xué)院細(xì)胞庫。本研究擬對現(xiàn)有的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)：利用不同發(fā)育階段的IVF廢棄的胚胎（從桑椹胚到孵出的晚期囊胚

2、）分離的人ESC細(xì)胞進(jìn)行均一性研究，尋找最優(yōu)化的細(xì)胞分離時(shí)間；通過對人源性的飼養(yǎng)層細(xì)胞及無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系進(jìn)行優(yōu)化，建立安全、穩(wěn)定的人胚胎干細(xì)胞系技術(shù)平臺。并在此基礎(chǔ)上，建立不同突變類型β地中海貧血人胚胎干細(xì)胞株10株以上。非整合β地中海貧血病人iPS細(xì)胞與地貧胚胎干細(xì)胞比較性研究。對比研究地貧ES及iPS，建立其表觀遺傳和基因表達(dá)的數(shù)據(jù)庫。利用基因芯片及高通量DNA測序技術(shù)，對比檢測地貧iPS與ES在SNP，DNA甲基化(DNAmeth

3、ylation)，組蛋白修飾(HistoneModification)，外顯子序列(ExonSequencing)等方面的差異。全面評價(jià)iPS在全能性，表觀遺傳學(xué)，基因組完整性，相關(guān)功能性細(xì)胞分化的能力等，明確造血分化用iPS的全能性，安全性等應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)。3、研究修復(fù)地貧、研究修復(fù)地貧iPSiPS的突變基因。探討和評價(jià)經(jīng)基因修復(fù)等操的突變基因。探討和評價(jià)經(jīng)基因修復(fù)等操作后作后iPSiPS的基因組及表觀遺傳的穩(wěn)定性，多能性及安全性等指標(biāo)。建

4、的基因組及表觀遺傳的穩(wěn)定性，多能性及安全性等指標(biāo)。建立多樣性的非整合地貧立多樣性的非整合地貧iPSiPS細(xì)胞庫。細(xì)胞庫。利用基因重組技術(shù)修復(fù)突變基因?；蛐迯?fù)后iPS基因組及表觀遺傳學(xué)穩(wěn)定性的研究。通過基因芯片的技術(shù)手段檢測基因修復(fù)后iPS的SNP，CNV等代表基因組穩(wěn)定性的指標(biāo)。并進(jìn)行外顯子測序(ExonSequencing)來確定有無重要基因發(fā)生突變等。利用CHIP結(jié)合高通量測序技術(shù)確定經(jīng)體外基因修復(fù)后的iPS在組蛋白修飾，DNA甲