實驗常用培養(yǎng)基及基本特性

1、常用常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基及基本特性及基本特性1、RPMI1640MediumRPMI1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?；驉盒栽錾陌准毎?，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K562、HL60、Jurkat、Daudi、IM9等成淋巴細胞淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞淋巴瘤細胞以及HCT15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱最低必需培養(yǎng)基，它僅

2、含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEMAlpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。3、DMEM高糖高糖（標準型）是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)更適合高密度懸浮更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，也

3、可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yǎng)。4、DMEM低糖低糖（標準型）是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。5、DMEMF12DMEMF12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結合，稱為DMEMF12培養(yǎng)基（DMEF12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎，以利用F12含有較豐富

4、的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在DMEMF12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。6、McCoy’s5AMcCoy’s5AMedium主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設計，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些一些淋巴細胞淋巴細胞培養(yǎng)培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支

5、持。如何正確選擇細胞培養(yǎng)基如何正確選擇細胞培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是實驗室里最常見和最基本的實驗了，但卻不是最簡單的。別小看細胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態(tài)不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、thermofisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEMF12都是應

6、用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)?！鬗EM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度。◆Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mgL，后來為了某些細胞的生長

7、需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mgL，這就是大家常說的低糖和高糖了?！鬭MEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞。◆Ham’sF12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)。F12還可以與還可以與DMEM等體積混合使用，等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培得到一種高濃度