實驗一ms培養(yǎng)基的配制

1、實驗一 實驗一 MS 培養(yǎng)基的配制 培養(yǎng)基的配制一、實驗?zāi)康模毫私?MS 培養(yǎng)基的配制原理和方法，掌握其配制過程和分裝方法。二、實驗材料與儀器：電子天平、量筒、燒杯、玻璃棒、組培瓶、移液器、6 種母液、白沙糖、瓊脂、氫氧化鈉、鹽酸、酸度計或 pH 試紙。三、實驗方法與步驟1、母液配制（1）大量元素(母液Ⅰ) (2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 鐵鹽(母液Ⅲ) (4) 有機(jī)成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)(

2、6－BA，NAA)以上各種營養(yǎng)成分的用量，除了母液Ⅰ為 20 倍濃縮液外，其余的均為 100 倍濃縮液。2、1 L 固體 MS 培養(yǎng)基配制（1） 用電子天平稱出 8 g 瓊脂粉和 30 g 蔗糖放在燒杯中，加入少量的蒸餾水在微波爐中加熱使之溶解。（2）用量筒從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為 50 ml，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA 和ⅣB各 10ml。（3）最后用蒸餾水定容到 1 L；用 2 mol/L NaOH 或 2 m

3、ol/LHCL 溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH 值至 5.8～6.0。（4）用量筒量取 100ml 液體培養(yǎng)基分裝在組培瓶里，再用移液器取適量的 6－BA 和 NAA 放入組培瓶里。（5）在 1.1kg/cm2 壓力（約 121℃）高壓滅菌鍋中滅菌 15～20 min；滅菌后，放置于室溫自然冷卻凝固待用。3、實驗分組本實驗分五組，每組負(fù)責(zé)配制一組培養(yǎng)基組合：（1）MS+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（2）MS+

4、0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA（3）MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（4）MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（5）MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA4、其他需要滅菌的實驗材料剪刀、鑷子、蒸餾水、濾紙、培養(yǎng)皿、組培瓶。四、分析1.MS 母液分得更加細(xì)，一般實驗室只分大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)成分四大類。這里將大量元素中鈣離子與硫酸根離子分開配，避免產(chǎn)生不溶物，將硼酸也

5、單獨列出來。另外，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累。2. 配固體 MS 培養(yǎng)基時一定要調(diào) pH 值，如果 pH 值較小，培養(yǎng)基不易凝固。3. 有些激素可以高壓滅菌，如 6-BA 和 NAA，有些則不能高壓滅菌，如 IAA 和玉米素(ZT)。實驗一 實驗一 MS 培養(yǎng)基的配制 培養(yǎng)基的配制一、實驗?zāi)康模毫私?MS 培養(yǎng)基的配制原理和方法，掌握其配制過程和分裝方法。二、實驗材料與

6、儀器：電子天平、量筒、燒杯、玻璃棒、組培瓶、移液器、6 種母液、白沙糖、瓊脂、氫氧化鈉、鹽酸、酸度計或 pH 試紙。三、實驗方法與步驟1、母液配制（1）大量元素(母液Ⅰ) (2) 微量元素(母液Ⅱ) (3) 鐵鹽(母液Ⅲ) (4) 有機(jī)成分(母液Ⅳ) ⅣA 和ⅣB (5) 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)(6－BA，NAA)以上各種營養(yǎng)成分的用量，除了母液Ⅰ為 20 倍濃縮液外，其余的均為 100 倍濃縮液。2、1 L 固體 MS 培養(yǎng)基配制（1

7、） 用電子天平稱出 8 g 瓊脂粉和 30 g 蔗糖放在燒杯中，加入少量的蒸餾水在微波爐中加熱使之溶解。（2）用量筒從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為 50 ml，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA 和ⅣB各 10ml。（3）最后用蒸餾水定容到 1 L；用 2 mol/L NaOH 或 2 mol/LHCL 溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH 值至 5.8～6.0。（4）用量筒量取 100ml 液體培養(yǎng)基分裝在組培瓶里，再用移液器取適量的

8、 6－BA 和 NAA 放入組培瓶里。（5）在 1.1kg/cm2 壓力（約 121℃）高壓滅菌鍋中滅菌 15～20 min；滅菌后，放置于室溫自然冷卻凝固待用。3、實驗分組本實驗分五組，每組負(fù)責(zé)配制一組培養(yǎng)基組合：（1）MS+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（2）MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA（3）MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA（4）MS+2mg/L 6-BA+0.

9、1mg/L NAA（5）MS+3mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA4、其他需要滅菌的實驗材料剪刀、鑷子、蒸餾水、濾紙、培養(yǎng)皿、組培瓶。四、分析1.MS 母液分得更加細(xì)，一般實驗室只分大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)成分四大類。這里將大量元素中鈣離子與硫酸根離子分開配，避免產(chǎn)生不溶物，將硼酸也單獨列出來。另外，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累。2. 配固體 MS 培養(yǎng)基時一定要調(diào)